王宁
- 作品数:23 被引量:95H指数:6
- 供职机构:南京农业大学无锡渔业学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高技术研究计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学经济管理轻工技术与工程更多>>
- 水稻根尖质膜蛋白质组学研究方法的建立被引量:8
- 2008年
- 以徐稻3号水稻苗期幼嫩根尖为材料,利用葡聚糖/聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90%的质膜组分,使用优化的双向电泳水化液溶解质膜蛋白,通过等电聚焦/十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳(IEF/SDS-PAGE)分离和基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MAI-DI—TOF/TOF)分析,鉴定了31个水稻质膜相关蛋白。结果表明IEF/SDSPAGE双向电泳适合分离亲水性相对较高的膜附着蛋白。进一步利用高盐和温和去污剂对纯化的质膜进行洗涤,以降低质膜组分的复杂程度,通过SDS-PAGE单向电泳分离和液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分析,鉴定了8个质膜蛋白。经洗涤后的质膜组分复杂度显著降低,SDS-PAGE中的蛋白条带只包含1~2种蛋白,且主要为疏水性较强的穿膜蛋白,说明多种生物化学分离方法及不同质谱分析的综合运用,是解决生物膜蛋白质组学难点的有效途径。
- 齐耀程王宁程彦伟徐朗莱张炜
- 关键词:水稻质膜蛋白质组学
- 青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析被引量:11
- 2013年
- 本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone,CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达。青虾CHH基因cDNA全长1 017 bp,包括241 bp的5′UTR,408 bp的开放阅读框(ORF),355 bp的3′UTR,开放阅读框编码135个氨基酸。成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基。青虾CHH成熟肽C端为GK,确定为ES型CHH基因。蛋白相似度比对显示,所分离的青虾CHH被归为CHH家族I型肽。系统进化树分析表明,青虾CHH多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系。荧光定量PCR检测显示,CHH基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由高到依次为眼柄、精巢、腹神经节、脑、肠、肝、心脏、卵巢。以卵巢为参照其表达量设为1时,眼柄与精巢CHH基因表达量分别为卵巢的500倍和250倍,由此推测CHH基因可能与雄性生殖过程相关。
- 金舒博王宁乔慧傅洪拓吴滟龚永生蒋速飞熊贻伟
- 关键词:青虾CDNA定量PCR
- 不同运输方式和时间对虾苗死亡率的影响
- 2022年
- 实际生产过程中克氏原螯虾(又称小龙虾,Procambarus clarkii)需经过长时间运输,运输苗种成活率直接影响到养殖户的经济效益。为比较各种运输方式的死亡率,重点关注虾蟹混养“兴化模式”中定量放养抱籽虾环节,通过模拟运输实验研究不同运输方式:覆盖青苔、氧气包和不同运输时间:1、2、3 h对苗种死亡率的影响。结果表明相比带水运输,抱籽虾覆盖青苔运输1、2、3 h后死亡率分别降低30.56%、27.11%、16.00%。小规格虾苗运输过程中,使用氧气包运输较覆盖青苔运输1、2、3 h后死亡率分别降低76.99%、70.77%、72.16%。中等规格虾苗运输过程中,覆盖青苔运输较蟹苗箱运输3、6 h后死亡率分别降低13.43%、9.08%。通过该实验,养殖户可以根据需求选择合理的运输方式。
- 王宁唐建清张凤翔郑尧许志强李佳佳孔繁彬刘祝萍廖河庭陈家长
- 关键词:克氏原螯虾死亡率
- 克隆青虾CHH基因的引物组及克隆青虾CHH基因的方法
- 本发明涉及基因克隆领域,特别涉及青虾甲壳类高血糖激素(Crustaceanhyperglycemichormone,CHH)基因和编码蛋白及其克隆方法。利用本发明提供的引物组从青虾眼柄组织中克隆到了一种CHH基因,为研究...
- 吴滟王宁傅洪拓乔慧
- 文献传递
- 青虾性腺抑制激素GIH基因全长cDNA的克隆及序列分析
- 本研究首次从青虾中分离得到了性腺抑制激素(gonad-inhibting hormone,GIH)两个亚型(GIH-A和GIH-B)的全长cDNA序列。GIH-A cDNA序列全长918bp,包括455bp的5’非翻译区...
- 王宁傅洪拓乔慧吴滟龚永生蒋速飞熊贻伟张文宜
- 关键词:青虾性腺抑制激素克隆
- 文献传递
- 长江不同江段青虾的遗传多样性被引量:26
- 2010年
- 利用20个微卫星分子标记对长江不同江段共6个青虾群体进行了遗传多样性分析,采样点包括重庆、万州、宜昌、武汉、九江和江阴。结果表明,6个青虾群体平均等位基因数(A)为5.25,平均有效等位基因数(Ne)为3.4622;20个位点平均多态信息含量(PIC)为0.5894;期望杂合度(He)由高到低依次为江阴群体(0.6308)、九江群体(0.6096)、宜昌群体(0.5945)、武汉群体(0.5934)、万州群体(0.5844)、重庆群体(0.5821),平均值为0.6296。分子方差分析(AMOVA)结果表明长江青虾6群体间遗传变异6.92%来自群体间,93.08%来自群体内部,两两群体间FST值在0.0253~0.0838(P<0.05)之间,表明群体间已明显出现分化,但分化程度中等,与湖泊青虾群体相比,长江各群体间遗传分化程度较弱,可能是由于流动的江水增加了群体间的交流。Hardy-Weinberg遗传平衡分析表明,6群体均出现杂合子缺失现象,可能是由于稀有等位基因缺失或无效等位基因造成;6群体间遗传距离为0.0620~0.1809,UPGMA聚类分析表明,江阴群体单独聚为一类,其余5个群体聚为另一类,其中九江和武汉群体最先聚到一起,其次万州、宜昌和重庆群体聚为一类。
- 傅洪拓乔慧李法君吴滟龚永生蒋速飞熊贻伟王宁
- 关键词:青虾微卫星标记简单重复序列长江
- 三省藕虾养殖模式水环境质量监测研究及成本核算
- 2023年
- 为有效解决目前渔业养殖水体存在的高污染、高排放问题,确保水产品的品质和产量,提出藕虾养殖模式。通过测定TP、TN、NH_(3)-N、Chl-a等主要水质指标,对湖北省、安徽省和江苏省藕虾养殖模式水环境质量和成本核算进行分析总结。结果表明,藕虾养殖模式随养殖时间的延长,养殖水体中的TP、TN、Chl-a、COD_(Mn)等水质理化指标均呈上升趋势。在整个养殖过程中,养殖水体的综合营养状态指数呈先上升后降低的趋势。兴化沙沟和扬州宝应3号藕虾共作养殖池的经济效益偏高,扬州宝应藕虾共作1号、2号和3号养殖池的环境效益较低。扬州宝应藕虾共作区3号养殖池经济效益高,且环境效益低于其他养殖池,从综合效益看,推荐小龙虾养殖密度为300 kg/hm^(2)、藕的种植密度为4500 kg/hm^(2)的藕虾养殖模式。
- 刘祝萍郑尧刘少贞廖河庭王宁孟顺龙陈家长安树伟顾玲玲
- 关键词:克氏原螯虾水质营养状态指数
- 进境种苗中朱顶红短体线虫的鉴定被引量:4
- 2014年
- 2013年,浙江和宁波口岸入境的日本鸡爪槭(Acer palmatum)和以色列孤挺花种球(Hippeastrum vittatum)中分离到一种短体线虫,通过形态学特征以及基于核糖体rRNA-ITS区及28S rRNA-D2/D3区序列的系统发育分析,证实其为朱顶红短体线虫(Pratylenchus hippeastri Inserra,Troccoli,Gozel,Bernard,Dunn&Duncan,2007)。该线虫的主要形态鉴别特征为:虫体细长;头前端平;唇环2个;口针基部球椭圆形;受精囊小,矩形,内无精子;尾圆锥形,末端钝尖,有时腹面有凹陷,或呈光滑的半球形。该线虫至今仅报道发生于美国,这是国际上首次在日本和以色列种苗中截获。
- 顾建锋王宁何洁陈吴健
- 关键词:鸡爪槭孤挺花系统发育
- 水稻根质膜蛋白质组双向电泳水化液的优化被引量:1
- 2007年
- 以水稻(Oryza sativa L.)苗期幼嫩根尖作为材料,利用葡聚糖-聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90%的质膜组分,使用4种不同的水化液溶解质膜蛋白,进行IEF/SDS-PAGE双向电泳和MALDI-TOF/TOF质谱分析.结果显示,4种水化液中,以7 mol/L Urea2、mol/L Thiourea、4%CHAPS、20 mmol/L DTE、1%ASB14的条件对膜蛋白的溶解效果和双向电泳分离效果最好;16个被鉴定蛋白中有9个为质膜相关蛋白,5个为未知蛋白,来自其它细胞器的蛋白仅有2个.研究表明,在常用水化液中添加磺基甘氨酸三甲内盐ASB14有利于植物细胞质膜蛋白质组的分析,并且该优化条件下的双向电泳适合分离水稻质膜中亲水性相对较高的膜附着蛋白.
- 王宁齐耀程徐朗莱张炜
- 关键词:水稻质膜双向电泳蛋白质组学去污剂
- 水产养殖系统
- 本实用新型公开一种水产养殖系统,包括扩培桶以及喷洒装置,该扩培桶包括桶体以及安装于桶体内的水位检测器、温度检测器、pH检测器以及搅拌件;其中,桶体的顶部开设有可盖合的注料口,pH检测器用于检测桶体内液体的pH值,水位检测...
- 郑尧张凤翔廖河庭王宁高建操徐钢春