严虹
- 作品数:4 被引量:42H指数:2
- 供职机构:南京市胸科医院更多>>
- 发文基金:南京市医学科技发展项目南京市卫生局医学科技发展项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 2005-2014年南京地区结核分枝杆菌分离株耐药特点的动态观察分析
- 胡春梅张侠严虹
- 荧光定量PCR探针熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用被引量:34
- 2016年
- 目的应用荧光定量PCR探针熔解曲线法检测耐多药结核病患者的临床分离菌株对一线抗结核药物的耐药基因突变。方法于2009年1月1日至2012年12月31日留取南京市胸科医院结核科门诊部或住院的所有肺结核患者痰液标本,每人3~5ml,均进行痰结核分枝杆菌培养、鉴定和药物敏感性试验(简称“药敏试验”),分离出结核分枝杆菌菌株67株。应用荧光定量PCR探针熔解曲线法,根据靶序列熔点变化,实时PCR检测结核病患者的临床分离标本对利福平、异烟肼、乙胺丁醇及链霉素的耐药情况;通过与传统药敏试验进行对比,对2种结果不一致的菌株进行基因测序分析,探讨其发生突变的位点差异,并观察在治疗中的变化。结果利福平和异烟肼的表型和基因型检测具有较高的一致性,分别为99%(66/67)和97%(65/67),不一致的菌株都是表型检测法为耐药,而基因型检测为敏感,测序未检测到突变。乙胺丁醇和链霉素的表型和基因型检测一致性较低,分别为60%(40/67)和75%(50/67)。测序发现,乙胺丁醇的突变发生在embB306和embB406位点上;链霉素突变发生在rrs基因517位点和907位点,以及rpsL43耐药密码子。结论应用荧光定量PCR探针熔解曲线法,能快速筛查结核分枝杆菌对一线抗结核药物的耐药情况。
- 胡春梅郭晶严虹施旭东张侠
- 关键词:结核耐药基因
- 糖脂毒性作用下小鼠胰岛miRNA的表达谱变化被引量:1
- 2016年
- 目的:初步探索长期高糖和/或高脂培养对小鼠原代胰岛中miRNA表达的影响。方法选取B6小鼠原代胰岛作为研究对象,提取RNA后通过生物芯片高通量筛选法及RT-PCR法检测并统计胰岛中表达水平变化的miRNA种类;生物信息学方法预测变化显著的miRNA的下游靶基因并通过Western印迹法验证预测结果。结果生物芯片与定量PCR结果均显示,高糖和/或高脂培养后原代胰岛中相当一部分miRNA的表达发生了显著改变,其中miR320在高糖、高脂和高糖高脂联合培养下表达均呈上升趋势,通过生物信息学方法预测p85α为其下游靶基因,干扰小鼠胰岛β细胞系中miR320表达后p85α表达明显下降。结论在本实验中,高糖和/或高脂培养会引起原代胰岛中miR?320的表达水平升高,提示miR?320可能通过参与免疫系统的调控从而对2型糖尿病的发生发展产生作用。
- 吴倜珺许茹凤韩晓严虹
- 关键词:糖脂毒性MIRNA
- 探针熔解曲线法快速检测结核分枝杆菌利福平、异烟肼、乙胺丁醇及链霉素耐药突变被引量:10
- 2015年
- 目的评价探针熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平(RIF)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)及链霉素(SM)耐药突变的方法学应用价值。方法用PCR探针熔解曲线法检测110株结核分枝杆菌临床分离株RIF、INH、EMB及SM耐药突变情况,以传统的比例法药物敏感性试验检测结果为标准,评价探针熔解曲线法的敏感性、特异性和一致率,并应用测序方法分析结果不一致菌株的耐药突变位点。结果以比例法检测结果为标准,熔解曲线法检测RIF耐药的敏感性为98.51%,特异性为95.35%,诊断符合率为97.27%;检测INH耐药的敏感性为94.12%,特异性为95.24%,诊断符合率为94.55%;检测EMB耐药的敏感性为88.64%(39/44),特异性为75.76%(50/66),诊断符合率为80.91%(89/110);检测SM耐药的敏感性为82.98%,特异性为80.95%,诊断符合率为81.82%。两种检测方法结果不符菌株的测序结果大部分与熔解曲线法的检测结果一致。结论探针熔解曲线分析法检测速度快,敏感性高,特异性强,可用于结核分枝杆菌耐药突变的快速检测。
- 严虹施旭东胡春梅郭晶张侠
- 关键词:结核分枝杆菌耐药突变利福平异烟肼乙胺丁醇链霉素