胡源
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 长链非编码RNA AK005183干扰载体构建及慢病毒包装
- 2017年
- 为研究长链非编码RNA AK005183在精子发生中的功能,设计、合成了干扰AK005183表达的shRNA序列,并构建其干扰表达重组慢病毒载体CD513B-U6-AK005183,将干扰表达质粒及对照质粒分别转染NIH3T3细胞系,实时定量PCR检测CD513B-U6-AK005183质粒对AK005183的表达具有较好的干扰效果。利用第三代慢病毒包装系统,将CD513B-U6-AK005183、pGag-Pol、pRsv-rev、pVSV-G质粒共转染293T细胞系,包装得到滴度为5×106 TU/mL的干扰表达重组慢病毒。用CD513B-U6-AK005183慢病毒转导GC-1spg细胞系,检测到AK005183的表达下调64%。表明本研究成功构建并包装得到高效干扰长链非编码RNA AK005183表达的重组慢病毒,将为深入研究长链非编码RNA在精子发生过程中的功能奠定了基础。
- 张晓明安俊辉万一胡源覃金洲曾文先
- 关键词:长链非编码RNA精原干细胞RNA干扰慢病毒
- 长链非编码RNA NEAT1对小鼠精子发生的影响
- 精原干细胞可以通过自我更新维持其数量的相对恒定,同时又能通过定向分化而产生精子,以维持雄性动物的生殖功能。精子发生的整体过程非常复杂,涉及很多基因的时序性表达调控,而长链非编码RNA(long noncoding RNA...
- 胡源
- 关键词:精子发生长链非编码RNARNA干扰慢病毒
- 文献传递
- 长链非编码RNA NEAT1对小鼠精子发生的影响被引量:4
- 2014年
- 为研究长链非编码RNA NEAT1对小鼠精子发生的影响,构建针对NEAT1的干扰载体并包装慢病毒,通过将干扰慢病毒注射到成年小鼠睾丸曲细精管和定量PCR,H.&E.染色等方法观测NEAT1对小鼠精子发生的影响。研究结果表明,NEAT1在睾丸组织和GC-1生殖细胞系中表达;成功构建CD513B-U6-NEAT1干扰载体,利用第三代慢病毒包装系统包装获得干扰慢病毒且干扰效果明显(NEAT1转录本水平下调69%);慢病毒注射试验结果显示干扰病毒注射组睾丸指数轻微增加,有精子发生的曲细精管比例由97%减少为86%(P<0.05),表明小鼠精子发生受到影响,NEAT1具有维持雄性小鼠精子发生的作用。
- 胡源曾文先
- 关键词:精子发生长链非编码RNARNA干扰