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重组猪干扰素α的真核表达纯化及其单克隆抗体制备被引量：1: 2023年; 为了获得猪源干扰素α(PoIFN-α)的单克隆抗体,本研究首先将PoIFN-α基因连接到pcDNA3.1真核表达载体从而构建rPoIFN-α质粒,通过真核表达系统(ExpiCHOTM)表达蛋白,并用亲和层析技术纯化后对重组蛋白进行鉴定;以重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠后进行细胞融合,用建立的间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,亚克隆后通过制备腹水得到单克隆抗体,纯化制备的抗体并鉴定。结果显示,成功构建了rPoIFN-α质粒,通过ExpiCHOTM表达系统成功表达出正确大小的可溶性蛋白,分子质量为20 ku;通过间接ELISA筛选和5次亚克隆,得到1株能稳定分泌抗IFN-α蛋白的单克隆细胞株(3c6),亚型鉴定为IgG1亚型、IgGκ轻链;Western-blot结果显示,抗体可以特异识别IFN-α,抗体纯化后效价检测可达1∶256000。上述结果表明,本试验制备的rPoIFN-α蛋白纯度高,单克隆抗体特异性强,可以在以后的研究中用于建立不同的IFN分子的检测方法,为研究猪病毒感染和免疫过程中不同细胞因子的应答情况提供便利。; 孙波涛张涛清孙冰洁王常英李亚军杨锐秦晓东冷青文郑海学; 关键词：干扰素蛋白表达纯化单克隆抗体

九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种九组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白和Y蛋白组成的非洲...; 郑海学茹毅刘华南郭建宏田宏曹伟军卢炳州杨帆申超超张伟李亚军杨洋石正旺张克山何继军靳野李丹朱紫祥毛箬青郝荣增张贵财党文马旭升秦晓东刘湘涛

十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗: 本发明属于生物技术领域，涉及一种十一组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、X蛋白、Y蛋白、A蛋白和B...; 郑海学茹毅刘华南郭建宏田宏曹伟军卢炳州杨帆申超超张伟李亚军杨洋石正旺张克山何继军靳野李丹朱紫祥毛箬青郝荣增张贵财党文马旭升秦晓东刘湘涛

一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白、制备方法及应用。本发明首先提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0截短蛋白，显著促进了E0蛋白的表达，产量可达0.35mg/ml，而且不影响E0蛋白的免疫原性，可用...; 郑海学茹毅李亚军郝荣增杨洋卢炳州秦晓东刘华南张贵财李丹张越陈娇吴秀萍赵东梅任蕊芳

碘化钾或含有碘化钾的组合物在制备用于治疗非洲猪瘟的药物中的新用途: 本发明属于非洲猪瘟治疗技术领域，具体涉及碘化钾或含有碘化钾的组合物用于预防或治疗非洲猪瘟的新用途。本发明意外发现，碘化钾(KI)能够抑制非洲猪瘟病毒蛋白p72和p30的表达，抑制非洲猪瘟病毒基因拷贝数和病毒滴度，能够抑制...; 郑海学李丹吴盼雪李玲霞杨文萍张敬朱国强茹毅田宏秦晓东冯涛杨帆张克山

sting敲除猪源细胞的构建方法及应用: 本发明涉及sting敲除猪源细胞的构建方法及应用，属于细胞构建技术领域。本发明利用CRISPR‑Cas9载体及慢病毒包装技术构建猪源细胞Sting敲除细胞株。本发明所述构建方法能够成功构建猪源Sting蛋白缺失的稳定细胞...; 秦晓东杨洋赵帅阳张瑞张志东; 文献传递

一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法: 本发明公开了一种线粒体未折叠蛋白反应体系的建立方法。所述的方法包括以下步骤：1)根据G‑TPP分子式，合成高纯度TRAP1抑制剂G‑TPP；2)将步骤1)中所述的G‑TPP在DMSO中稀释成10mmol/ml的储存液；3...; 李彦敏武永淑秦晓东张志东殷相平孙跃峰

一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体m19、制备方法及应用: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种O型口蹄疫病毒结构蛋白的抗体、制备方法及应用。本发明以O型口蹄疫病毒146s作为免疫原，免疫Balb/c小鼠，经细胞融合，获得一株高效分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系，并获得了一种鼠单克隆...; 郑海学杨洋秦晓东茹毅张伟杨帆曹伟军朱紫祥卢炳州赵东梅任蕊芳吴秀萍郝荣增刘华南李亚军吴国华李丹田宏张克山毛箬青

七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒疫苗: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种七组分抗原非洲猪瘟组合疫苗。本发明首先提供了一种由非洲猪瘟病毒抗原P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、X蛋白、C129R蛋白和Y蛋白组成的七组分抗原非洲猪瘟纳米颗粒组合...; 郑海学茹毅刘华南郭建宏田宏曹伟军卢炳州杨帆申超超张伟李亚军杨洋郝荣增朱紫祥石正旺张克山何继军靳野李丹毛箬青张贵财党文马旭升秦晓东刘湘涛

一种山羊SLAM基因的克隆与原核表达方法: 本发明公开了一种山羊SLAM基因的克隆与原核表达方法，具体涉及小反刍兽疫病毒(PPRV)检测技术领域，具体方法如下：S1、获得山羊SLAM基因和氨基酸序列，设计特异性引物，通过RT‑PCR方法获得SLAM基因片段；S2、...; 李彦敏普拉贾帕蒂·米拉窦永喜朱学亮张志东赵帅阳秦晓东; 文献传递

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秦晓东