余雪梅
- 作品数:15 被引量:70H指数:5
- 供职机构:重庆医科大学附属大学城医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 特异性靶向巨噬细胞表达PR39的重组腺病毒抗胞内菌感染能力检测被引量:1
- 2010年
- 目的检测巨噬细胞靶向表达PR39的重组腺病毒Ad-SP/PR39在抗胞内菌方面的作用。方法重组腺病毒Ad-SP/PR39经CsCl密度梯度离心纯化,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白GPF的表达并检测重组腺病毒的滴度。Ad-SP/PR39感染小鼠巨噬细胞RAW264.7、人结肠癌细胞株Lovo、人肝癌细胞株HepG2、人乳腺癌细胞株ZR-75-30和非洲绿猴肾细胞株COS-7后,经RT-PCR和免疫细胞化学检测PR39的靶向表达特异性。将含Ad-SP/PR39的RAW264.7细胞裂解液作用于减毒结核分枝杆菌(BCG),检测其体外杀灭结核杆菌BCG的能力。另取RAW264.7细胞,吞噬BCG后,加入Ad-SP/PR39感染该细胞并检测细胞内活菌量,以观察其细胞内杀菌作用。结果经纯化后的重组腺病毒滴度可达5×1011efu/ml,能够有效感染小鼠巨噬细胞RAW264.7等多种细胞株。RT-PCR及免疫细胞化学技术检测各株细胞转录水平表达情况显示小鼠巨噬细胞RAW264.7能高效表达抗菌肽PR39,而其他细胞株几乎没有表达。与感染对照腺病毒Ad-C的RAW264.7细胞相比,转染Ad-SP/PR39的细胞显示出了更强的抗菌活性[BCG活菌数分别为(8.5±1.4)×106、(6.9±1.8)×106cfu/ml,P<0.05)],且能有效吞噬并杀灭胞内菌。结论本课题组构建的重组腺病毒能够靶向巨噬细胞表达抗菌肽PR39基因,发挥抗胞内菌作用,为抗菌肽在胞内菌感染治疗中的应用开辟了新思路。
- 余雪梅文阳安李朴孔飞飞陈光辉邱欣欣涂植光
- 关键词:腺病毒科巨噬细胞
- 某院女性阴道分泌物常规检查的临床分析被引量:6
- 2015年
- 目的 通过对首诊女性阴道分泌物检查结果进行临床分析,了解某院女性阴道微生态状况。方法 回顾2012年1~12月2 533例阴道分泌物常规检查结果,分析不同年龄及季节阴道分泌物病原微生物感染情况以及细菌性阴道病(BV)快速检测法的诊断价值。结果 低清洁度标本(Ⅲ+Ⅳ)检出率较高,特异性病原中真菌检出率较高,病原菌中革兰阴/阳性短杆菌检出率最高。低清洁度标本检出率在小于或等于20岁年龄组及冬季最高(81.3%,73.0%),真菌检出率在21~30岁年龄组及夏季最高(23.9%,23.0%),革兰阴/阳性短杆菌检出率在31~40岁年龄组及冬季最高(25.1%,37.3%)。BV快速诊断(BV BLUETM)检测法与金标准符合率为87.5%,其灵敏度为80.0%、特异度为90.0%。结论 该院女性阴道炎在年轻人群及冬季发病率较高,真菌及革兰阴/阳性短杆菌是主要的致病原。BV BLUETM检测法可辅助临床快速诊断BV,但要甄别假阴性/假阳性结果。
- 刘定华白敏薛建江刘欢余雪梅李文明
- 关键词:阴道炎病原微生物阴道分泌物
- SHH信号通路对肝癌细胞Hep3B中血管内皮生长因子表达的影响被引量:1
- 2017年
- 目的研究sonic hedgehog(SHH)信号通路对肝癌Hep3B细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控。方法对Hep3B肝癌细胞设计VEGF基因的特异性引物,将扩增的基因片段克隆到T载体PMD19-T上,构建标准品质粒并建立标准曲线,建立实时荧光定量PCR(RT-PCR)的检测方法。后将Hep3B肝癌细胞分为对照组和研究组处理,对照组为空白对照,研究组采用特异性抑制剂cyclopamine阻断肝癌细胞中的SHH通路,均采用实时荧光定量PCR方法及免疫印迹试验两种方法测定VEGF的表达量。结果 RT-PCR显示,SHH通路特异性抑制剂cyclopamine可明显下调肝癌Hep3B细胞中VEGF mRNA表达(研究组与对照组分别为10.728±0.186、18.506±0.395,P<0.05),同时免疫印迹试验检测结果提示VEGF蛋白表达也明显降低(研究组与对照组分别为0.84±0.09、0.33±0.07,P<0.05)。结论 cyclosporine可抑制肝癌Hep3B中VEGF的表达,VEGF可能为SHH通路调控的下游基因之一。
- 余雪梅吴啸天李文明刘定华蔡伟陈梅李莉薛建江
- 关键词:血管内皮生长因子HEDGEHOG信号通路CYCLOPAMINE
- 992株临床分离病原菌分布及耐药性分析被引量:5
- 2016年
- 目的了解该院近3年临床分离病原菌的分布及耐药情况。方法回顾性分析该院2011年11月至2014年12月临床分离的992株病原菌及药敏结果。结果该院992株病原菌中革兰阴性杆菌487株(49.1%),大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为47.5%、16.7%,两者对亚胺培南和美洛培南的敏感率分别为100%、98.5%;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物高度敏感;嗜麦芽窄食假单胞菌对多种抗菌药物均有不同程度的耐药,但对复方黄胺甲噁唑100%敏感。革兰阳性球菌245株(24.7%),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为45.5%、91.6%,未检出耐万古霉素葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌。真菌260株(26.2%),白假丝酵母菌对抗真菌药高度敏感,热带假丝酵母菌的耐药率较高。结论定期回顾分析临床分离病原菌的分布及其耐药性,有利于及时掌握其耐药性的变迁,从而指导临床合理应用抗菌药物。
- 蔡伟李代昆余雪梅刘定华李文明封雪何祺薛建江
- 关键词:革兰阴性菌革兰阳性菌微生物敏感性试验耐药率
- 重庆地区汉族妊娠晚期女性血浆D-二聚体参考区间的建立被引量:4
- 2016年
- 目的建立重庆地区汉族妊娠晚期女性血浆D-二聚体参考区间。方法连续纳入2012年1月至2013年4月在重庆医科大学附属大学城医院行产前检查的健康单胎孕妇430名(孕周大于或等于35周),对照组为同期来院体检的健康非孕女性90名,均按30岁分段。采集枸橼酸钠抗凝静脉血2.7mL,分离血浆检测D-二聚体水平。结果观察组及对照组内不同年龄段女性血浆D-二聚体水平差异均无统计学意义(P〉0.05)。观察组血浆D-二聚体水平明显高于对照组(P〈0.05),该地区汉族妊娠晚期女性血浆D-二聚体参考区间为0-≤2.031mg/L。结论重庆地区汉族妊娠晚期女性血浆D-二聚体水平参考区间为0-≤2.031mg/L。
- 刘定华周子滟刘欢封雪薛建江余雪梅
- 关键词:参考值年龄因素D-二聚体妊娠晚期静脉血栓栓塞
- 感染性腹泻大便中无活性大肠埃希菌的检测结果分析被引量:2
- 2016年
- 目的分析粪便标本分离的无活性大肠埃希菌的鉴定及耐药性。方法对该院2013年1月至2015年6月临床送检的粪便标本进行细菌培养、鉴定和药敏试验。结果共检出61株无活性大肠埃希菌,18株能与志贺菌诊断血清发生凝集反应。阿莫西林和替卡西林耐药率为100%,哌拉西林、头孢噻吩和复方磺胺甲噁唑耐药率为78%,头孢西丁和阿米卡星耐药率为33%,哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率为0%。结论无活性大肠埃希菌能引起腹泻,容易被误诊为志贺菌;耐药性与普通大肠埃希菌无显著不同。
- 李代昆李莉蔡伟余雪梅封雪薛建江张德纯
- 关键词:感染性腹泻耐药特性
- 肿瘤细胞中SHH通路与VEGF表达相关性的研究
- 研究背景与目的
血管内皮增长因子/(vascular endothelial growth factor VEGF/)在肿瘤血管生成中的作用早已明确,并且是肿瘤血管生成因子/(tumor-angiogenes...
- 余雪梅
- 关键词:SHH信号通路VEGFFQ-PCRCYCLOPAMINE肿瘤生物治疗
- 文献传递
- 血清miR-374a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义被引量:2
- 2017年
- 目的探讨microRNA-374a(miR-374a)在非小细胞肺癌患者血清中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(SYBgreen法)检测65例非小细胞肺癌(NSCLC)患者和70例健康人(健康对照组)血清中miR-374a的表达水平。结果 miR-374a在NSCLC患者血清中表达水平显著高于健康对照组(3.84±1.21 vs.1.09±0.16,P<0.05),并且其表达与临床TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。血清miR-374a在受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.875~0.975)。当血清miR-374a临界值取1.615时,对NSCLC诊断的灵敏度为87.69%,特异度为97.14%。结论血清miR-374a有望成为一种新的生物标志物用于NSCLC的辅助诊断。
- 余雪梅吴啸天蔡伟李代昆赵钰玫陈梅薛建江
- 关键词:非小细胞肺癌荧光定量PCR
- 巨噬细胞特异性启动子/抗菌肽PR39基因腺病毒载体的构建及其表达被引量:2
- 2010年
- 旨在构建由巨噬细胞特异性启动子调控的抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体,检测目的基因在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达。PCR扩增巨噬细胞启动子/抗菌肽PR39成熟肽基因序列,插入腺病毒穿梭载体pAdTrack中,重组穿梭质粒(pAdTrack-SP/PR39)与腺病毒骨架(pAdEasy-1)共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒载体(pAd-SP/PR39)。pAd-SP/PR39经PacI线性化后转染293细胞,包装出重组腺病毒(Ad-SP/PR39)。Ad-SP/PR39感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,经RT-PCR和免疫细胞化学检测PR39的靶向表达特异性。成功构建了由巨噬细胞特异性启动子调控的抗菌肽PR39基因腺病毒表达载体。包装出的重组腺病毒仍然能感染小鼠巨噬细胞且高效表达抗菌肽PR39。构建的重组腺病毒能够在巨噬细胞中表达抗菌肽PR39基因,为靶向表达抗菌肽在胞内菌感染治疗中的应用奠定了基础。
- 余雪梅文阳安李朴孔飞飞陈光辉邱欣欣涂植光
- 关键词:抗菌肽腺病毒载体
- 黏液型铜绿假单胞菌临床分布与耐药性分析被引量:16
- 2017年
- 目的为临床合理使用抗菌药物治疗黏液型铜绿假单胞菌感染提供必要的病原学依据。方法收集医院2012年1月-2016年12月临床分离的86株黏液型铜绿假单胞菌感染病例,通过查阅病历获得患者一般资料、疾病情况、抗菌药物使用等信息,回顾性分析黏液型铜绿假单胞菌的临床分布、耐药性及疗效。结果临床送检标本共分离出黏液型铜绿假单胞菌86株,男性占72.09%,女性占27.01%;老年人占83.72%,中年人占12.79%,青年人占3.49%;肺部感染、泌尿系感染和创伤感染分别占93.02%、3.49%和3.49%;氨苄西林/舒巴坦和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率为98.84%、95.35%,替卡西林和替卡西林/克拉维酸的耐药率为22.09%、13.95%,哌拉西林和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为11.63%和10.47%;疗效显著的病例占83.72%。结论黏液型铜绿假单胞菌感染主要集中在老年男性的呼吸道感染,临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物。
- 李代昆李具琼余雪梅蔡伟薛建江
- 关键词:黏液型铜绿假单胞菌耐药性疗效