张旺
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医学院药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细菌sRNA与抗菌药物的药理作用及耐药性被引量：3
- 2015年
- 非编码微小RNA即microRNA在细胞生长、增殖、分化、凋亡等生命过程中起重要的调控作用,几乎参与所有疾病的病理生理过程,为近年研究的热点课题。原核细胞也存在非编码RNA,称为小RNA（small non-coding RNA,sRNA）。sRNA作为一种应答元件,通过与靶mRNA碱基互补配对抑制靶基因mRNA翻译或（和）降解mRNA,在转录后水平调控细菌多种功能,影响细菌生长与繁殖。
- 张旺李元建
- 关键词：SRNA抗菌作用耐药性
- 新型人工miRNA表达框架的构建及其有效性验证被引量：2
- 2014年
- 目的构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架并验证其有效性。方法用融合PCR技术在体外构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架。经测序比对后,以该表达框架与报告基因质粒p EGFP-N2分别共转染人肝癌细胞系Hep G2、人宫颈癌细胞系He La和人肺腺癌细胞系A549,48 h后用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况并用流式细胞仪定量检测其抑制效率。结果构建的人工miRNA表达框架经测序比对正确;共转染该表达框架和报告基因质粒p EGFP-N2后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞中发出荧光的细胞数量减少,荧光强度明显降低。流式细胞术检测结果显示,Hep G2细胞、He La细胞和A549细胞中共转染组和单独转染组的细胞荧光表达率差异均有统计学意义(t分别为20.80、30.35和20.34,P均<0.01)。结论成功构建靶向EGFP的人工miRNA表达框架,且此表达框架能有效而特异地抑制EGFP蛋白在Hep G2细胞、He La细胞和肺癌A549细胞中的表达。
- 徐慧范张玲张旺杨伦宇彭剑雄
- 关键词：EGFP基因HEPHEA549细胞
