方显扬
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- 古菌蛋白Ssh10b的P62A突变体三维溶液结构及其热稳定性的结构基础的NMR研究
- ＜正＞自20世纪80年代Sac10b从嗜热古菌Sulfolobus acidocaldarius中发现以来,在目前基因组已测序的古菌中都发现了Sac10b家族的同源蛋白,其序列非常保守。在较高等的真核生物,如高等植物,原...
- 方显扬王金凤
- 文献传递
- 突变对嗜热古菌蛋白[P62A]Ssh10b主链构象影响的核磁共振研究
- 2008年
- 嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/P62A]Ssh10b的质粒,并获得了高纯度的15N和13C双标记[D51N/P62A]Ssh10b.通过对异核三共振NMR实验数据的解析,完成了对[D51N/P62A]Ssh10b的主链共振近乎完全的指认.比较突变以及未突变蛋白质的主链1HN和15N化学位移,在[P62A]Ssh10b的结构基础上进行分析发现,D51N突变显著地影响了α2螺旋骨架构象,并进一步影响到古菌Lβ2α2loop区域、β4的N端区域、Lβ3β4loop的C端区域以及β3与Lβ3β4loop的交界区域.结果表明,由于D51N突变破坏了α2螺旋上K48和D51之间的盐键,影响了[D51N/P62A]Ssh10b的α2螺旋构象,并影响到蛋白的其它相关部位的局部构象,说明[P62A]Ssh10b的高热稳定性可能与其溶液构象密切相关.为进一步运用NMR研究[D51N/P62A]Ssh10b分子结构特性与耐热机制间的关系奠定了基础.
- 罗权方显扬邓志威王金凤
- 关键词：核磁共振
