张爱利
- 作品数:13 被引量:17H指数:3
- 供职机构:河北工业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河北省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程文化科学更多>>
- 一种过表达氨基酸透性酶提高酿酒酵母乙醇产量的方法
- 本发明为一种过表达氨基酸透性酶提高酿酒酵母乙醇产量的方法,将过表达酿酒酵母基因GAP1的质粒YCplac22‑GAP1转化入宿主菌酿酒酵母出发菌株W303‑1A,在缺色氨酸的CM固体培养基上培养2~3天后,筛选带有YCp...
- 张爱利李袁刘阳阳
- 一种构建对异丁醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法
- 本发明一种构建对异丁醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法,涉及用于酵母使用载体引入突变DNA重组技术,运用分子生物学和基因重组技术改造酿酒酵母细胞,将过表达酿酒酵母突变基因spt15‑30的质粒YCplac22‑spt15...
- 张爱利温智慧
- 文献传递
- 酿酒酵母菌中过量表达BAT2和缺失PDC6提高异丁醇产率被引量:3
- 2015年
- 利用酿酒酵母发酵生产生物质能源异丁醇越来越受到学术界和工业界的重视。本研究通过DNA重组技术,提出一种提高酿酒酵母合成异丁醇的产率的方法。通过对酿酒酵母异丁醇合成代谢途径分析,过量表达了编码分支氨基酸转氨酶的BAT2基因和缺失编码内源性丙酮酸脱羧酶的PDC6基因,同时构建过量表达编码乙酰乳酸合酶ILV2基因和编码二羟基戊酸脱水酶的ILV3基因的表达质粒。将所构建突变株HAZL-7pILV2pILV3(W303-1A PGK1p-BAT2pdc6::R YEplac195-ILV3p-PGK1p-ILV3 YEplac181-PGK1p-ILV2)进行厌氧发酵。厌氧发酵60h,发酵液中异丁醇的产率从0.035g/L到0.4g/L,提高了11.4倍,乙醇的产率减少,乙酸的产率升高,甘油的产率基本稳定。酿酒酵母菌中过表达BAT2基因和缺失PDC6基因,同时过量表达ILV2和ILV3的表达质粒载体的基因修饰,对异丁醇的代谢流有明显的影响,异丁醇的产率提高11.4倍。这些研究为异丁醇产量的进一步提高奠定了理论基础。
- 李杨张爱利高玉菡李敬知
- 关键词:酿酒酵母异丁醇
- 酿酒酵母SRP40基因对细胞耐受性影响的研究被引量:2
- 2022年
- 【目的】本论文研究酿酒酵母srp40^(39)突变基因对酵母细胞异丁醇耐受性的影响。【方法】首先,以酿酒酵母野生型W303-1A和突变株EMS39染色体DNA为模板克隆野生型SRP40基因和srp40^(39)突变基因;然后,将野生型SRP40基因和srp40^(39)突变基因分别连接到质粒YCplac22上,构建质粒YCplac22-SRP40和YCplac22-srp40^(39)。将质粒YCplac22-SRP40、YCplac22-srp40^(39)以及YCplac22空质粒分别转化入野生型酿酒酵母W303-1A中,分别得到W303-1A-SRP40工程菌、W303-1A-srp40^(39)工程菌和W303-1A-control工程菌。将3株工程菌分别置于含1.0%异丁醇、1.3%异丁醇、8.0%乙醇和0.5%异戊醇的CM培养基中进行发酵,测定细胞密度(OD_(600))和生长情况,并计算2–10 h的比生长速率(μ)。将3株工程菌于55°C热激4 min后做稀释实验(dilution),观察它们在平板上的生长情况。最后,对野生型SRP40基因、srp40^(39)突变基因的氨基酸序列进行生物信息学分析。【结果】在不含异丁醇(0%异丁醇)的培养基中,3株工程菌无明显差异。在含1.0%异丁醇和1.3%异丁醇的CM培养基中,发酵24 h工程菌W303-1A-srp40^(39)的细胞密度分别是工程菌W303-1A-SRP40的1.12倍和1.06倍,是工程菌W303-1A-control的1.10倍和1.10倍;工程菌W303-1A-srp40^(39)的比生长速率(μ)分别是工程菌W303-1A-SRP40的1.07倍和1.10倍,是对照菌W303-1A-control的1.10倍和1.10倍。在含8.0%乙醇和0.5%异戊醇的CM培养基中,发酵24h工程菌W303-1A-srp40^(39)的细胞密度分别是工程菌W303-1A-SRP40的1.12倍和1.01倍,是对照菌W303-1A-control的1.17倍和1.07倍;工程菌W303-1A-srp40^(39)的比生长速率(μ)分别是工程菌W303-1A-SRP40的1.37倍和1.07倍,是对照菌W303-1A-control的1.31倍和1.09倍。工程菌W303-1A-srp40^(39)在热激后生长仍优于其他2株菌。生物信息学分析发现,Srp40^(39)蛋白与硅藻的胸膜蛋白-1具有相似的结构。【结论】本研究发现酿酒酵母srp40^(39)突变基因能够提升细�
- 邵文举鲁尚昆张爱利
- 关键词:酿酒酵母异丁醇乙醇耐受性
- 一种酿酒酵母异丁醇高产菌株的构建方法
- 本发明酿酒酵母异丁醇高产菌株的构建方法,涉及用DNA重组技术制备微生物,是一种运用分子生物学和基因重组技术改造酿酒酵母细胞,构建异丁醇产量高的酿酒酵母菌株的方法,步骤是:第一步,过量表达酿酒酵母ILV2、ILV3、ILV...
- 张爱利李杨高玉菡
- 文献传递
- 过量表达酿酒酵母ZWF1基因对异丁醇产量的影响被引量:1
- 2017年
- 以W303-1A为出发菌株,过量表达支链氨基酸转氨酶BAT2基因得到工程菌HZAL-2。通过过量表达编码乙酰乳酸合酶的ILV2基因、编码二羟异戊酸脱水酶的ILV3基因,得到工程菌HZAL-2pILV2pILV3。在工程菌HZAL-2pILV2pILV3的基础上进一步过表达编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的ZWF1基因,得到工程菌HZAL-2pILV2pILV3 22-ZWF1,其异丁醇产量比对照菌株提高6.81倍。结果表明,通过表达ZWF1基因提高NADPH产量可以解决菌体内部还原力不平衡的问题,从而提高异丁醇产量。
- 李敬知冯瑞琪张爱利
- 关键词:酿酒酵母异丁醇
- 分子生物学知识体系建设与创新型人才培养被引量:7
- 2020年
- 分子生物学是从分子水平阐述生物的生命现象和规律的学科,是生命科学的前沿学科。分子生物学在生物工程专业本科生培养中占有重要地位,更是学习生命科学、现代生物技术以及工业、农业、医药卫生和环境科学等各个领域的基础课程。本文探讨了工科本科生分子生物学知识体系建设的内容,阐述了分子生物学课程建设与创新型人才培养的方法。
- 张爱利
- 关键词:创新型人才培养教学改革
- EMS诱变高异丁醇耐受性酿酒酵母的筛选被引量:6
- 2018年
- 利用诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W303-1A进行诱变,确定了诱变酿酒酵母最佳的EMS质量浓度为40μg/m L,筛选出1株遗传稳定、可耐3.0%(V/V)异丁醇的优势突变株EMS39。同时在菌株EMS39和W303-1A中过表达L-缬氨酸代谢途径中的关键基因ILV2、ILV5、ILV3和ARO10得到菌株EMS39 23510和W303-1A 23510,将对应的空载体转入菌株W303-1A中得到菌株W303-1A-EP作为对照菌,同时进行发酵性能检测。结果表明,菌株EMS39 23510异丁醇产量达到404.2 mg/L,比对照菌W303-1A-EP提高了529.6%,比菌株W303-1A 23510提高了3.9%,产率比对照菌W303-1A-EP提高了530.0%。其异丁醇及其他发酵产物的产量明显提高,有一定的研究和工业应用价值。
- 温智慧李敬知冯瑞琪苏意德张爱利
- 关键词:酿酒酵母甲基磺酸乙酯异丁醇耐受性
- 一种构建对乙醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法
- 本发明为一种构建对乙醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法,将过表达酿酒酵母基因SOL1的质粒YEplac181‑SOL1转化入宿主菌酿酒酵母出发菌株W303‑1A,在缺亮氨酸的CM固体培养基上培养2~3天后,筛选带有YEp...
- 张爱利刘阳阳
- 一种构建对异丁醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法
- 本发明一种构建对异丁醇具有高耐受性的酿酒酵母菌株的方法,涉及用于酵母使用载体引入突变DNA重组技术,运用分子生物学和基因重组技术改造酿酒酵母细胞,将过表达酿酒酵母突变基因spt15‑30的质粒YCplac22‑spt15...
- 张爱利温智慧
- 文献传递