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H5N1亚型禽流感病毒HA，NA，M和NP的原核表达及抗体制备: 流感病毒 HA,NA,M 和 NP 蛋白在诱导机体抗病毒免疫中发挥重要作用,是研发抗流感基因工程疫苗的候选组分。我们以禽流感病毒 A/chicken/Hubei/489/2004,(H5N1)HA,NA,M 和 NP 基...; 罗孟成陶攀杨振华潘兹书; 关键词：原核表达; 文献传递

一种H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法: 本发明提供了一种新型H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法。依次包括如下步骤：1)重组质粒rbacmid/HANAM1的构建和提取；2)将重组质粒rbacmid/HANAM1转染Sf9昆虫细胞拯救重组杆状病毒，在S...; 朱丹丹陶攀璩骁潘兹书

H5N1亚型禽流感病毒核蛋白NP的原核表达及抗体制备被引量：4: 2008年; 目的制备H5N1亚型禽流感病毒NP重组蛋白和抗体,为研制含NP组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法提供检测抗原和抗体。方法以H5N1亚型禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NP基因cDNA克隆质粒pMD-NP为模板,PCR扩增获得NP基因抗原区片段,克隆到原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-ΔNP,转化大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIL,IPTG诱导重组蛋白表达。采用Ni亲和层析方法纯化NP重组蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA测定抗体效价;间接免疫荧光检测所制备抗体与真核细胞表达NP蛋白的反应性。结果与结论成功的制备了高效价兔抗NP抗体,抗体效价在105以上,该抗体能与原核和真核系统中表达的NP蛋白特异性反应,为研制以NP蛋白为抗原组分的人禽流感亚单位疫苗和建立评价方法奠定了基础。; 罗孟成陶攀肖庚富潘兹书; 关键词：原核表达多克隆抗体

一种H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法: 本发明提供了一种新型H5N1禽流感病毒样颗粒疫苗的规模化制备方法。依次包括如下步骤：1）重组质粒rbacmid/HANAM1的构建和提取；2）将重组质粒rbacmid/HANAM1转染Sf9昆虫细胞拯救重组杆状病毒，在S...; 朱丹丹陶攀璩骁潘兹书; 文献传递

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶的表达及抗体制备被引量：2: 2007年; 以禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NA基因全长cDNA克隆pMD-NA为模板,PCR扩增第406位至第1 353位基因片段.克隆到pET-28a表达载体,构建重组质粒pET-28/ΔNA,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析证实,截短的NA重组蛋白获得高效表达.采用SDS-PAGE纯化重组蛋白,免疫家兔,制备特异性神经氨酸酶(NA)抗体.ELISA及间接免疫荧光检测结果显示,该抗体效价在1∶1×105以上,能与在大肠杆菌和Vero细胞中表达的NA蛋白产生特异性反应.纯化的NA重组蛋白可用作建立禽流感检测方法的诊断抗原,所制备NA抗体可用于检测禽流感基因工程疫苗中的NA抗原组分.; 杨振华陶攀周思榆吴叔文潘兹书; 关键词：禽流感病毒 H5N1亚型神经氨酸酶抗体

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陶攀