王思源 作品数:33 被引量:157 H指数:7 供职机构: 辽宁中医药大学附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 辽宁省高等学校优秀人才支持计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
穿心莲内酯磺化物体外抗流感病毒药效学研究 被引量:27 2013年 目的探讨穿心莲内酯磺化物(andrographolide sulfonated,ADS)体外对甲型流感病毒H1N1、H3N2以及乙型流感病毒(B)的抑制作用及最佳浓度。方法采用细胞病变观察法(CPE)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,观察药物对狗肾传代细胞(MDCK)的毒性作用,计算半数有毒浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);3种流感病毒分别接种于MDCK,观察不同浓度的药物对病毒致CPE的影响,测定药物对病毒的增殖抑制率,Probit回归法计算药物的半数有效浓度(EC50)和治疗指数(TI);红细胞血凝素滴定法测定ADS对流感病毒血凝素抑制作用。结果 CPE、MTT法测得ADS对MDCK的TC0≤0.781 3 mg.mL-1,TC50为2.280 8 mg.mL-1。ADS对H1N1、H3N2、B流感病毒的EC50分别为0.072 6、0.152 7、0.158 5 mg.mL-1,TI分别为31.42、14.93、14.39,此外ADS对不同流感病毒血凝素抑制作用,最低抑制浓度分别为0.048 9、0.097 8、0.097 8 mg.mL-1,且呈现出量效关系。结论 ADS体外抗H1N1、H3N2以及B型流感病毒感染作用,可能是通过药物抑制流感病毒表面的血凝素的活性而实现的。 王思源 平静 谢宁 陈晓 王雪峰关键词:流感病毒 药效学 MDCK细胞 正交实验法优选敷胸巴布贴剂的基质配方 被引量:4 2015年 目的:优选敷胸巴布贴剂的最优基质配方,制备性能优良的敷胸巴布贴剂。方法:用L18(37)正交实验法,以初粘力、剥离强度为量化指标,结合膏体的均匀性、柔软性、涂展性、膜残留量、反复粘贴等综合感官评分指标,优选出敷胸巴布贴剂基质配方。结果:敷胸巴布贴剂基质的最佳选项为A3B1C1E1F2G1,即羧甲基纤维素钠∶丙三醇∶卡波姆∶明胶∶聚丙烯酸钠∶尼泊金甲酯∶水=22∶18∶3.5∶3.5∶1.0∶0.5∶30。结论:按最佳工艺条件制备的敷胸巴布贴剂外观平整光滑,膏体柔软,保湿性及粘附性均良好,与敷胸药粉具有良好的相容性。 张秀英 王雪峰 谢彬 王思源关键词:正交实验 外敷敷胸膏对RSV肺炎大鼠肺组织TLR4及NF-κB p65的影响 被引量:3 2015年 目的观察敷胸膏对RSV肺炎大鼠组织NF-κB p65及TLR4的表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、君臣组(敷胸膏中君臣药组成)、敷胸膏组,每组10只,除正常组外,均采用鼻腔接种RSV Long株法诱导幼龄大鼠肺炎,正常组用不含病毒的生理盐水滴鼻。于感染当天,君臣组和敷胸膏组分别于大鼠背部外敷进行干预。观察各组大鼠的一般状态、肺组织形态学,各组大鼠在感染7天后处死,采用免疫组化染色法检测各组大鼠肺组织中NFB p65和TLR4的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠的肺组织中NF-κB p65、TLR4的表达显著增高(P<0.01),敷胸膏组和君臣组中NF-κB p65、TLR4的表达与模型组比较均明显降低(P<0.05),敷胸膏组作用较君臣组明显,具有显著的差异性(P<0.05)。结论敷胸膏干预RSV肺炎大鼠的作用机制可能与抑制大鼠肺组织中NF-κB p65、TLR4表达有关。 张海婴 王雪峰 谢斌 王思源 胡楠楠关键词:呼吸道合胞病毒性肺炎 NF-ΚB P65 穿心莲内酯磺化物体外抗腺病毒药效学研究 被引量:16 2012年 目的:研究穿心莲内酯磺化物(ADS)体外抗腺病毒-3(AdV3)活性及细胞毒性。方法:采用细胞病变法(CPE)、四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测ADS的最大无毒浓度(TC0)和半数中毒浓度(TC50),以AdV3100倍半数组织细胞感染量(100TCID50)攻击体外培养的人喉癌上皮细胞(Hep-2)造成AdV3感染模型,以利巴韦林注射液为对照药,以最小有效浓度(MEC)、半数有效浓度(EC50)及治疗指数(TI)为指标,测定了ADS在6.10,12.21,24.41,48.23,97.66,195.31,390.63,871.25 mg.L-1的体外抑制腺病毒活性。结果:ADS、利巴韦林注射液TC0分别为781.25,6.25 mg.L-1;MEC分别为97.66,0.390 6 mg.L-1;TI分别为8,16。结论:ADS97.66~781.25 mg.L-1可有效抑制细胞内AdV3体外增殖,并呈明显的量效关系。 平静 王思源 谢宁 陈晓 王雪峰关键词:药效学 体外试验 双表法对RSV诱导的肺炎小鼠TLR-4、IL-4动态调控研究 2014年 目的探讨双表法对RSV感染小鼠血清中IL-4以及肺组织中TLR-4动态表达的影响。方法将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、解表组(银翘散,YQS)、双表组(银翘散+玉屏风散,YPS)和利巴韦林组(RBV)。于感染前3 d双表组,连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μl 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染后2h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,解表组及双表组给与YPS(10 g·kg·d-1)治疗,连续给药3 d;于末次给药后1、3、5、7 d取材,测定不同时间点小鼠肺指数;采用免疫组织化学方法检测小鼠肺组织中TLR-4蛋白的动态表达;ELISA法测定血清中IL-4的含量。结果 YQS、YPS可明显降低小鼠感染后肺指数(P<0.05);治疗后第3天,与模型组相比,YQS、YPS组小鼠血清中IL-4的含量和肺组织中TLR-4蛋白的表达水平有所降低(P<0.05);第5天后较模型组显著降低(P<0.01)。与YQS相比,YPS治疗效果差异显著(P<0.05)。结论双表法对RSV诱导的病毒性肺炎疗效显著,其可能通过抑制TLR-4的蛋白表达,降低血清中IL-4水平,从而达到减轻RSV感染所致的肺损伤的治疗目的。 王思源 南春红 岳志军 平静 毕胜 王雪峰关键词:RSV IL-4 TLR-4 不同年龄小鼠感染流感病毒后TLR4/NF-κB信号通路改变的对比研究 被引量:3 2015年 目的:观察流感病毒对幼龄鼠与成龄鼠肺组织NF-κB p65及TLR4的表达的影响。方法:昆明种小鼠随机分为幼龄模型组、成龄模型组、幼龄正常对照组、成龄正常对照组,每组40只,采用经鼻腔接种甲型流感病毒FM1株使小鼠产生肺炎。各组小鼠感染第1、3、5、7天,处死动物取材,每组各取10只,采用免疫组化染色法检测各组小鼠肺组织NF-k B p65和TLR4的表达。结果:幼龄鼠TLR4、NF-κB P65表达显著升高,成龄鼠轻度升高,二者差异显著。结论:幼龄鼠和成龄鼠IV感染后肺组织TLR4-NF-κB P65信号通路活化程度不同。 张海婴 董丹 王思源 王雪峰关键词:流感病毒 TOLL样受体 八珍益母丸中9个成分的含量测定及其主成分、聚类分析 被引量:5 2020年 目的:建立同时测定八珍益母丸中9种成分含量的方法,同时对其进行主成分分析及聚类分析。方法:采用HPLC法,色谱柱Waters Sunfire C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈(35∶65,A)-0.5%磷酸溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;检测波长:220 nm(白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、茯苓酸)、230 nm(芍药苷、甘草苷)、280 nm(盐酸益母草碱、白术内酯Ⅱ)、320 nm(阿魏酸、毛蕊花糖苷);柱温:28℃;进样量:10μl。采用SPSS 22统计软件对含量测定结果进行主成分分析与聚类分析。结果:盐酸益母草碱、阿魏酸、毛蕊花糖苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、芍药苷、茯苓酸和甘草苷检测质量浓度线性范围分别为6.084~48.672,5.498~43.980,2.972~23.772,2.432~19.456,2.079~16.632,2.174~17.388,2.836~22.684,4.761~38.084,2.504~20.036μg·ml-1(r>0.9990);平均加样回收率为98.4%~100.2%,RSD为0.32%~0.88%(n=6);15批样品提取出2个主成分,聚类分析为3类。结论:本法简便、准确、重复性好,可以用于八珍益母丸的鉴定与评价,可作为八珍益母丸质量控制的重要科学依据之一。 平静 南春红 王思源 岳志军关键词:八珍益母丸 高效液相色谱法 聚类分析 主成分分析 双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用 被引量:6 2020年 目的:研究扶正祛邪双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用。方法:将昆明种小鼠随机分为模型组、正常组、解表法代表方剂银翘散(YQS)组、固表法代表方剂玉屏风散(YPF)组、双表法代表方剂(YPS)组以及利巴韦林组。采用流感病毒滴鼻方法建立病毒感染模型,根据给药量制备相应浓度药物并灌胃给药,正常组和模型组给予同体积生理盐水。采用RT-PCR、免疫组化法检测给药后1、3、5、7天各时间点各组小鼠Toll样受体4(toll like receptors 4,TLR4)和核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白及其mRNA动态表达情况。结果:YQS、YPF及YPS在不同时点均能不同程度阻断流感小鼠肺组织中TLR4、NF-κB蛋白及其mRNA的高表达,并且YPS组表达最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:双表法对流感病毒感染小鼠的防治作用与抑制流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路过度活化有关。 平静 王思源 董丹 岳志军 南春红 王雪峰关键词:流感病毒 核转录因子ΚB 银翘散 玉屏风散 小鼠 竞争性ELISA、HPLC测定清燥救肺汤中甘草酸的含量 2015年 目的建立清燥救肺汤中甘草酸(GA)快速灵敏的免疫分析检测方法。方法以制备出的甘草酸特异性单克隆抗体为基础,选择单抗最佳工作浓度,建立GA间接竞争酶联免疫分析方法(ELISA),并应用此方法检测清燥救肺汤中的GA含量。同时结合高效液相色谱法(HPLC)进行比较确证。结果 ELISA测定清燥救肺汤中成分GA在0.312 5~10μg/m L(r=0.996 9)范围内线性关系良好,平均回收率不低于92.5%;3批样品中GA含量均值为10.125 mg/g,与HPLC测定结果相近,RSD〈1%。结论 ELISA对中药成分测定准确可靠,重复性好,是HPLC测定有益的技术补充。 吴振起 王思源 平静 于艳 南春红关键词:清燥救肺汤 甘草酸 ELISA HPLC 综合评分法优化甘露消毒丹的提取工艺 被引量:1 2018年 目的:应用多指标综合评分法,优选甘露消毒丹的提取工艺。方法:采取正交实验设计,以黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量以及得膏率为评定指标,通过HPLC波长切换法进行检测,考察乙醇浓度、提取时间、提取次数对方中黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量的影响,经综合评分法进行工艺优化。结果:甘露消毒丹最佳提取工艺为70%乙醇,提取3次,每次提取1 h。结论:该提取工艺合理,有效成分提取效率高。 刘光华 于艳 王思源 刘娟 吴振起关键词:甘露消毒丹 黄芩苷 绿原酸 连翘苷