胡巧云
- 作品数:4 被引量:34H指数:2
- 供职机构:华中农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪2型链球菌体内诱导抗原的筛选、鉴定和功能研究
- 猪链球菌是一种重要的人畜共患病,能引起猪的脑膜炎、败血症、关节炎和急性死亡,每年给养猪业造成重大的经济损失。根据链球菌的荚膜可分为35个血清型,32和34血清型后来被证明实际上是属于Streptococcus orisr...
- 胡巧云
- 关键词:猪2型链球菌致病
- 文献传递
- 牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立被引量:22
- 2007年
- 实验旨在建立牛重组IFN-γ(BovIFN-γ)的ELISA检测技术,为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞,从培养细胞中提取总RNA,经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA,进一步克隆至pET28a,转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出预期大小(18kD左右)组氨酸标记蛋白,经鉴定为BovIFN-γ;以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1,腹水效价在1:2^10×100~1:2^11×100之间。Western-blot分析显示,4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明,4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应,而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗免IgG,建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明,此方法检测敏感性达到2ng/mL,特异性良好,为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。
- 李川谭亚娣陈颖钰胡巧云马艳张桂荣钦博晁彦杰陈焕春郭爱珍
- 关键词:单克隆抗体ELISA克隆
- 一种适用于牛结核抗体检测的试剂盒及应用
- 本发明属于动物免疫学技术领域。公开了一种适用于牛结核检测试剂盒及其制备方法,所述的试剂盒,包含盒体、设在盒体内的V形底96孔反应板、牛结核分支杆菌野毒感染标准阳性血清、健康牛阴性血清、血清稀释液和1%致敏绵羊红细胞悬液。...
- 谭亚娣胡巧云晁彦杰钦博张桂容陈焕春张书环
- 文献传递
- 牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用被引量:11
- 2007年
- 为了研究牛结核病新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质,热稳定性好,用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期,检测70份临床奶牛血清,与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71.4%和88.6%的符合率。该方法还可鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。我们建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合,为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法,。
- 钦博万学济胡巧云喻正军晁彦杰郭爱珍陈焕春谭亚娣
- 关键词:牛型分枝杆菌牛结核病MPB70胶乳凝集间接血凝