王俪蒙
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：军事医学科学院卫生学环境医学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗TNF-α人源骆驼化基因工程抗体TsdAb40及其制备方法与应用
- 本发明提供的抗TNF-α人源骆驼化基因工程抗体TsdAb40为序列表中<400>2所示的序列；是通过定点突变技术和核糖体展示技术筛选制备，对于因TNFa过度表达，由免疫介导的炎症性疾病（IMID）药物的应用具...
- 赵小玲陈伟强王俪蒙王静王尚王涛李佩尧
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- 抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体及其制备方法与应用
- 本发明提供的抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体可与Sjp40特异性结合，其抗原特异性结合活性检测中可识别Sjp40，且OD值随着抗体稀释度降低而减小,具有抗原浓度依赖性，所述抗体是由下述方法得到的：（1）收集用纯化的SjP...
- 赵小玲陈伟强闫俊王俪蒙王尚王涛王军孙思明
- 文献传递
- 抗TNF-α骆驼化人源sdAbs库的构建及筛选
- 2013年
- 目的探索有效的抗体稳定性改构策略,筛选制备抗肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)稳定、高亲和力人源抗体。方法基于定点突变技术和核糖体展示技术,对人源抗体片段VH进行骆驼化稳定性改构,构建骆驼化人源单域抗体(single-domain antibodyies,sdAbs)库,以TNF-α作为筛选抗原,筛选特异骆驼化人源sdAbs。结果以前期构建的人源VH/K基因库为模板扩增VH基因;采用定点突变方法,将VH基因FR2中的4个疏水性氨基酸突变为亲水性氨基酸构建人源骆驼化sdAbs基因库;基于核糖体抗体库技术,构建用于核糖体展示的sdAbs基因库;经体外转录翻译后,以重组TNF-α作为筛选抗原,采用亲和富集法淘选特异性抗体基因;将筛选富集mRNA的RT-PCR基因产物克隆,并在原核系统pET-22b(+)/BL21(DE3)中实现可溶性表达,表达产物经ELISA鉴定,确认具有极高ELISA值的阳性克隆12、40,其序列分析表明是全新的抗TNF-α人源sdAbs;抗原特异性结合活性实验显示两者均可以特异性识别TNF-α,而不能与狂犬病毒糖蛋白和BSA结合,表明它们是特异针对TNF-α的人源基因工程抗体,而且均有很好的抗原浓度依赖性。结论该研究将抗体稳定性的定向改造法和进化方法相结合,筛选得到了具有较好抗原特异性和良好稳定性的人源抗体,为稳定性人源抗体的制备提供了理论依据及技术基础。
- 王俪蒙陈伟强张素娟王尚王静王涛乔海晅赵小玲
- 关键词：人源抗体单域抗体肿瘤坏死因子Α
