罗海兰
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- TAT-MafA融合蛋白诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素被引量：4
- 2008年
- 借助蛋白质转导技术,利用胰岛β细胞转录因子MafA诱导小肠细胞系IEC-6表达胰岛素,为糖尿病的治疗提供新的方法。将TAT基因与MafA基因一起插入p32a(+)载体中,构建TAT-MafA融合蛋白原核表达载体,转化BL21获得表达菌株,经IPTG诱导和Ni柱亲和层析纯化TAT-MafA融合蛋白,用1μM浓度的该融合蛋白孵育IEC-6细胞12h和24h后,分别进行进胞检测和胰岛素表达检测。实验结果表明,细胞免疫荧光和Western-blot方法检测到经TAT-MafA融合蛋白作用12h后的IEC-6细胞中有该蛋白,并经细胞免疫荧光和RT-PCR的方法检测出TAT-MafA作用24h后的IEC-6细胞中有胰岛素的表达。因此,TAT-MafA融合蛋白可以高效进入小肠细胞系IEC-6细胞,并且进胞后仍保持MafA原有的生物学活性,能启动胰岛素基因的表达,诱导IEC-6成为胰岛素表达细胞。
- 罗海兰毋慧玲路君卢大儒沈坤堂金坚
- 关键词：蛋白质转导TATMAFA小肠上皮细胞胰岛素
