高胜岩
- 作品数:8 被引量:14H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 汉坦病毒SEO型S基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量:2
- 2008年
- 目的构建汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体。方法应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒SEO型的YZG-Changchun株S基因,克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定及PCR分析后,定向克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coliRosetta,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析外源蛋白的表达情况。结果表达载体经双酶切和测序证明构建正确。IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导4.5 h时,S基因在原核细胞中得到了高效表达,表达的蛋白占菌体蛋白总量的37%,纯化后的蛋白具有良好的抗原活性。结论已成功构建了汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体,并得到高效表达。
- 袁子国张秀香李修明张守峰徐慧娟高胜岩王晓虎扈荣良
- 关键词:汉坦病毒S基因原核表达
- 伪狂犬病病毒TK^-/gI^-株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达
- 2008年
- 伪狂犬病病毒TK-/gI-株基因组经AscⅠ酶切获得含PK基因的8.7kb片段,将此片段克隆入pPolyⅡ载体的AscⅠ位点,获得中间载体P8-AA,将LacZ表达盒插入其SphⅠ/NdeⅠ位点,构建重组转移载体P8AA-lacZ,将其与伪狂犬病病毒TK-/gI-株基因组共转染PK-15细胞,细胞出现病变后通过覆盖含有X-gal的营养琼脂进行蓝白斑筛选,通过蚀斑克隆方法分离到重组体PRV(rPRV),且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-半乳糖苷酶活性。通过对重组病毒PRV-LacZ和亲本株TK-/gI-株TCID50的试验表明,PK基因的缺失对病毒增殖无影响。
- 袁子国张秀香刘全高胜岩徐慧娟张守峰刘晔扈荣良
- 关键词:伪狂犬病病毒胸苷激酶基因LACZ基因
- 汉坦病毒长春分离株YZG-Changchun S基因片段克隆和序列分析
- 2007年
- 肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with RenalSyndrome,HFRS)和汉坦病毒肺综合征(Hantavirus Pulmonary Syndrom.HPS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属中的病原体引起的一种病情重、病死率高的自然疫源性急性传染病。目前发现汉坦病毒有20多种血清型,在我国主要流行汉滩病毒(Hantaan virus,HT-NV)和汉城病毒(Seoul virus,SEOV)2种型别病毒。
- 袁子国张秀香郝雪李修明张守峰徐慧娟高胜岩王晓虎扈荣良
- 关键词:汉坦病毒基因片段肾综合征出血热分离株克隆
- 日本血吸虫多价核酸疫苗的构建及免疫保护实验
- 利用PCR技术获得日本血吸虫GST抗原基因,通过分子克隆技术将GST,FABP基因克隆至pVAX1载体,并将其克隆至含有Sj23基因表达核的pIRESneo载体,构建重组质粒pVAX-GST,pVAX-GST-FABP,...
- 翟羽佳刘全高胜岩姜丽门静涛商立民魏峰林矫矫傅志强朱兴全
- 文献传递
- 日本血吸虫复合表位重组伪狂犬病病毒的实验免疫研究
- 为研制血吸虫重组病毒疫苗,通过同源重组的方法成功的构建了表达日本血吸虫复合表位基因的重组伪狂犬病病毒和复合表位核酸疫苗,并对获得的重组病毒和表位核酸苗进行了小鼠和绵羊的免疫试验。选取包括磷酸
- 门静涛刘全高胜岩商立民林矫矫傅志强朱兴全
- 文献传递
- 日本血吸虫多价DNA疫苗的构建及免疫保护性研究
- 日本血吸虫病是一种危害严重的人畜共患寄生虫病,目前仍以药物(吡喹酮)治疗为主。但是药物治疗不能阻断血吸虫病的传播与流行。因此加强血吸虫疫苗的研究是控制我国血吸虫病的有效措施。
本研究应用基因工程技术构建了日本血...
- 高胜岩
- 关键词:日本血吸虫核酸疫苗免疫保护性
- 文献传递
- 日本血吸虫多价核酸疫苗的构建及免疫保护试验被引量:9
- 2009年
- 利用PCR技术获得日本血吸虫GST抗原基因,通过分子克隆技术将GST、FABP基因克隆至pVAX1载体,并将其克隆至含有Sj23基因表达核的pIRESneo载体,构建重组质粒pVAX-GST、pVAX-GST-FABP、pIRESneo-Sj23和pIRESneo-GST-FABP-Sj23。将50只昆明小鼠随机分成5组,每组10只,分别以肌肉注射质粒pIRESneo-GST-FABP-Sj23、pIRESneo-Sj23、pVAX-GST、pVAX-GST-FABP和空白质粒pIRESneo,50μg/只,免疫2次,每次间隔21 d。测定小鼠免疫前后血清抗体水平,30 d经腹部皮肤感染血吸虫尾蚴,45 d后剖杀小鼠,计数各组小鼠虫卵数及成虫数。结果表明,重组质粒pVAX-GST、pIRESneo-Sj23、pVAX-GST-FABP和pIRESneo-GST-FABP-Sj23均能诱导小鼠产生特异性的IgG抗体,pIRESneo-GST-FABP-Sj23免疫组所诱导的IgG水平最高;减虫率分别为26.1%、30.8%、33.2%和47.5%;减卵率分别为25.4%、45.0%、48.4%和69.8%。pIRESneo-GST-FABP-Sj23的减卵率和减虫率明显高于其他DNA疫苗。结果表明,日本血吸虫多价核酸疫苗能产生较强的免疫反应,并能获得较好的免疫保护效果。
- 魏峰翟羽佳刘全高胜岩门静涛商立民林矫矫傅志强朱兴全
- 关键词:日本血吸虫SJ23脂肪酸结合蛋白GST多价DNA疫苗
- 长春地区孕产妇和肿瘤病人血清弓形虫抗体IgG的检测被引量:3
- 2008年
- 目的检测长春地区孕产妇和肿瘤病人弓形虫感染抗体IgG。方法采用酶联免疫吸附试验对47例孕产妇和267例恶性肿瘤病人血清标本进行弓形虫抗体检测。结果长春地区孕产妇和肿瘤病人血清弓形虫抗体IgG阳性率分别为10.64%和23.97%,显著高于健康人群阳性率6.08%(P<0.05);鼻咽癌和直肠癌患者弓形虫抗体IgG阳性率高于其他类型肿瘤病人(P<0.01)。结论孕产妇和肿瘤病人为弓形虫易感人群,应作常规性弓形虫抗体检测。
- 刘全袁子国高胜岩刘斌刘晓枫
- 关键词:孕产妇弓形虫抗体ELISA