李晓明
- 作品数：12 被引量：27H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 半乳凝集素-3的表达对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:研究半乳凝集素-3(Gal3)的表达对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响。方法:构建Gal3-siRNA的特异表达载体,转染乳腺癌细胞MCF-7,通过建立由siRNA介导的Gal3-knockdown稳定细胞株来研究半乳凝集素-3表达下调对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:利用设计的Gal3-siRNA能够使细胞中半乳凝集素-3的表达降低90%左右;当用凋亡诱导剂处理时,Gal3-knockdown稳定细胞株的凋亡率比野生型细胞株高出近20%。结论:在MCF-7乳腺癌细胞中,半乳凝集素-3具有抑制肿瘤细胞凋亡的功能。
- 李晓明李平马清钧曹诚
- 关键词：MCF-7细胞细胞凋亡
- 一种新的Srrm1/SRm160可变剪接体经历无义突变介导的mRNA降解被引量：1
- 2010年
- 目的:研究基因Srrm1/SRm160的可变剪接。方法:应用RT-PCR研究Srrm1/SRm160的可变剪接,通过蛋白质的翻译抑制和RNA干扰研究剪接异构体是否经历无义突变介导的mRNA降解(NMD)过程。结果:获得Srrm1/SRm160新的可变剪接异构体,该异构体产生提前终止密码子,翻译抑制和RNA干扰证实含有提前终止密码子的剪接体经过NMD而降解。结论:Srrm1/SRm160通过可变剪接和NMD调节自身的表达水平,作为剪接因子进一步调节其他基因的可变剪接。
- 何章荣瞿秀华刘萱李晓明靳彦文李平曹诚
- 关键词：可变剪接
- 冠状病毒核衣壳蛋白与延伸因子-1α的相互作用被引量：1
- 2007年
- 目的:分析SARS冠状病毒(SARS-CoV)核衣壳蛋白(N蛋白)和229E冠状病毒(HCoV-229E)核衣壳蛋白与细胞延伸因子(EF)-1α的相互作用、翻译抑制效应及与多核细胞形成的关系。方法:构建、表达及纯化SARS-N蛋白和229E-N蛋白的GST融合蛋白,用GST-pull down方法分析其与过表达的EF-1α及内源EF-1α之间的相互作用;构建和表达SARS-N蛋白和229E-N蛋白的GFP融合表达载体,转染293T细胞,通过共聚焦显微镜分析SARS-N蛋白和229E-N蛋白的亚细胞定位及多核细胞的形成;在293T细胞中过表达SARS-N蛋白或229E-N蛋白,通过Co-IP分析其与EF-1α的相互作用。分别在细胞内和体外翻译系统中分析二者抑制报告基因翻译的程度。结果:SARS-N蛋白和229E-N蛋白都定位于细胞质,并不像其他冠状病毒的N蛋白那样定位到细胞核;二者都能诱导形成多核细胞,但229E-N蛋白导致细胞形成多核细胞的时间要晚;二者都能与EF-1α相互作用并且共定位于细胞质,二者都能导致EF-1α形成多聚体;二者在细胞内及细胞外对报告基因都有抑制翻译效应。结论:SARS冠状病毒和229E冠状病毒的核衣壳蛋白均定位于细胞胞质,可与EF-1α相互作用,导致EF-1α形成多聚体,抑制报告基因翻译及导致细胞形成多核。
- 王秋娜周冰刘萱杨尧李晓明陈亮靳彦文李平马清钧曹诚
- 关键词：SARS冠状病毒核衣壳蛋白多聚体
- 分子靶向抗肿瘤药物研究进展被引量：14
- 2009年
- 分子靶向抗肿瘤药物有独特的靶向抗肿瘤作用,在当前临床治疗中已发挥重要作用,并显示出良好的应用前景。根据其分子的大小可将分子靶向抗肿瘤药物分为大分子单克隆抗体类和小分子化合物类,我们简要综述了这2类分子靶向抗肿瘤药物的研究进展。
- 李娟李延团李晓明曹诚
- 关键词：单克隆抗体小分子化合物
- 非受体酪氨酸激酶c－Abl特异性抑制剂的新用途
- 本发明公开了一种非受体酪氨酸激酶c－Abl特异性抑制剂的新用途，即在制备抗肿瘤药物或肿瘤治疗辅助药物中的应用。实验证明非受体酪氨酸激酶c－Abl特异性抑制剂通过抑制c－Abl的激酶活性可导致Gal3发生变性聚集并通过溶酶...
- 李晓明曹诚马清钧刘萱靳彦文
- 文献传递
- U2AF65蛋白表达水平影响基因UBQLN1的可变剪接被引量：1
- 2010年
- 目的:研究U2AF65蛋白的表达水平对基因UBQLN1可变剪接的影响。方法:应用pSR-GFP/Neo载体构建2个U2AF65-siRNA干扰载体,转染293T细胞,通过Western印迹、QRT-PCR检测干扰效果,RT-PCR验证基因UBQLN1的可变剪接。结果:利用设计的U2AF65-siRNA能够干扰细胞中U2AF65的表达;RT-PCR结果显示U2AF65表达水平的下降促使UBQLN1第8外显子的跳跃增加。结论:U2AF65可以通过表达水平的变化参与调控基因UBQLN1的可变剪接。
- 瞿秀华刘萱李晓明李平马清钧曹诚
- 关键词：RNA干扰可变剪接
- 剪接因子1N端1-320氨基酸片段的原核表达及纯化
- 2010年
- 目的:通过扩增剪接因子1(SF1)的N端1-320氨基酸(aa)片段对应的cDNA,构建His融合蛋白原核表达质粒pET-28a(+)/SF1(1-320aa),在大肠杆菌中诱导表达并进行亲和纯化。方法:PCR扩增SF1的1-320 aa片段对应的cDNA,扩增产物和载体pET-28a(+)经酶切回收,连接载体和目的片段,获得重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,挑取克隆、酶切鉴定、测序,将测序正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和West-ern印迹分析蛋白表达情况,亲和纯化His-SF1(1-320aa)。结果:SF1片段以正确的读框插入pET-28a(+),IPTG可以诱导大肠杆菌表达重组蛋白,SDS-PAGE和Western印迹证实得到相对分子质量约为40×103的蛋白,亲和纯化得到高纯度蛋白质。结论:构建了His融合蛋白原核表达质粒pET-28a(+)/SF1(1-320aa),并获得His-SF1(1-320aa)融合蛋白,为进一步研究SF1和U2AF65之间的相互作用及对剪接体形成的影响提供了基础。
- 瞿秀华刘萱李晓明李平马清钧曹诚
- 关键词：原核表达纯化
- 半乳凝集素-3与肿瘤形成和转移的关系研究进展被引量：1
- 2007年
- 半乳凝集素-3是β-半乳糖苷凝集素家族的蛋白,广泛分布于各种正常组织和肿瘤组织,在不同的生理及病理条件下发挥着多种生物功能。目前有关半乳凝集素-3与肿瘤细胞的黏附、增殖、血管生成、肿瘤组织的发展及转移的研究取得了较大的进展,并成为疾病诊治特别是癌症治疗的很有前景的靶标。简要综述了半乳凝集素-3与癌症相关性的研究进展。
- 李晓明曹诚马清钧
- 关键词：肿瘤发展
- 利用小干涉RNA抑制肿瘤细胞MCF-7中NF-IL6的表达被引量：2
- 2005年
- RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。转录因子NF-IL6特异地在肿瘤组织中过量表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。构建能够沉默转录因子NF-IL6表达的小干涉RNA(siRNA)质粒,转染肿瘤MCF-7细胞后,用Western印迹法和荧光素酶活性实验检测NF-IL6表达水平和转录活性的改变。结果发现NF-IL6的表达水平被下调80%,转录激活能力降低了60%,转染细胞内部出现大量空洞,细胞增殖停滞。
- 李晓荣李平杨尧李晓明彭丽曹诚马清钧
- 关键词：小干涉RNA蛋白表达转录活性肿瘤
- 格列卫与多西紫杉醇联合对人乳腺癌细胞株MCF-7及其裸鼠移植瘤的作用被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨分子靶向药物格列卫与多西紫杉醇联合对人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡及其裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:采用流式细胞检测仪检测MCF-7细胞在格列卫与多西紫杉醇单独处理及共同处理条件下的凋亡率;建立人乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型,观察格列卫与多西紫杉醇单独治疗组及联合治疗组移植瘤的生长,计算抑瘤率。结果:MCF-7细胞在格列卫与多西紫杉醇共同处理条件下的凋亡率(50.86%)远高于多西紫杉醇单独处理(22.06%)及同剂量格列卫组单独处理(8.13%)条件下的凋亡率;高剂量多西紫杉醇与格列卫联合组肿瘤质量与单独多西紫杉醇组比较,差异虽然没有显著性,但联合组抑瘤率高达99.55%,高于多西紫杉醇组(97.43%),q值为1.014;中剂量多西紫杉醇与格列卫联合组肿瘤质量与单独多西紫杉醇组比较,差异有高度显著性,联合组抑瘤率达96.53%,高于多西紫杉醇组(92.01%),q值为1.02;低剂量多西紫杉醇与格列卫联合组肿瘤质量与单独多西紫杉醇组比较,差异有高度显著性,联合组抑瘤率达68.20%,高于多西紫杉醇组(58.40%),q值为1.004。结论:格列卫与凋亡诱导剂多西紫杉醇共同处理MCF-7细胞能达到协同诱导凋亡的效果;高、中、低剂量的多西紫杉醇与格列卫联合对人乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠移植瘤增殖的抑制具有相加作用。
- 李娟李晓明李平李延团曹诚
- 关键词：格列卫多西紫杉醇凋亡裸鼠乳腺癌
