郑欣
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种重组超抗原SEB突变体,其制备方法及应用
- 本发明公开了一种重组超抗原B型金黄色葡萄球菌肠毒素突变体，还公开了其制备方法及应用。本发明提取来源于天然金黄色葡萄球菌的肠毒素SEB基因组，得到基因组后针对与毒性相关的氨基酸位点进行定点突变，获得本发明的金黄色葡萄球菌肠...
- 姜永强江华郑玉玲谷丽维郑欣王君王燕子
- 文献传递
- 葡萄球菌肠毒素C2突变体的构建及其体外抗肿瘤活性分析
- 2012年
- 目的：利用基因定点突变的方法将葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）的31位定点突变,以获得抑瘤效果增强的肠毒素。方法：利用基因定点突变的方法,将SEC2中31位的His用Asn替代,转入大肠杆菌中诱导表达,采用CM弱阳离子层析柱纯化蛋白,并用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果：构建了突变体蛋白SEC2（H31N）,并在大肠杆菌中实现了高效表达。体外实验表明,在相同浓度下,SEC2（H31N）对多种肿瘤细胞的抑制作用明显优于野生型SEC2,尤其在低浓度下此现象更为明显。对于5个受试细胞株,SEC2（H31N）的IC50均低于SEC2;SEC2（H31N）浓度分别为0.01~10、0.01和0.1 ng/mL时,对肿瘤细胞SMMC-7721、HepG2、A549的生长抑制率与SEC2相比均显著提高。结论：同野生型SEC2相比,突变体蛋白SEC2（H31N）对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。
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- 关键词：超抗原突变体抗肿瘤
- 葡萄球菌肠毒素B突变体的构建及其抗肿瘤活性分析
- 2012年
- 目的:通过对葡萄球菌肠毒素B(SEB)32位His进行定点突变,获得抑瘤效果显著增强的SEB突变体。方法:利用基因定点突变的方法,将SEB的32位His替换为Asn,将重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,用CM弱阳离子层析柱纯化获得重组蛋白,用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,并用增殖实验检测其丝裂原活性,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果:构建并高效表达了突变体蛋白SEB(H32N),纯化获得了足够纯度的突变体蛋白;体外实验表明,在相同浓度下,SEB(H32N)的丝裂原活性及体外抗肿瘤活性明显优于野生型SEB。结论:同野生型SEB相比,突变体蛋白SEB(H32N)对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。
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- 关键词：突变体抗肿瘤
