李银鹏
- 作品数:6 被引量:29H指数:4
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- shRNA介导mcl-1基因沉默对人肝癌细胞HepG2凋亡的影响被引量:2
- 2008年
- 目的观察shRNA介导mcl-1基因沉默对肝癌细胞HepG2的凋亡作用。方法构建靶向mcl-1基因的shRNA表达载体,经脂质体介导将其转入HepG2细胞内,48 h后利用RT-PCR和Western blot检测mcl-1 mRNA和蛋白水平,Hoechst染色进行凋亡形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果所构建的shRNA表达载体能明显降低HepG2细胞内mcl-1 mRNA和蛋白水平。转染shRNA表达载体的细胞经Hoechst染色出现明显凋亡核形态学表现。经流式检测,shRNA组的凋亡率明显高于阴性对照组(7.74%±0.97%vs2.81%±0.46%,P=0.001)。结论shRNA介导mcl-1基因沉默可导致HepG2细胞凋亡,靶向mcl-1基因的RNA干扰可能是肝癌治疗的有效途径之一。
- 李银鹏朱惠明侯晓华
- 关键词:肝癌MCL-1小发夹RNA
- 三腔二囊管压迫与内镜下食管静脉曲张套扎术联合治疗食管静脉曲张出血的疗效观察被引量:11
- 2014年
- [目的]观察三腔二囊管压迫与内镜下食管静脉曲张套扎术(EVL)联合治疗食管静脉曲张出血的疗效。[方法]回顾性总结289例食管静脉曲张出血的患者行EVL治疗的结果,其中176例活动性出血的患者EVL前行三腔二囊管压迫止血术。EVL后2周内再发出血患者行内镜引导下三腔二囊管置入术,控制出血后再次行胃镜检查,必要时再次EVL治疗。[结果]EVL前三腔二囊管压迫止血有效率为95.46%(168/176),首次内镜下食管静脉曲张套扎治疗有效率为96.19%(278/289)。11例EVL后2周内发生再出血患者,行内镜引导下三腔二囊管置入及压迫术,其中9例压迫成功;5例再次行EVL治疗后控制出血。三腔二囊管压迫与EVL联合治疗食管静脉曲张出血的总有效率为99.31%(287/289)。[结论]三腔二囊管与EVL联合治疗食管静脉曲张出血,可以提高EVL的总有效率。
- 姜岭梅王立生李银鹏李迎雪宋洋
- 关键词:食管静脉曲张内镜下食管静脉曲张套扎术
- 靶向mcl-1基因的shRNA真核表达质粒的构建与筛选被引量:5
- 2008年
- 目的:构建靶向髓细胞白血病基因-1(myeloidcell leukemia-1,mcl-1)的shRNA的真核表达质粒,并筛选出沉默mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒.方法:设计3对针对mcl-1基因不同位点的shRNA片段,构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(shRNA1-3)并行酶切鉴定和测序分析.然后通过脂质体将重组质粒转染到肝癌细胞株HepG2中,48h后测定转染率,并分别采用RT-PCR及Western blot检测mcl-1mRNA和蛋白表达情况.结果:重组质粒经酶切鉴定与测序证实构建成功.质粒在HepG2细胞中的转染率约为64%.shRNA1-3导入HepG2细胞48h后,mcl-1mRNA水平和蛋白水平均明显低于空白对照组和阴性对照组(0.61±0.02,0.56±0.02,0.46±0.01vs0.97±0.01,0.95±0.00;0.53±0.01,0.48±0.03,0.36±0.01vs0.90±0.03,0.88±0.01,均P<0.01).与shRNA1和shRNA2相比,shRNA3对mcl-1mRNA和蛋白的抑制作用均最强(52.6%vs36.3%,42.9%;63.2%vs41.5%,49.6%,均P<0.01).结论:成功构建并筛选出的靶向mcl-1的shRNA真核表达质粒对肝癌细胞HepG2内的mcl-1表达具有明显抑制作用.
- 李银鹏朱惠明侯晓华
- 关键词:肝细胞癌RNA干扰短发夹状RNA
- 双探针原位杂交法检测慢性肝病和肝细胞癌患者肝组织TTV DNA的感染状况被引量:4
- 2004年
- 目的 探讨慢性肝病和肝细胞癌患者肝组织TTVDNA的感染状况。方法 采用PCR扩增法分别合成G1a、G2b两种亚型的双链TTVDNA探针。应用两型探针对 45例肝组织标本进行TTVDNA原位杂交检测 ,巢氏PCR法检测血清TTVDNA。结果 3 1例血清TTVDNA阳性患者的肝组织TTVDNA均为阳性 ( 10 0 % )。 14例血清TTVDNA阴性的患者肝组织中TTVDNA阳性者 7例 ( 5 0 % )。慢性肝病患者的肝组织中TTVDNA散在分布在汇管区周围的肝细胞核内 ,肝癌患者TTVDNA则集中分布在肝癌细胞核内及癌组织周围的肝细胞核内。结论 慢性肝病与肝癌患者肝组织中TTVDNA的感染状态存在一定差异。
- 邓传珍姜岭梅李银鹏朱惠明
- 关键词:慢性肝病肝组织TTV
- 三腔二囊管压迫联合套扎对食道静脉曲张出血的治疗价值被引量:7
- 2001年
- 目的 评价三腔二囊管压迫联合静脉套扎与急诊套扎治疗食道静脉曲张破裂出血的价值 ,寻求治疗食道静脉曲张出血的优化方案 .方法 三腔二囊管压迫后行内镜下静脉套扎与急诊内镜下静脉套扎治疗食道静脉曲张出血 6 4例 ,对这两种方法的疗效与并发症进行比较 .结果 三腔二囊管压迫联合静脉套扎组与急诊套扎组的并发症及远期治序效果无明显差异 ,但序贯治疗组 2周内出血复发率为 2 .6 % ,明显低于急诊套扎组 (19.2 % ) (p <0 .0 5 ) .结论三腔二囊管压迫联合静脉套扎能有效减少食道静脉曲张出血的近期复发出血率 .
- 李银鹏姜岭梅师瑞月
- 关键词:食道静脉曲张出血EVL
- 原位PCR在检测肝组织TTV中的应用
- 2001年
- 目的 探索用原位PCR检测肝组织中的输血传播病毒 (TTV)。方法 用原位PCR与原位杂交检测32例肝组织中的TTV ,并比较两种方法的检测结果。结果 32例标本中 ,经原位PCR检测 ,TTV阳性 2 3例 ,经原位杂交检测 ,TTV阳性 17例。原位PCR检测的阳性率 (71.9% )明显高于原位杂交 (5 3.1% ) ,P <0 .0 5。原位PCR在肝细胞核、内皮细胞核与肝细胞浆内检测到TTV ,而原位杂交只在肝细胞核与肝细胞浆内检测到TTV。结论 本实验结果表明原位PCR是一种新的检测TTV的有效方法。
- 李银鹏朱惠明姜岭梅黄勋
- 关键词:输血传播病毒肝组织原位聚合酶链反应原位杂交