王丽薇
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 黄地老虎颗粒体病毒enhancin-like基因的表达与增效功能研究被引量:1
- 2012年
- 增效蛋白(ENHANCIN)是一种主要在昆虫杆状病毒中存在的杀虫增效因子,黄地老虎颗粒体病毒(Agrotis segetum granulovirus,AgseGV)基因组中有一个ORF的编码产物为杆状病毒ENHANCIN同源物,命名为en-hancin-like。生物信息学分析结果表明,AgseGV的enhancin-like基因编码产物含有ENHANCIN的保守域,无信号肽序列,不存在a-螺旋跨膜区,在其C-末端拥有类似哺乳动物的脯氨酸富集区。为了确定AgseGV的EN-HANCIN-like蛋白是否具有增效功能,构建了AgseGV的enhancin-like全基因和5′端片段(1 017bp)的原核表达载体。利用层析技术纯化截短片段的原核表达产物,以其为抗原制备了抗体。利用自制抗体和His-tag抗体,Western blot检测了enhancin-like全基因的表达产物。结果表明,在融合蛋白预期大小处显示出阳性条带,证明目的基因得到了良好的表达。以棉铃虫为供试虫进行生物测定,证明在棉铃虫核多角体病毒(HaNPV)浓度为1.17×102 PIBS/mL时,AgseGV enhancin-like的全基因原核表达产物能使其感染3龄初幼虫的死亡率提高16.25%,增效作用显著。但是,5'端截短片段的原核表达产物对HaNPV没有增效作用。
- 张小霞梁振普陈晓慧宋小凤王丽薇邵新峰
- 关键词:增效蛋白WESTERNBLOT棉铃虫核多角体病毒
- 棉铃虫肠粘蛋白的克隆与表达研究
- 围食膜(peritrophic membrane,PM)是广泛分布于昆虫中肠内壁的一层选择透过性膜,在昆虫中肠的消化过程及保护昆虫免受微生物和寄生虫侵害等方面发挥着重要作用。围食膜是昆虫中肠天然防御体系,主要由几丁质和蛋...
- 王丽薇
- 关键词:棉铃虫围食膜原核表达杆状病毒表达系统生物防治
- 文献传递
- 棉铃虫不同发育阶段围食膜蛋白的变化分析
- 2012年
- 以5龄棉铃虫幼虫围食膜蛋白为抗原制备抗体,采用Western blot方法检测了围食膜蛋白在不同发育阶段的存在及变化.结果表明,棉铃虫围食膜蛋白在胚胎期从产卵后1 h已经开始表达;在幼虫蜕皮过程中亦有表达,但是蛋白表达的种类和表达量具有明显差异;在蛹及成虫中只少量表达.利用RT-PCR技术,检测了肠粘蛋白HaIIM86在棉铃虫不同发育阶段和5龄幼虫不同组织中的表达情况.结果显示,HaIIM86的分泌表达贯穿于棉铃虫的胚胎期、初孵幼虫期、蛹及成虫期的整个生活周期,并且HaIIM86的表达具有中肠组织特异性.
- 张小霞王丽薇梁振普乔冠华
- 关键词:棉铃虫发育WESTERNBLOT