代阳
- 作品数:9 被引量:45H指数:4
- 供职机构:天津农学院动物科学与动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
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- 一种促进牛骨骼肌卫星细胞体外增殖的方法
- 本发明涉及一种促进牛骨骼肌卫星细胞体外增殖的方法,包括步骤有:包含牛miR-133b基因序列的目的序列的获取:表达载体pEGFP-C1-miR133b的构建:pEGFP-C1-miR133b转染牛骨骼肌卫星细胞:一种促进...
- 丁向彬王轶敏刘新峰郭宏代阳聂永伟陈微微
- 文献传递
- microRNA-128对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响
- 2016年
- 为探究microRNA-128(miR-128)在体内对小鼠失神经腓肠肌的作用,试验建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,将10 nmol miR-128模拟物或miR-128抑制剂注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后经实时定量PCR检测miR-128的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,研究miR-128表达改变对肌肉发育的影响。结果表明:注射miR-128模拟物的失神经腓肠肌组织肌纤维直径显著低于对照组,而注射了miR-128抑制剂的失神经腓肠肌组织肌纤维直径显著增加。说明miR-128在体内具有一定的肌损伤修复功能,在一定程度上能够在体内对肌肉分化发挥调控作用。
- 张蔚然代阳王轶敏刘新峰郭宏丁向彬
- 关键词:小鼠失神经肌肉萎缩肌纤维
- 兔骨骼肌卫星细胞成肌诱导分化及鉴定被引量:6
- 2014年
- 为了研究兔骨骼肌卫星细胞体外分离培养及成肌诱导分化效果,试验采用1日龄幼兔腿部肌肉组织,利用胶原酶联合胰酶消化法分离肌卫星细胞,采用差速贴壁法对原代细胞进行纯化,对纯化后的兔骨骼肌卫星细胞进行低血清诱导分化,于培养皿中培养至形成成熟肌管,观察肌管形成状态,分别采用RT-PCR及免疫荧光染色方法对成肌分化标志性基因肌细胞生成素(Myo G)和肌球蛋白重链(MHC)进行检测。结果表明:新分离出的兔骨骼肌卫星细胞呈梭形,折光性强,2%马血清分化培养液培养3 d后开始出现大量肌管,状态良好,大部分肌管出现收缩跳动现象。RT-PCR检测结果显示,Myo G基因在肌管中表达量较高,在未分化的兔骨骼肌卫星细胞内未表达。免疫荧光染色结果显示,MHC基因在成熟肌管内呈阳性表达。
- 代阳王轶敏刘新峰周朋洋郭宏丁向彬
- 关键词:骨骼肌卫星细胞诱导分化肌管
- 牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化被引量:29
- 2014年
- 本研究对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养、诱导分化和鉴定,采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,观察卫星细胞及诱导分化后肌管的形态结构,并利用标志基因的反转录PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色方法对分化前后细胞进行鉴定。结果显示,分离出的肌卫星细胞呈梭形生长,生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,纯化后的肌卫星细胞纯度大于93%;诱导分化后,卫星细胞融合生长,形成的肌管状态良好,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究建立了一套从牛肌肉组织中分离和鉴定肌卫星细胞的方法,可以为肌肉的发育分化和肉牛肉质改良研究提供良好的细胞模型。
- 王轶敏代阳刘新峰刘中伟李吉霞郭宏丁向彬
- 关键词:骨骼肌卫星细胞细胞培养细胞分化
- microRNA-128对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的调控机制研究
- 已有研究证明microRNA(miRNAs)在肌肉细胞增殖和分化过程中发挥了重要作用,目前有关miRNAs对牛肌肉生长发育影响的相关研究还比较少,本研究通过建立牛骨骼肌卫星细胞体外成肌诱导分化模型,结合前期研究结果,对m...
- 代阳
- 关键词:骨骼肌卫星细胞SP1成肌分化
- 文献传递
- 小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定被引量:8
- 2014年
- 采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离小鼠骨骼肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,并利用RT-PCR和免疫荧光染色方法对分化前后细胞的标志基因进行鉴定。结果显示:分离出的肌卫星细胞生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,诱导分化形成肌管后,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究成功从小鼠肌肉组织中分离出了肌卫星细胞,并具有很好的体外分化能力,可以为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供良好的细胞模型。
- 代阳王轶敏刘新峰樊晗璐李吉霞郭宏丁向彬
- 关键词:小鼠骨骼肌卫星细胞细胞培养
- microRNA-139对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响被引量:1
- 2016年
- 为探究microRNA-139(miR-139)在体内对小鼠失神经腓肠肌是否具有一定的作用,本研究建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,然后将10 nmol miR-139 inhibitors注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后qRT-PCR检测miR-139的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,RT-PCR和Western blot检测MHC的表达量,研究miR-139表达改变对肌肉发育的影响。结果显示:与对照相比,miR-139 inhibitors注射后显著增加失神经肌肉萎缩部位的肌纤维直径,说明miR-139对体内肌肉的发育分化过程具有一定的调控作用。
- 王轶敏张琬张蔚然代阳刘新峰李新郭宏丁向彬
- 关键词:小鼠失神经肌萎缩
- 碱性成纤维细胞生长因子对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响被引量:2
- 2015年
- 为研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,试验对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养,在生长培养基和分化培养基中分别添加bFGF,观察细胞生长及分化情况,绘制细胞生长曲线,并进行EDU细胞增殖检测试验。结果显示,添加了bFGF培养基的细胞生长状态较对照组良好,细胞增殖速度快,细胞增殖率显著高于对照组(P<0.05),说明bFGF对牛骨骼肌卫星细胞在生长培养基和分化培养基中增殖都具有良好的促进作用。本研究建立了一种高效的牛骨骼肌卫星细胞培养方案,为骨骼肌卫星细胞的研究利用提供参考。
- 张蔚然代阳王轶敏刘新峰王婷郭宏丁向彬
- 关键词:骨骼肌卫星细胞碱性成纤维细胞生长因子细胞增殖
- 一种促进牛骨骼肌卫星细胞体外增殖的方法
- 本发明涉及一种促进牛骨骼肌卫星细胞体外增殖的方法,包括步骤有:包含牛miR-133b基因序列的目的序列的获取:表达载体pEGFP-C1-miR133b的构建:pEGFP-C1-miR133b转染牛骨骼肌卫星细胞:一种促进...
- 丁向彬王轶敏刘新峰郭宏代阳聂永伟陈微微
- 文献传递