朱义广
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 晶胞粘连控制基因簇的克隆及在防止晶体降解中的应用
- 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体公开了一种来自于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连控制基因簇的分离、克隆及其在防止晶体降解中的作用。本发明从具有典型晶胞粘连表型的苏云金芽胞杆菌YBT-020中克隆得到控制...
- 孙明朱义广纪芳尚卉朱倩王鹏霞徐承晨邓运付菁菁
- 晶胞粘连控制基因簇的克隆及在防止晶体降解中的应用
- 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体公开了一种来自于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连控制基因簇的分离、克隆及其在防止晶体降解中的作用。本发明从具有典型晶胞粘连表型的苏云金芽胞杆菌YBT-020中克隆得到控制...
- 孙明朱义广纪芳尚卉朱倩王鹏霞徐承晨邓运付菁菁
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连基因簇的克隆及内生质粒pBMB26和pBMB28的序列分析和功能验证
- 苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis）是一种革兰氏阳性菌，主要特征是在形成芽胞的过程中伴有杀虫晶体蛋白组成的伴胞晶体的形成。大多数苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体在母细胞一侧形成，当芽胞成熟母细胞裂解后，...
- 朱义广
- 关键词：苏云金芽胞杆菌基因组
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连基因簇的克隆及内生质粒pBMB26和pBMB28序列分析与功能验证
- 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是一种革兰氏阳性菌,主要特征是在形成芽胞的过程中伴有杀虫晶体蛋白组成的伴胞晶体的形成。大多数苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体在母细胞一侧形成,当芽胞成熟母细胞裂解后,...
- 朱义广
- 关键词：苏云金芽胞杆菌复制子基因组
- 文献传递
- 苏云金芽胞杆菌质粒p26复制功能区的克隆被引量：1
- 2011年
- 利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区。为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoRⅠ酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,获得复制子克隆载体pHT304E;随后,将12kbEcoRⅠ片段亚克隆到载体pHT304E上电转化无晶体突变株BMB171,获得具有抗性的转化子,证明该片段具有复制功能。缺失实验证明最小复制功能区包含2个必需的ORF。经过40代无抗培养,最小复制区复制稳定性达到90%以上。
- 季思思朱义广彭东海阮丽芳孙明
- 关键词：苏云金芽胞杆菌质粒细菌人工染色体文库克隆复制子缺失突变
- 苏云金芽胞杆菌大质粒pBMB28的克隆被引量：1
- 2011年
- 苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020具有典型的晶胞粘连表型。在前期的研究中,通过质粒消除实验,推测晶胞粘连现象与YBT-020内生质粒pBMB28有关。为了定位质粒pBMB28上控制晶胞粘连表型的基因,首先对质粒pBMB28进行克隆。利用穿梭载体pEMB0557,成功构建了苏云金芽胞杆菌YBT-020的基因组人工染色体(BAC)文库。前期的研究表明晶体蛋白基因cry28Aa定位在质粒pBMB28上,根据cry28Aa基因序列设计引物,从文库中筛选到含有cry28Aa的重组质粒pBMB231。镜检和SDS-PAGE证明质粒pBMB231转化无晶体突变株BMB171形成的重组子BMB231可以产生Cry28Aa晶体蛋白,但不能恢复晶胞粘连表型。对重组质粒pBMB231的插入片段末端序列测定并设计引物筛选文库,通过染色体步移方式得到4个可以重叠覆盖质粒pBMB28不同区域的克隆子,从而克隆了该质粒。对这4个克隆子末端测序和酶切分析,测算出该质粒的大小约为140 kb。进一步确定应用基因组BAC文库以及重叠片段筛选的方法,可以快速有效的克隆苏云金芽胞杆菌大质粒。
- 戚军良朱义广尚卉纪芳朱倩孙明
- 关键词：苏云金芽胞杆菌质粒BAC文库染色体步移
