赵明晓
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 蜡梅SSR反应体系建立及引物筛选被引量：3
- 2011年
- 以素心蜡梅为材料,分别通过对影响蜡梅SSR扩增效果的模板DNA,dNTP,引物浓度,Taq酶和退火温度等因素的筛选,建立了其适宜的蜡梅SSR分子标记反应体系,同时筛选了适宜蜡梅SSR扩增引物.结果表明,蜡梅SSR扩增的适宜退火温度为55℃,在20μL反应体系中,蜡梅模板DNA质量浓度、dNTP引物浓度分别为5mg·L-1,0.2 mmol·L-1和0.5μmol·L-1,Taq酶和10×Taq酶缓冲液量则为2 U和2.5μL.利用建立的反应体系,从不同木本植物SSR扩增的417对引物中筛选出了适合蜡梅SSR扩增的41对引物.
- 赵明晓范国强
- 关键词：素心蜡梅SSR引物筛选
- 蜡梅AFLP反应体系优化及引物筛选
- 2011年
- 通过对影响AFLP反应体系主要因素的优化,建立了蜡梅的AFLP反应体系,并筛选出了适宜该体系分析的引物.结果表明,20μL蜡梅AFLP最佳酶切体系为模板600 ng DNA,3 U Pst I和3 U Mse I,在37℃下双酶切2 h;在20μL最佳连接体系中酶切产物为15μL,3 U T4连接酶,0.25μmol.L-1 Pst I接头,2.5μmol.L-1 Mse I接头,1μL 10×T4 Buffer,在22℃下连接10 h;在20μL最佳预扩反应体系中稀释10倍的连接产5μL,2.0mmol.L-1 Mg2+,2 U Taq酶,300μmol.L-1dNTP,0.5μmol.L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGA/M+ATC);在20μL最佳选择性扩增反应体系中5μL稀释20倍的预扩增产物,2.0 mmol.L-1的Mg2+,2 U Taq酶,300μmol.L-1 dNTP,0.5μmol.L-1 Pst I和Mse I引物(P+AGA/M+ATC).最后,利用上面的体系筛选出了96对适宜于蜡梅AFLP分析的引物.
- 赵明晓冯志敏胡湛赵振利范国强
- 关键词：蜡梅AFLP引物筛选
- 素心蜡梅体外植株再生及SSR和AFLP反应体系建立
- 蜡梅(Chimonanthus)是中国种群中一种典型的物种，它是中国地方树种，是第三纪孑遗植物。蜡梅在中国种植广泛，灌木，树高2.5-3.0米。在北半球，蜡梅冬令开花，黄冠晶莹，清香四溢，花期从次年12月到第二年1月，尤...
- 赵明晓
- 关键词：素心蜡梅体外植株再生SSR技术AFLP技术
