吴璟 作品数:23 被引量:97 H指数:6 供职机构: 宁夏医科大学 更多>> 发文基金: 宁夏回族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 宁夏回族自治区教育厅基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
FcRn介导的抗细粒棘球蚴靶向黏膜疫苗载体的构建方法 本发明公开了一种FcRn介导的抗细粒棘球蚴靶向黏膜疫苗载体的构建方法,包括如下步骤:(1)目的基因Eg95的扩增(2)小鼠野生型Fc片段(Fc/wFc)和突变型Fc片段(Fc/mFc)的扩增(3)Eg95-Fc/wFc(... 王志昇 杨文 陈健茂 李丽 林源 邱红燕 吴璟 马学平文献传递 细粒棘球蚴Eg95蛋白减毒沙门氏菌重组株的构建与免疫原性分析 被引量:6 2014年 目的探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)为载体构建细粒棘球蚴口服活载体疫苗的可行性。方法将细粒棘球蚴Eg95基因插入到表达载体p YA3341中,构建重组质粒p YA3341-Eg95,并用PCR和酶切鉴定。将重组质粒先后电转入减毒沙门氏菌X3770和X4550,获得重组菌株St-Eg95,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组菌Eg95蛋白的表达情况。将重组菌St-Eg95体外培养传10代,每隔一代提取质粒,利用PCR鉴定重组质粒的稳定性。BALB/c小鼠30只,随机均分为6组,其中4组分别经口灌胃给予St-Eg95 1×109、1×1010、1×1011和1×1012 cfu/ml,100μl/只,余下2组分别经口灌胃给予等体积野生型沙门氏菌1×107 cfu/ml和PBS,常规饲养30 d,观察生存情况。另取15只BALB/c小鼠,均分为3组,分别为St-Eg95免疫组、阴性对照组和空白对照组,St-Eg95组和阴性对照组按5×1010cfu/ml剂量的重组菌和阴性菌分别经口灌胃免疫小鼠,0.5 ml/(只·次),共2次,间隔2周。分别于免疫前和末次免疫后2、4和6周采血,收集血清。用细粒棘球蚴Ig G抗体检测试剂盒(间接ELISA)检测Eg95蛋白的Ig G抗体滴度。于末次免疫后6周处死小鼠,用噻唑蓝(MTT)法检测特异性脾淋巴细胞增殖活性。结果经PCR和酶切鉴定表明,重组质粒p YA3341-Eg95构建成功,在重组菌St-Eg95中有目的蛋白Eg95的表达,相对分子质量(Mr)约为18 000,与预期大小一致。重组菌传10代后,PCR仍可扩增到约486 bp的Eg95基因片段。安全性实验结果显示,灌胃给予重组菌和PBS的小鼠30 d后均存活,活动正常;给予野生型沙门氏菌的小鼠均于4 d后死亡。间接ELISA检测结果显示,末次免疫后2周St-Eg95组小鼠特异性Ig G抗体水平即明显升高,显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);末次免疫后4周抗体水平达到最高值,约1∶1 700。小鼠淋巴细胞增殖试验结果显示,末次免疫后6周,St-Eg95组小鼠的脾淋巴细胞刺激指数(SI值)达到1.94±0 王志昇 吴璟 林源 李红兵 刘强 王志辉 郎多勇 杨文关键词:细粒棘球蚴 EG95 减毒沙门氏菌 免疫原性 氧化槐果碱对小鼠炎症性疼痛的镇痛作用研究 被引量:14 2017年 目的研究氧化槐果碱对二甲苯和角叉菜胶诱导的小鼠炎症性疼痛的影响,以探索其可能的机制。方法 ICR小鼠50只,随机分为模型组、ASP治疗组、氧化槐果碱高、中、低剂量组,各组分别给予对应药物1 h后,采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验和角叉菜胶诱导的小鼠足趾肿胀实验,研究氧化槐果碱对小鼠各种炎症性刺激的影响。结果与生理盐水组相比,氧化槐果碱各剂量组能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀程度和角叉菜胶致小鼠足趾肿胀程度;小鼠足组织的TNF-α,IL-1β,IL-6和PGE2水平显著降低。结论 OSC对角叉菜胶诱导的炎性疼痛具有明显的镇痛作用,可能与其抑制炎性因子的分泌有关。 吴璟 杨文 郑婕 杨洋 黎伟华 赵玉萍 李凤梅 马鹏生 余建强关键词:氧化槐果碱 炎性疼痛 炎性细胞因子 健脾补肾方对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞抑制作用及对Ki-67表达影响的研究 被引量:1 2012年 目的观察健脾补肾方对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞的抑制作用及对Ki-67表达影响。方法采用Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型观察健脾补肾方抗肿瘤的作用,并采用HE染色观察各组肿瘤细胞的凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67增殖抗原蛋白的表达情况。结果与对照组相比,健脾补肾方低剂量组能增加荷瘤小鼠胸腺指数,有统计学意义(P<0.05)。低、高剂量健脾补肾方与CTX合用,能对CTX所致荷瘤小鼠胸腺萎缩有一定的拮抗作用。健脾补肾方能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织Ki-67蛋白的表达水平。结论健脾补肾方对小鼠Lewis肺癌具有显著的抗肿瘤作用,以健脾补肾方高剂量加环磷酰胺组最佳。其作用机制可能与该药能降低肿瘤组织Ki-67蛋白的表达水平有关。 马科 吴学勤 周丽萍 马治国 边静 吴璟关键词:健脾补肾方 LEWIS肺癌 枸杞籽油对C57BL/6J小鼠2型糖尿病肾脏损伤干预作用的研究 被引量:2 2012年 目的研究枸杞籽油对C57BL/6小鼠2型糖尿病肾脏损伤的干预作用。方法采用以高脂饲料饲喂后的C57BL/6小鼠,单次腹腔注射链脲佐菌素70mg.10g-1,建立小鼠2型糖尿病模型。设正常对照组、糖尿病肾损伤模型组、二甲双胍(3.0mg.10g-1)治疗组、枸杞籽油(0.05、0.1 mL.10g-1)两个剂量治疗组。给药5周后检测各组小鼠给药后的血糖、尿糖2、4h尿量2、4h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾脏白介素-8含量、肾脏病理变化。结果枸杞籽油各剂量组与糖尿病模型组比较,可降低2型糖尿病模型小鼠的血糖、尿糖、24h尿量和尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾脏白介素-8含量,肾脏病变得到明显改变(P<0.05或0.01)。结论枸杞籽油能降低C57BL/6小鼠2型糖尿病的血糖、尿糖、24h尿量和尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球面积、肾组织白介素-8的含量,具有防治糖尿病肾损伤发生的作用。 杨文博 李红兵 吴璟 李继孝 朱明星 杨卫东关键词:2型糖尿病 C57BL/6小鼠 肾脏损伤 细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达 被引量:2 2015年 目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,用于开发包虫病新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增细粒棘球蚴Eg95和Eg.ferritin基因,采用基因拼接法将Eg95和Eg.ferritin融合,将该融合基因Eg95-Eg.ferritin插入到p Fast Bac DUAL载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf-9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blot鉴定。结果成功克隆了Eg95和Eg.ferritin基因,通过柔性氨基酸linker成功获得了融合基因Eg95-Eg.ferritin,经PCR和酶切鉴定成功构建了重组质粒p Fast Bac DUAL-Eg95-Eg.ferritin,Western blot结果证实表达蛋白能够被包虫病人标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达了细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,与包虫病人标准阳性血清具有良好的反应性。 李红兵 杨文 陈健茂 刘强 王志辉 张昕 吴璟 郎多勇 王志昇关键词:细粒棘球蚴 杆状病毒 枸杞籽油对慢性脑低灌注损伤大鼠的保护作用 被引量:4 2013年 目的观察枸杞籽油对慢性脑低灌注损伤大鼠空间记忆及皮层自由基代谢的影响。方法 SD大鼠50只,随机分为假手术组、模型组及枸杞籽油高、中、低剂量组,除假手术组外,其余各组经双侧颈动脉结扎建立慢性脑低灌注损伤模型,枸杞籽油80、40、20μL.kg-1灌胃60 d后,进行Morris水迷宫实验,检测其空间记忆能力,水迷宫实验结束后,取大鼠海马及皮层组织测其T-AOC活力及丙二醛(MDA)含量。结果与假手术组相比,模型组出现明显的学习记忆障碍,治疗组较模型组学习记忆障碍有明显改善。与模型组相比,治疗组脑组织内T-AOC活性显著升高,MDA含量明显降低。结论枸杞籽油能明显减轻大鼠慢性脑缺血所致认知功能障碍,可能与其清除自由基作用有关。 吴璟 张晓艳 李红兵 杨文博关键词:MORRIS水迷宫 T-AOC 丙二醛 氧化苦参碱对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用 被引量:5 2010年 目的观察氧化苦参碱(OM)对卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤后肝组织匀浆中一氧化氮(NO)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素1(IL-1)活性的影响。方法除阴性对照组外,给予其余小鼠BCG+LPS诱导建立免疫性肝损伤小鼠模型,氧化苦参碱高、中、低剂量灌胃给药10d后,取肝组织匀浆,测定各组小鼠肝匀浆中的NO、iNOS及TNF、IL-1。结果 OM可明显降低肝匀浆中的NO、iNOS、TNF、IL-1含量(P<0.01)。结论 OM对BALB/c小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,保肝机制可能与其增强抗氧化活性有关。 吴璟 赵迎华 杨文博 杨卫东关键词:氧化苦参碱 一氧化氮 诱生型一氧化氮合酶 肿瘤坏死因子 白介素1 复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清NO及iNOS水平影响的实验研究 被引量:22 2009年 目的:观察复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠血清NO及iNOS水平的影响,探讨其治疗CAG的作用机制。方法:采取55℃热盐水、2%水杨酸、20mmol/L脱氧胆酸钠三个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型。将实验动物分为正常对照组,模型对照组,维酶素组,复方蜥蜴散高、中、低剂量组。检测大鼠血液中NO和iNOS水平及观察胃黏膜组织学方面的改变。结果:模型组大鼠NO和iNOS水平明显高于正常组(P<0.01),病理组织学上也有较大改变,而经复方蜥蜴散治疗1个月后,NO和iNOS水平恢复正常,胃黏膜病理组织学改善明显。结论:复方蜥蜴散可以逆转萎缩胃黏膜的病理改变,发挥保护胃黏膜的作用。 朱微微 朱西杰 吴璟 张静霜 陈健茂关键词:CAG INOS 氧化苦参碱对BALB/c小鼠免疫性肝损伤保护作用的机理研究 被引量:9 2012年 目的观察氧化苦参碱对BCG+LPS诱导的BALB/c小鼠免疫性肝损伤后肝、脾脏指数的影响以及对肝组织匀浆谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)活性的影响。方法取♂BALB/c小鼠60只,随机均分为正常对照组、模型组、联苯双酯治疗组及氧化苦参碱高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组BCG+LPS诱导建立免疫性肝损伤小鼠模型,氧化苦参碱高、中、低剂量ig 10 d后,称取肝、脾脏重量,取肝组织匀浆测各组GSH-Px、T-AOC及MDA的含量。结果氧化苦参碱可明显降低肝、脾脏指数,增加肝匀浆中降低的GSH-Px、T-AOC的含量(P<0.05),并降低MDA的含量。结论氧化苦参碱对BALB/c小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用,可能与其增强抗氧化活性等有关。 吴璟 杨文博 孙志国 李红兵 杨卫东关键词:氧化苦参碱 总抗氧化能力 丙二醛 联苯双酯