陈卓莹
- 作品数：6 被引量：0H指数：0
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- 基于Cre-LoxP系统的新型慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P的构建与鉴定
- 2015年
- 目的:基于Cre-Lox P系统构建携带EGFP及Puromycin抗性基因,并带有巨细胞病毒(CMV)及翻译延伸因子1α(EF1α)双启动子的新型慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统.方法:以已经插入Lox P序列的p LOX-TERT-ires TK慢病毒载体为模板,用Spe I与Kpn I进行双酶切,去除TERT-ires TK片段,然后与人工设计合成的多克隆位点片段连接,构建p LOX-MCS表达载体.同时,以p B513载体为模板扩增EF1α-EGFP-Puro表达框(带有Bam HI及Kpn I酶切位点),然后与经过Bam HI及Kpn I双酶切的p LOX-MCS载体连接,进而构建p LOX-CMV-EF1α-EGFP-Puro(简称p LOX-CMV-E/P)载体.将p LOX-CMV-E/P载体与慢病毒包装载体p CMVR8.74及p MD2.G共转染293T细胞,包装病毒进行报告基因的功能分析.结果:菌落聚合酶链式反应(PCR)、酶切鉴定及测序结果均与预期结果一致,绿色荧光蛋白及抗药性基因均有较好的活性与功能.结论:成功构建了p LOX-MCS及p LOX-CMV-E/P慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒表达系统.
- 高文勇夏景波陈卓莹吴彩红王健欢龙颖妍齐绪峰
- 关键词：慢病毒表达载体CRE-LOXP绿色荧光蛋白基因
- 一种成纤维细胞特异性启动子及其应用
- 本发明公开一种成纤维细胞特异性启动子及其应用。本发明以来源于小鼠胚胎成纤维细胞的基因组DNA为模板，以基因FSP1为靶基因，克隆其5′端的启动子区域，其DNA序列如SEQ？ID？NO：1所示。并将其克隆到pMSC-GDL...
- 齐绪峰夏景波徐炯耀陈卓莹蔡冬青刘光辉毛承舟
- 文献传递
- 一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用
- 本发明涉及一种shRNA，特别涉及一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用。编码所述shRNA的DNA序列，如下所示：5’-GGAACTTCACTGGTGCTAAGCGCAAGAGGCTTAGCACCAG...
- 齐绪峰夏景波陈卓莹蔡冬青龙颖妍赵天琪吴彩红王健欢
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- 一种核转录因子突变体rFoxO3a-MTSS及其重组载体与应用
- 本发明公开了一种核转录因子突变体rFoxO3a-MTSS及其重组载体与应用。所述核转录因子突变体rFoxO3a-MTSS是通过将野生型大鼠FoxO3a肽链中第32位苏氨酸、252位丝氨酸、314位丝氨酸同时替换为丙氨酸。...
- 齐绪峰李昀键陈卓莹夏景波蔡冬青龙颖妍赵天琪吴彩红王健欢
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- 一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用
- 本发明涉及一种shRNA，特别涉及一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用。编码所述shRNA的DNA序列，如下所示：5’-GGAACTTCACTGGTGCTAAGCGCAAGAGGCTTAGCACCAG...
- 齐绪峰夏景波陈卓莹蔡冬青龙颖妍赵天琪吴彩红王健欢
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- 慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用
- 本发明公开一种慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用。所述载体在CMV启动子下游插入多克隆位点，能够被SpeI、BclI、EcoRI、PacI、XhoI、SalI及BamHI共7个限制性内切酶所识别。所述载...
- 齐绪峰夏景波陈卓莹蔡冬青吴彩红王健欢毛承舟刘光辉
- 文献传递
