孙芳
- 作品数:10 被引量:11H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- γ-分泌酶抑制剂的新用途以及一种提高真核细胞对CVB病毒易感性的方法
- 本发明公开了一种提高真核细胞对CVB病毒易感性,加快CVB感染细胞进程和增加CVB病毒感染量的方法。该方法是用γ-分泌酶抑制剂(GSI)处理细胞,再用CVB病毒感染该细胞,使得CVB病毒感染细胞进程加快,且病毒感染量增加...
- 凌焱陈惠鹏孙芳李玉霞刘刚张小男汤洁毛艳贾天野
- 文献传递
- caspase重组酶原及其编码基因与应用
- 本发明公开了caspase重组酶原及其编码基因与应用。所述caspase重组酶原氨基酸序列由组成具蛋白酶活性的caspase的蛋白质亚基序列及连接所述蛋白质亚基序列的连接肽序列组成;所述连接肽序列中的至少一个序列为包含3...
- 凌焱陈惠鹏李玉霞李炳娟孙芳毛艳李伟东刘刚岳俊杰张景海吴逊白东梅梁龙周围李北平高原
- 文献传递
- 一种融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种融合蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的融合蛋白为将乙醇脱氢酶和甲酸脱氢酶通过连接肽串联得到的蛋白质。所述乙醇脱氢酶来源于短乳杆菌(Lactobacillus brevis),所述甲酸脱氢酶来源于博伊丁假...
- 李玉霞陈惠鹏曲芬凌焱李炳娟岳俊杰孙芳毛艳张景海吴逊白东梅李伟东刘刚梁龙周围李北平高原
- 基于CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体的初步研究被引量:3
- 2010年
- 目的利用CMV启动子构建CVB3感染性克隆载体。方法将质粒pcDNA3.1(+)的CMV启动子下游区域通过PCR技术替换成设计好的多克隆位点区,分别插入PCR合成的HdvRz核心序列和polyA尾片段,形成框架载体pc-H-A,通过瞬时转染HeLa细胞初步鉴定pc-H-A的可用性;用本室保存的CVB3(nancy株)感染HeLa细胞,取感染液上清提取病毒RNA,利用长链RT-PCR和长链PCR技术反复优化条件扩增病毒基因组全长片段,将此全长片段克隆至设计好的框架载体pc-H-A中,筛选阳性克隆,并对其进行测序鉴定。结果与结论构建了带有CMV启动子的框架载体pc-H-A并初步鉴定了该载体可用,利用此框架载体构建了与基因库中序列相似性为99%的CVB3全长cDNA克隆pc-CVB3-H-A。该研究为进一步鉴定所构建的CVB3全长克隆的感染性提供了基础,并为后续在病毒学研究和基因治疗方面的研究提供了手段。
- 贾宏瑾汤洁李玉霞孙芳凌焱张部昌梁龙陈惠鹏
- 关键词:柯萨奇病毒CVB3感染性克隆
- NICD基因的新应用以及一种提高真核细胞抗CVB感染能力的方法及药物
- 本发明公开了一种提高真核细胞抗CVB感染能力的方法及其应用。该方法是活化真核细胞中Notch信号通路,使CVB病毒感染真核细胞的感染进程及感染量得到减弱。所述活化Notch信号通路的方法为:采用转染的方法将Notch蛋白...
- 陈惠鹏凌焱孙芳李玉霞刘刚张小男汤洁毛艳贾天野
- 文献传递
- 人Notch受体胞内区基因N2ICD和N3ICD克隆及真核表达体系的构建被引量:2
- 2012年
- Notch信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。对该通路中各受体功能的深入研究能够为揭示其致癌作用奠定基础。本研究采用RT-PCR的方法从人宫颈癌细胞系HeLa细胞的cDNA中克隆人Notch2和Notch3受体胞内区基因(N2ICD和N3ICD基因),并构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体N2ICD/pEGFP和N3ICD/pEGFP,将序列正确的重组质粒转染HeLa细胞,显微镜下可见明显的绿色荧光,并定位在细胞核内。Western blotting检测目的蛋白成功融合表达,并能够提高其下游靶基因Hes1的转录活性。
- 孙芳李玉霞毛艳凌焱张小男李伟东刘刚梁龙陈珊陈惠鹏
- 关键词:NOTCH信号通路真核表达
- 病毒入胞机制研究方法及其研究进展被引量:6
- 2010年
- 多数病毒家族利用胞吞作为入侵宿主细胞的途径。胞吞既可以介导病毒内化,也可以将病毒运输到复制位点。已知的胞吞途径包括:网格蛋白依赖型内吞、小窝蛋白依赖型内吞、巨胞饮和网格蛋白、小窝蛋白非依赖型内吞。随着对胞吞过程中各组分结构和功能了解的日趋深入,研究胞吞过程以及病毒入侵过程的手段也变得更有效,特异性更高。目前,化学抑制剂的使用仍十分普遍,但该方法常非特异性地阻断细胞某些功能。一些分子抑制方法,如过表达显性负突变体和siRNA技术等,因其对单一途径的特异性阻断,使得应用分子型抑制剂逐渐取代了化学抑制剂。本文主要分析了研究病毒入侵途径时所使用的实验方法,并列举了一些实例。
- 孙芳李玉霞凌焱梁龙陈珊陈惠鹏
- 关键词:胞吞小窝蛋白
- 一种融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种融合蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的融合蛋白为将乙醇脱氢酶和甲酸脱氢酶通过连接肽串联得到的蛋白质。所述乙醇脱氢酶来源于短乳杆菌(Lactobacillus brevis),所述甲酸脱氢酶来源于博伊丁假...
- 李玉霞陈惠鹏曲芬凌焱李炳娟岳俊杰孙芳毛艳张景海吴逊白东梅李伟东刘刚梁龙周围李北平高原
- 文献传递
- CAR在乳鼠肠、肝、心、脑、肾、肺组织的表达
- 2011年
- 目的检测柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在乳鼠肠、肝、心、脑、肾、肺组织中的表达变化,为研究CVB感染引发病毒性疾病与组织中CAR表达水平的关联性提供参考。方法采用荧光实时定量PCR和Western blot法测定正常BALB/c乳鼠肠、肝、心、脑、肾、肺组织中CAR受体在核酸水平和蛋白水平的相对表达量。结果定量PCR显示CAR在乳鼠脑、肺、肠组织中表达显著高于肝、肾、心组织,差异均有显著性(P<0.01)。Western blot检测发现与定量PCR结果基本一致。结论 CAR的表达存在组织特异分布的特点。
- 汤洁孙芳李玉霞凌焱毛艳李伟东尹登科王成永陈惠鹏
- 关键词:荧光实时定量PCRWESTERNBLOT
- caspase重组酶原及其编码基因与应用
- 本发明公开了caspase重组酶原及其编码基因与应用。所述caspase重组酶原氨基酸序列由组成具蛋白酶活性的caspase的蛋白质亚基序列及连接所述蛋白质亚基序列的连接肽序列组成;所述连接肽序列中的至少一个序列为包含3...
- 凌焱陈惠鹏李玉霞李炳娟孙芳毛艳李伟东刘刚岳俊杰张景海吴逊白东梅梁龙周围李北平高原
- 文献传递