徐慧聪
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
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- miRNA-326作用于其靶基因BCL-XL的研究
- 2020年
- 目的研究miRNA-326是否作用于其靶基因BCL-XL,探讨miRNA调控血小板凋亡的分子机制。方法利用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统,分别构建含有BCL-XL 3′端非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)片段的野生型和变异型的双荧光素酶载体,设置对照组,转染细胞检测相对荧光强度。结果分别构建了PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT(野生型)和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-MT(变异型)的双荧光素酶报告基因质粒载体;miRNA-326序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT质粒共转染测定的相对荧光强度显著低于对照组(miRNA-326阴性对照序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-WT质粒共转染组)(P=0.034);同时也显著低于miRNA-326序列和PsiCHECK-BCL-XL-3′UTR-MT质粒共转染的变异组(P=0.022)。结论miRNA-326作用于BCL-XL基因的3′UTR;这为研究miRNA调控血小板凋亡的分子机制奠定了基础。
- 谯铭铭盖厦叶辉姬艳博于媛陈元锋徐慧聪庄云龙
- 关键词：BCL-XL基因
- 血管性血友病因子抗原检测在血友病A与血管性血友病鉴别诊断中的应用被引量：4
- 2017年
- 目的评估血管性血友病因子(vWF)抗原检测在血友病(vWD)患者和轻中度血友病A患者鉴别诊断中的价值。方法从2010年8月到2015年12月在我中心检测凝血因子Ⅷ活性低于45%,而且根据临床表现及家族史怀疑为血管性血友病的患者77例,用酶联免疫法和免疫比浊法检测vWF抗原。结果检测的77例患者中29例患者VWF抗原水平低于35%,为vWD患者;48例未检出vWF抗原水平降低。其中女性患者16例中11例vWF抗原水平降低(68.75%),诊断为血管性血友病患者的几率要高于男性患者(29.51%),差异有统计学意义(P<0.01)结论凝血因子Ⅷ活性低的患者,特别是女性患者,需要检测vWF抗原水平,筛查是否为vWD。vWF抗原水平检测能很好的满足临床需求,为vWD诊断提供依据,会得到越来越广泛的应用。
- 房云海康佩佩张雪芹程彦安立滕彬王杰徐慧聪张心声
- 关键词：血管性血友病因子血管性血友病血友病A
- miRNA-326调控BCL-XL基因的表达
- 目的研究miRNA-326是否作用于其靶基因BCL-XL,探讨miRNA调控血小板凋亡的分子机制。方法利用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因实验系统,分别构建含有BCL-XL 3’端非翻译区(UTR)片段...
- 谯铭铭盖厦叶辉姬艳博于媛陈元锋徐慧聪庄云龙
- 病毒灭活条件下血小板mircroRNA组的表达
- 目的探索病毒灭活条件下血小板内微小RNA(microRNA)组的表达,为研究病毒灭活对血小板贮存损伤(PSL)的机制研究提供依据。方法血小板来自山东省血液中心自愿捐献血小板的献血员16人,在超净工作台中将所有样本转移到血...
- 徐慧聪庄云龙叶辉蒋保云申华刘艳安立谯铭铭
- 文献传递
- miRNA-570调控ATP合成酶G亚基的表达促进血小板凋亡
- 2020年
- 目的探讨微小RNA(miRNA)-570对腺苷三磷酸(ATP)合成酶G亚基因(ATP5L)基因表达的影响及miRNA调控血小板凋亡的分子机制。方法依据NCBI数据库中NM006476.5人的序列分别合成ATP5L 3′端非翻译区(UTR)的野生型(WT)序列和突变型(MT)序列(488 bp),通过在序列两端增加限制酶酶切位点,与双荧光素酶报告基因载体(psiCHECKTM-2)质粒连接,分别构建含有ATP5L 3′UTR的WT和MT的双荧光素酶报告基因载体。依据miRNA数据库中MI0003577人的序列分别合成miRNA-570序列和其阴性序列,分别与构建的双荧光素酶报告基因载体共转染293T细胞,依据转染物的不同将实验分为6组,实验组1:miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT质粒;实验组2:miRNA-570序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-MT质粒;阴性对照组1:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT质粒;阴性对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-ATP5L-3′UTR-MT质粒;空白对照组1:miRNA-570序列和psiCHECK-2质粒;空白对照组2:miRNA-570阴性对照序列和psiCHECK-2质粒。转染48 h后利用生物发光检测仪检测转染细胞的相对荧光强度。收集单采血小板60 mL,利用脂质体方法转染血小板,依据转染物的不同,将实验分为4组,实验组A:miRNA-570序列;阴性对照组B:miRNA-570阴性对照序列;空白对照组C:脂质体2000;空白对照组D:空白(无转染物);分别转染转染血小板,24 h后收集血小板,流式细胞仪检测血小板膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻表达,Western blot检测血小板半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达,ELISA方法检测血小板Caspase-3活性。结果分别成功构建了psiCHECK-ATP5L-3′UTR-WT和-MT的双荧光素酶报告基因质粒载体。转染293T细胞测定的相对荧光强度:实验组1、实验组2、阴性对照组1、阴性对照组2、空白对照组1、空白对照组2分别为0.673±0.080、0.967±0.059、0.97±0.076、0.96±0.075、0.97±0.067、1.0±0.1(P<0.05)。实验组A、阴性对照序列组B、空白对�
- 盖厦李晓华徐慧聪叶辉谯铭铭姬艳博于媛陈元锋庄云龙
- 关键词：磷脂酰丝氨酸半胱氨酸蛋白酶-3
- 血小板贮存条件下的mircroRNA组的表达
- 目的探索在22℃保存条件下血小板内微小RNA(microRNA)组的表达,为研究血小板贮存损伤(PSL)的机制提供依据。方法血小板来自山东省血液中心自愿捐献血小板的献血员16人,在超净工作台中将所有样本转移到血小板专用保...
- 庄云龙徐慧聪
- 文献传递
- 血浆贮存过程中的凝血因子含量分析
- 目的探讨新鲜冰冻血浆在贮存过程中凝血因子含量的变化,为临床输血提供参考数据。方法取待检测血浆12人份,其中A、B、AB和O型新鲜血浆100 mL各3份,每份各分装3等分,速冻成冰冻血浆,分别在0 d、30 d和90 d取...
- 庄云龙谯铭铭房云海徐慧聪
