陈小波
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阻抑素在胃肠癌中的表达情况及其临床意义被引量：5
- 2006年
- 目的检测阻抑素(PHB)在胃肠癌中的表达情况,探讨PHB对胃肠肿瘤诊断的价值。方法采用免疫组织化学法检测PHB在胃肠癌癌组织和癌旁组织中的表达情况。结果PHB在胃肠癌组织的表达量明显高于其相应癌旁组织的表达量,差异有极显著性(P<0.01);PHB在低分化胃癌、肠癌组织中的表达量明显高于中分化癌组织,差异有极显著性(P<0.01)。结论PHB在胃肠癌中特异性高表达,检测胃癌、肠癌组织中PHB的表达对胃癌、肠癌及其分化程度具有潜在诊断价值,为胃肠癌的临床诊断和治疗奠定了实验基础。
- 康向东张隆吴蓉盛霞孙健陈小波
- 关键词：胃肠癌免疫组织化学
- VEGFR-2/KDR三区的载体构建、表达及胃癌患者抗-KDR抗体的检测
- 2007年
- 目的扩增人血管内皮细胞生长因子受体-2/激酶插入受体(VEGFR-2/KDR)三区基因,构建表达载体,在大肠埃希菌中表达,获得纯化蛋白。检测胃癌术前患者外周血中抗-KDR抗体水平,为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定基础。方法从人血管内皮细胞株ECV304提取总RNA,逆转录后,聚合酶链反应(PCR)扩增KDR胞外段三区基因,连接到pMD18-T载体测序;酶切后将目的基因插入原核表达载体pET28a(+)构建重组质粒,将重组质粒转化到大肠埃希菌DH5α内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达菌株BL21(DE3),异丙基-β-D硫化半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+-NTA树脂纯化、复性;用获得的蛋白包被酶联免疫吸附试验(ELISA)板,用ELISA检测32例胃癌患者和35名健康对照者外周血抗-KDR抗体水平。结果构建了表达载体pET28a(+)-KDR3,并获得高效表达,表达的蛋白质相对分子质量为16 000,重组蛋白以包涵体形式存在。胃癌患者外周血中抗-KDR抗体水平显著高于健康对照组(P<0.01)。结论VEGFR-2/KDR三区基因成功克隆到表达质粒内并表达。为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定了基础,及可能为胃癌的血清学诊断提供新的方法。
- 陈小波黄锡全张隆谢爽孙健康向东
- 关键词：克隆胃癌
- VEGF_(165)的载体构建、表达及其生物学活性被引量：1
- 2007年
- 目的:构建血管内皮生长因子(VEGF)165原核表达载体,在大肠杆菌中表达,获得重组VEGF165,并通过细胞和鸡胚尿囊膜试验鉴定其生物学活性。方法:本实验室保存的T-VEGF165质粒,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,将其克隆至原核表达载体pET28a(+)中,获得含人VEGF165全序列基因的表达载体pET28a(+)-VEGF165,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化,获得VEGF165蛋白。通过体外促进HUVEC细胞增殖及鸡胚尿囊膜血管增生实验鉴定其生物学活性。结果:成功构建了VEGF165蛋白的原核表达载体,表达纯化了VEGF165蛋白,经过细胞增殖试验及鸡胚尿囊膜血管增生实验,证明该蛋白具有良好的促进血管内皮细胞增殖的生物学活性。结论:成功地获得了人VEGF重组蛋白,并证实了该蛋白具有促进血管内皮细胞增殖活性。
- 陈小波黄锡全张隆马艳春孙健季青康向东
- 关键词：血管内皮细胞生长因子鸡胚尿囊膜血管内皮细胞
