王义伟
- 作品数：31 被引量：16H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用
- 本发明提供用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用，涉及PCV2病毒防治诊断领域。所述融合蛋白，是将抗人红细胞H抗原纳米抗体和抗PCV2纳米抗体通过Linker序列连接而成。本发明还要求保护所述融合蛋白的编码基因，含有...
- 王义伟徐海许梦微侯继波
- 文献传递
- 重组T7噬菌体生物学特性的研究被引量：2
- 2014年
- 以大肠埃希菌BL21为宿主菌研究重组T7噬菌体生物学特性。将构建好的重组T7噬菌体扩增纯化，分析其对PH、温度及离子浓度的敏感性，并将重组噬菌体与宿主菌以不同比例混合测定最佳感染复数并绘制其一步生长曲线。结果表明，重组T7噬菌体的热稳定性较弱，在60℃时20min效价明显下降，在70℃时5min内即会全部失活；PH4～11的范围内重组T7噬菌体均可稳定存在；培养基中Mg件浓度为10mmol／L及Ca2＋浓度为5mmol／L时最有利于噬斑的形成，出斑率提高了约20％；重组噬菌体感染其宿主大肠埃希菌的最佳感染复数为10-5；其一步生长曲线的潜伏期约30min，裂解期约150min，裂解量为126pfu／cell。构建的重组T7噬菌体具有较强的裂解能力，潜伏期短，裂解量大，对理化因素稳定性好，为进一步大规模、高效率制造口蹄疫表位疫苗提供了理论基础。
- 王义伟徐海陈瑾郑其升侯继波
- 关键词：疫苗生物学特性
- 转运真核表达盒的重组T7噬菌体构建被引量：1
- 2015年
- 为了构建转运真核表达盒的重组T7噬菌体,并分别在体外、体内条件下检测其标签蛋白质EGFP的表达。以T7噬菌体基因组左侧578 bp处为插入位点,取上游400 bp和下游200 bp片段作为左右同源臂,并在其中插入表达EGFP基因的真核表达盒(EEB),构建同源重组质粒p UC-L-EEB-R。将该质粒载体转化T7噬菌体宿主细菌BL21,在噬菌体繁殖过程中完成同源重组,PCR筛选重组T7-EEB噬菌体。提取该重组噬菌体基因组转染Vero细胞后体外检测EGFP蛋白质表达,纯化的噬菌体免疫小鼠后体内检测EGFP蛋白质表达。结果显示,通过同源重组方法成功构建了携带真核表达盒的重组T7噬菌体,PCR检测和酶切鉴定均证明表达盒已正确插入。T7-EEB基因组转染真核细胞可见明显的EGFP蛋白质表达,免疫小鼠后活体荧光检测到EGFP蛋白质信号,在小鼠肝脏、脾脏组织中RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA转录。表明同源重组方法可以用于构建重组T7噬菌体,噬菌体能够转运真核表达盒并实现蛋白质表达。
- 徐海鲍熹王义伟卢宇许梦薇侯继波
- 关键词：同源重组DNA疫苗真核表达
- 猪流行性腹泻病毒高效亚单位疫苗
- 本发明提供猪流行性腹泻病毒高效亚单位疫苗，涉及生物疫苗制造领域。该亚单位疫苗，采用如下方法制备（1）将聚赖氨酸水溶液与鞭毛蛋白水溶液混合，搅拌5‑10h，冻干后得到免疫增强剂纳米颗粒冻干粉；所述鞭毛蛋白的氨基酸序列如SE...
- 侯立婷陈瑾于晓明郑其升杜露平程海卫乔绪稳秦竹王义伟侯继波杨利张元鹏李兰张浩明
- 一种免疫增强剂、口蹄疫灭活疫苗及其制备方法
- 本发明公开一种复方免疫增强剂及其应用。本发明涉及复方免疫增强剂的配制及其在猪口蹄疫疫苗中的应用。本发明以猪口蹄疫疫苗为研究主体，在此基础上，选择几种有明显免疫增强作用的免疫增强剂用于复方免疫增强剂，将抗原/疫苗和免疫增强...
- 陈瑾于晓明郑其升侯立婷王义伟张元鹏乔绪稳侯继波
- 文献传递
- 用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用
- 本发明提供用于检测PCV2的融合蛋白、制备方法及应用，涉及PCV2病毒防治诊断领域。所述融合蛋白，是将抗人红细胞H抗原纳米抗体和抗PCV2纳米抗体通过Linker序列连接而成。本发明还要求保护所述融合蛋白的编码基因，含有...
- 王义伟徐海许梦微侯继波
- 文献传递
- 一种含皂苷的脂质纳米颗粒的制备方法及其应用
- 本发明提供一种含皂苷的脂质纳米颗粒的制备方法及其应用，属于免疫制剂技术领域。该方法包括：配制含有纳米稳定剂的皂苷溶液，含有140‑160ml/L的甘油单月桂酸酯、12‑17g/L的海藻糖、23‑27g/L的TPGS和28...
- 王义伟张元鹏程海卫于晓明陈瑾郑其升
- 基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用
- 本发明公开基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用，所述双功能纳米抗体是以接头元件将基于DC细胞的目的蛋白特异性纳米抗体和编码粒径为150nm以下的病毒抗原特异性纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段并重组表达获得的...
- 程海卫侯立婷杜露平于晓明乔绪稳张元鹏李兰王义伟张浩明秦竹杨利陈瑾郑其升侯继波
- 一种制备聚肌胞的方法
- 本发明提供一种制备聚肌胞的方法，涉及生物技术领域，具体涉及一种制备聚肌胞的方法。该制备聚肌胞的方法，包括如下步骤：（1）分别合成聚肌苷酸Poly I和聚胞苷酸尿苷酸Poly C<Sub>n</Sub>U，所述Poly C...
- 王义伟郑其升许梦微侯继波
- 猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列测定与对比分析被引量：3
- 2017年
- 为了分析猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列特征,本研究设计了17对特异性引物,通过PCR扩增AH02LA株的11个糖蛋白基因并进行序列测定,然后将其与PRV变异株(TJ株与HeN1株)和PRV经典株(Bartha株与Kaplan株)作比对分析。结果:成功扩增了11个糖蛋白基因序列,序列比对发现,AH02LA株的gB、gD、gG、gK和gM基因与PRV变异株的同源性为100%,而与PRV经典株的同源性为98%~99%;AH02LA株的gC、gE和gI基因与PRV变异株的同源性为99%,而与经典株的同源性为95%~97%,而且AH02LA株的gB、gC、gD、gE、gI和gN基因的插入或缺失也与变异株完全一致。研究表明,AH02LA株的主要糖蛋白基因序列与变异株高度同源,该毒株是一株典型的变异株。
- 许梦微王义伟乔永峰王志胜刘娅梅侯继波王继春
- 关键词：伪狂犬病毒变异株糖蛋白
