目的验证不同儿茶素单体对HBV的抑制作用,并初步研究对其抗乙型肝炎病毒的分子机制。方法采用稳定表达乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)表面抗原和E抗原的HepG2.2.15细胞系,不同浓度的儿茶素作用于细胞后,ELISA分析HBsAg和HBeAg的表达;以影响HBV转录的几个关键肝富集转录因子(liver-enriched transcription factors,LETFs)为对象,RT-PCR分析转录水平上,不同浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对HepG2.2.15细胞的关键LETFs的表达影响。结果几种儿茶素单体中,EGCG的抗HBV效果最明显;EGCG可明显下调视黄醇X受体α(retinoid X receptorα,RXRα)和胆汁酸受体(farnesoid X receptorα,FXRα)的表达。结论EGCG的抗HBV作用的分子机制可能与其下调HBV转录的关键肝富集转录因子RXRα和FXRα有关。
为了研究ifitm基因的功能,本研究从猪肾PK15细胞中克隆了猪的3个ifitm c DNA序列,分析了猪ifitm1、ifitm2和ifitm3基因的染色体定位及其与其他物种基因序列的同源关系,并对不同ifitm在不同组织的表达进行分析和检测。结果显示,猪ifitm和人、鼠ifitm具有相同的基因和蛋白结构,进化上与牛ifitm高度同源,ifitm1和ifitm3在脾、肾、心、肝等组织中大量表达,而ifitm2只在脾和肾中检测到表达,在其他组织中的表达量相对较小。猪ifitm基因的克隆、生物信息学及组织表达分析为进一步研究其在猪细胞中的功能奠定了基础。
