薛庆海
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 马铃薯脂氢过氧化物裂解酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2009年
- 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),以马铃薯幼叶总RNA为模板,扩增出1443bp的脂氢过氧化物裂解酶(HPL)cDNA(GenBank登录号GQ281583),将该基因片段克隆到表达载体PET-22b(+)上并转化到E.coliBL21(DE3),得到重组菌E.coliBL21(PET-22b-HPL),以0.5mmol/LIPTG诱导该重组菌过量表达目的蛋白(HPL),SDS-PAGE显示,重组HPL分子量为54ku。经紫外分光光度法检测,重组HPL的比酶活约为0.12U/mL。
- 薛庆海沐万孟江波华欲飞
- 关键词:马铃薯CDNA克隆
- Acidothermus cellulolyticus 11B葡萄糖异构酶基因的克隆、表达及酶活性研究被引量:1
- 2011年
- 葡萄糖异构酶是生物法转化葡萄糖为果糖制备果葡糖浆的关键酶。本文克隆到一种葡萄糖异构酶基因xyl,来源于嗜酸耐热型微生物Acidothermus cellulolyticus 11B(ATCC43068)。以pET-22b(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,IPTG可诱导目的重组葡萄糖异构酶过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白样品进行SDS-PAGE分析,在约43kDa处出现显著的特征蛋白条带;活性检测结果表明该重组葡萄糖异构酶具有较高的果糖转化活性。
- 王晓乐薛庆海江波沐万孟
- 关键词:葡萄糖异构酶果葡糖浆克隆
- 海藻酸钠明胶及戊二醛协同固定化苋菜脂氢过氧化物裂解酶被引量:5
- 2010年
- 采用海藻酸钠明胶协同包埋、同时使用戊二醛交联制备固定化苋菜脂氢过氧化物裂解酶,考察了海藻酸钠、明胶浓度、CaCl2浓度、交联剂戊二醛浓度及交联时间等因素对固定化脂氢过氧化物裂解酶的影响;比较了固定化酶与游离酶的酶学性质。结果表明,制备固定化脂氢过氧化物裂解酶的最优条件为:海藻酸钠、明胶浓度分别为1.25%和0.5%,CaCl2浓度为8%,戊二醛浓度为1%,交联时间为20 min。固定化酶的最适温度、最适pH略有提高;温度稳定性、pH稳定性及贮藏稳定性显著提高。
- 薛庆海徐梁沐万孟江波华欲飞
- 关键词:海藻酸钠明胶戊二醛固定化酶学性质