秘晓林
- 作品数：13 被引量：15H指数：2
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划辽宁省科技厅自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丙型肝炎病毒的分子生物学被引量：1
- 1996年
- 本文根据国内外最新资料，对丙型肝炎病毒基因组结构、各区功能，病毒粒子的形态、病毒分型和变异以及实验室诊断和急待解决的问题作了较为详细的介绍。
- 秘晓林
- 关键词：丙型肝炎病毒分子生物学
- PES1蛋白与雄激素受体的相互作用及定位
- 2014年
- 目的：研究PES1蛋白与雄激素受体（An）之间的相互作用。方法：利用免疫共沉淀实验检测PES1蛋白与AR之间的相互作用，并进行相互作用定位；利用Western印迹研究PESl对乳腺癌细胞内AR表达水平的影响。结果：免疫共沉淀实验显示PES1蛋白与AR存在相互作用；PES1蛋白的1—110、111-220、221-320和311-588氨基酸残基（aa）区域均能与AR结合，415～588aa不能结合AR；AR的651-918aa区域与PESl结合。PESl不能调节乳腺癌细胞AR的表达水平。结论：PES1多个区域均能与AR相互作用，并且主要结合在AR的转录激活结构域2，为进一步探讨PES1对AR功能的调节奠定了基础。
- 关鑫王洪远任伟杜佩云秘晓林程龙叶棋浓
- 关键词：雄激素受体相互作用乳腺癌
- 大肠杆菌原核增强子样序列的克隆及其结构与功能的研究被引量：3
- 2000年
- 利用氯霉素乙酰转移酶(cat)以及β半乳糖苷酶(lacZ)基因作为报告基因,从大肠杆菌MC1061株染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列———MC2,MC8,MC9,这3个片段均具有正反向增强活性,对β半乳糖苷酶基因的增强活性(正向)在2～55倍之间。采用体内转录,RNADotblot杂交的方法对MC8的功能进行了研究,结果表明,MC8片段对于基因表达的调控发生在转录水平上。用核酸外切酶III末端缺失的方法对MC8的功能区进行了定位。结果显示,MC8的功能区位于距其正向克隆5′端450～950bp长约500bp的区段内。在450～600bp以及840～950bp区段内至少分别含有一个功能位点。序列分析的结果表明,MC8功能区有3个AT丰富区,其中2个分别位于450～600bp以及840～950bp区段内。
- 朱民吴淑华秘晓林薛水星韩峰
- 关键词：大肠杆菌原核增强子样序列基因调控
- 原核增强子样序列及其应用
- 本发明涉及具有原核DNA转录增强子活性的DNA片段，其筛选和克隆方法及其在制备重组表达载体中的应用。本发明的新的增强子样序列明显的改善了外源基因的转录速率，进而明显地提高了外源目的基因表达产物的产率。
- 吴淑华侯云德何建新秘晓林韩峰曹茹王艳
- 文献传递
- 大肠杆菌C600染色体DNA中原核增强子样序列的克隆和鉴定
- 2001年
- 采用大肠杆菌trp启动子,氯霉素乙酰转移酶(CAT)作为标记基因,构建了两个应用氯霉素压力筛选增强子序列的检测载体pKT和pKTP。用pKT,pKTP及pKN2从大肠杆菌C600染色体基因组中克隆到3个原核增强子样序列3A,8A和V6S,这3个片段均具有正、反向增强活性,对β-半乳糖苷酶表达的正向增强活性达到7～8倍,反向增强活性2～3倍。RNA斑点杂交实验证明,3A,8A和V6S片段对于基因表达调控的增强作用均发生在转录水平上。
- 何建新廖小慧秘晓林韩峰王艳吴淑华
- 关键词：大肠杆菌染色体原核增强子样序列基因组克隆
- 痘苗病毒VV1原核增强子样序列的克隆及其功能和应用研究
- 2015年
- 目的 从痘苗病毒基因组中克隆原核增强子样序列VV1,并对其结构、功能和应用进行研究.方法 采用氯霉素乙酰转移酶基因（CAT）作为报告基因,从痘苗病毒基因组中筛选具有原核增强子样活性的序列,采用末端定向缺失试验对原核增强子样序列进行结构与功能研究,用携带增强子样序列表达载体表达干扰素基因.结果 从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选到原核增强子样序列VV1,正反向分别可使lacZ基因活性提高10.9倍和3.8倍,末端定向缺失试验证实,5＆#39;末端20 bp的核苷酸序列和3＆#39;末端20 bp的核苷酸序列对于VV1的活性具有重要作用,因为缺失任意一个都会导致增强活性的大幅度下降.而5＆#39;末端30-50 bp的核苷酸序列对于保持VV1片段的基本活性非常重要,缺失它时VV1的活性完全消失.用携带VV1的表达载体表达的IFN-α2b型干扰素比原表达载体活性提高2.6倍.结论 从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选到原核增强子样序列VV1,末端定向缺失试验证实VV1功能区,携带痘苗病毒增强子样序列VV1的表达载体可提高干扰素基因的表达水平.
- 韩峰曹茹王艳秘晓林
- 关键词：痘苗病毒
- 原核增强子样序列3A的克隆及其结构与功能的研究被引量：2
- 2001年
- 从大肠杆菌 C60 0株染色体基因组中筛选到一个原核增强子样序列 3A,其正、反向增强活性分别能提高 β-半乳糖苷酶活性 7.1 1和 2 .93倍 .采用体内转录 ,RNA斑点印迹杂交的方法 ,证明3A序列对于基因表达的调控发生在转录水平上 . 3A功能区的研究表明 ,3A增强活性主要位于距其正向克隆 5′端 (增强活性较强的方向称为正向 ,反之为反向 ) 30 0～ 540 bp,长约 2 4 0 bp的区段内 ,并证明
- 何建新廖小慧秘晓林韩峰王艳吴淑华
- 关键词：大肠杆菌原核增强子样序列
- 痘苗病毒增强子样序列的筛选及应用研究被引量：2
- 2007年
- 目的从痘苗病毒基因组中筛选原核增强子样序列,构建携带原核增强子样序列的表达载体,探讨其对干扰素基因表达的影响。方法采用氯霉素乙酰转移酶基因(cat)作为报告基因,从痘苗病毒基因组中筛选具有原核增强子样活性的序列,构建携带增强子样序列VV1的表达载体,表达干扰素基因和检测干扰素活性。结果从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选出18个在大肠埃希菌中具有增强活性的序列,从中筛选到两个原核增强子样序列VV1和VV16,VV1正反向分别可使lacZ基因活性提高10.9倍和3.8倍,VV16正反向分别可使lacZ基因活性提高9.0倍和4.1倍;证实它们的增强活性体现在转录水平;用痘苗病毒增强子样序列VV1构建的表达载体,其表达的IFN-α2b型干扰素比原表达载体活性高2.6倍。结论从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选到2个原核增强子样序列-携带有痘苗病毒增强子样序列的表达载体可提高干扰素基因的表达水平。
- 韩峰秘晓林曹茹王艳吴淑华
- 关键词：痘苗病毒原核增强子样序列
- 痘苗病毒增强子样序列的特性研究
- 1999年
- 利用带有氯霉素乙酰转移酶报道基因的检测载体，从痘苗病毒基因组 Ｄ Ｎ Ａ 中筛选到一个增强子样片段。序列分析表明，该片段长２８３ｂｐ ，是痘苗病毒 Ｄ Ｎ Ａ 依赖性 Ｒ Ｎ Ａ 聚合酶的一部分，具有两段２４ｂｐ 长的重复序列。采用带有β－ 半乳糖甘酶报道基因的载体检测发现，该片段正向可以使报道基因表达增强１０９ 倍，反向可以增强３８ 倍。 Ｒ Ｎ Ａ ｄｏｔ ｂｌｏｔ 实验证实，它对基因的增强活性表现在转录水平上。
- 秘晓林吴淑华朱民何建新杨翔侯云德
- 关键词：痘苗病毒染色体
- 新的原核增强子样序列及其应用
- 本发明涉及具有原核DNA转录增强子活性的DNA片段,其筛选和克隆方法及其在制备重组表达载体中的应用。本发明的新的增强子样序列明显的改善了外源基因的转录速率,进而明显地提高了外源目的基因表达产物的产率。
- 吴淑华何建新秘晓林韩峰曹茹王艳候云德
- 文献传递
