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消化酶及胎牛血清对奶牛乳腺上皮细胞培养的影响被引量：2: 2009年; 本试验研究了不同浓度及组合消化酶对奶牛乳腺组织分离的影响以及不同FBS浓度培养基对奶牛乳腺上皮细胞纯化和生长的影响。试验结果表明0.25%胰酶+0.2%Ⅱ胶原酶对组织块分离效果最好,乳腺上皮细胞生长最多,5%与10%浓度FBS对奶牛乳腺上皮细胞纯化效果最好,5%与10%浓度FBS对细胞生长没有明显的差异(p>0.05),但明显高于其他处理组(p<0.01)。; 杨银芬考桂兰高爱武侯先志李大彪王秀美杨苗; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞胎牛血清消化酶

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究被引量：1: 2010年; 本试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为1×106个/mL。采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复。液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察。结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01),处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异(P>0.05),处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01);处理4组的贴比率高于处理2、5、6组,存在极显著差异(P<0.01)。形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其它组生长状态良好。因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。; 王秀美考桂兰侯先志高爱武杨苗杨银芬; 关键词：冻存凋亡率乳腺上皮细胞

黑白花奶牛乳腺上皮细胞冻存方法的研究: 2011年; 试验研究了北方地区黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。采用内蒙古地区健康黑白花奶牛的新鲜乳腺组织,将组织进行Ⅱ型胶原酶消化后原代培养,培养的细胞经5代纯化后将密度调整为1×106个/mL。采用6种处理方法进行冻存,各设3个重复。液氮冻存1个月后,分别将6种不同方法冻存的细胞复苏后测定细胞活性,包括冻存死亡率、贴壁细胞占活细胞的比率、凋亡率等,同时进行形态学观察。结果显示,处理1组与2、3、5组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01),处理1、4、6组间冻存死亡率无显著差异(P>0.05),处理2、6组间冻存死亡率存在极显著差异(P<0.01);处理4组的贴壁率高于处理2、5、6组,存在极显著差异(P<0.01)。形态学观察结果发现,处理1、4组细胞较其他组生长状态良好。因此,处理4可作为黑白花奶牛乳腺上皮细胞的最佳冻存方法。; 王秀美考桂兰侯先志高爱武杨苗杨银芬; 关键词：冻存凋亡率乳腺上皮细胞

牛β-酪蛋白多克隆抗体的制备及鉴定被引量：4: 2010年; 以牛β-酪蛋白标准品为免疫原,免疫健康新西兰白兔,制备了兔抗牛β-酪蛋白的多克隆抗体。经亲和层析纯化后,用SDS-PAGE电泳及考马斯亮蓝染色检测抗体的纯度,经ELISA法测定β-酪蛋白抗体的效价为1∶1600,Western-blot分析发现制备的抗体与β-酪蛋白可以发生特异性结合。表明,成功制备了纯度较高和特异性较好的牛β-酪蛋白多克隆抗体,为乳腺生物反应器的研究提供了有效的工具。; 杨苗侯先志杨银芬考桂兰高爱武王秀美韩亚南; 关键词：Β-酪蛋白多克隆抗体酶联免疫吸附试验

不同冻存液对奶牛乳腺上皮细胞冻存质量的影响被引量：6: 2010年; 试验旨在探究奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)最佳的冻存液以改善乳腺上皮细胞的冻存质量。BMECs传至第5代后分别加入以下10种不同配方的冻存液。A组:85%DMEM+10%胎牛血清+5%DMSO;B组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%DMSO;C组:75%DMEM+10%胎牛血清+15%DMSO;D组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%DMSO;E组:85%DMEM+5%胎牛血清+10%DMSO;F组:75%DMEM+15%胎牛血清+10%DMSO;G组:70%DMEM+20%胎牛血清+10%DMSO;H组:80%DMEM+10%胎牛血清+10%甘油;I组:70%DMEM+10%胎牛血清+20%甘油;J组:60%DMEM+10%胎牛血清+30%甘油,冻存前统一调整细胞密度到1×106个/mL冻存。分别对复苏后的细胞进行台盼蓝染色计算存活率和PI/Hoechst33258双染计算凋亡率。结果表明:BMECs经不同冻存剂冻存复苏后,细胞活力、形态学及凋亡率表现有所不同,其中B组和G组的活力和24h贴壁率较其他组高,二者的凋亡率较低,二者之间差异无显著性(P>0.05);传代后B组细胞的生长状况最好。; 杨苗考桂兰侯先志高爱武李大彪王秀美杨银芬; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞

奶牛乳腺上皮细胞低温保存与复苏培养的初步研究: 本试验以内蒙古地区的荷斯坦牛乳腺组织为材料,在二维水平上培养乳腺上皮细胞,并在此基础上分别研究了不同冻存液、不同冻存方法和不同冻存密度对奶牛乳腺上皮细胞低温保存的影响。 1.采用Ⅱ型胶原酶消化收集细胞的方法进行...; 杨苗; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白; 文献传递

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杨苗