韩佳琪
- 作品数:6 被引量:37H指数:2
- 供职机构:中国人民解放军第三〇二医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金首都医学发展科研基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 慢性乙肝患者石蜡包埋肝组织中HBV cccDNA定量检测方法的建立被引量:5
- 2011年
- 目的建立慢性乙肝患者微量石蜡包埋肝组织共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)定量检测方法。方法以37例慢性乙肝患者甲醛固定石蜡包埋肝组织为研究对象,提取肝组织HBV DNA,经不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)消化后,利用滚环扩增加跨缺口实时荧光PCR扩增技术检测肝组织中HBV cccDNA含量,以β-actin为内参照。通过已知浓度的模板DNA进行梯度稀释鉴定该方法的灵敏度,并对该方法进行批内和批间重复性检测。应用该方法分析37例慢性乙肝患者肝组织HBV cccDNA与血清总HBV DNA、肝组织总HBV DNA的关系,以及肝组织HBV cccDNA和HBV DNA与血清HBeAg表达之间的关系。结果成功建立了微量石蜡包埋肝组织HBV cccDNA的定量检测方法,该方法具有较好的特异性、灵敏度和稳定性。HBeAg阳性者肝组织中cccDNA含量明显高于HBeAg阴性者,HBV cccDNA水平与血清总HBV DNA水平(R2=0.48,P=0.042)及肝组织总HBV DNA水平(R2=0.63,P=0.001)呈正相关。结论该方法可特异灵敏地定量检测微量石蜡包埋组织切片中的HBV cccDNA。
- 韩佳琪钟彦伟任晓强邹正升刘树红刘学恩赵景民徐东平
- 关键词:乙型核酸扩增技术
- 检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒cccDNA的试剂盒
- 石蜡包埋肝组织的乙型肝炎病毒cccDNA定量检测试剂盒,特征是对肝组织进行石蜡包埋,然后将从中提取的总DNA分别加入HBV滚环引物和跨缺口引物,进行滚环加跨缺口荧光定量扩增。本试剂盒不需要新鲜肝组织作为检测样本,检测特异...
- 钟彦伟徐东平韩佳琪赵景民邹正升苏何玲任晓强刘树红
- 文献传递
- 滚环扩增加跨缺口荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒cccDNA试剂盒
- 本发明涉及一种乙型肝炎病毒cccDNA定量检测的方法,采用滚环扩增加跨缺口实时荧光PCR技术检测cccDNA的方法定量检测乙型肝炎病毒cccDNA,并以此方法开发了一种新型的检测试剂盒。本发明可同时提高检测反应特异性和灵...
- 钟彦伟徐东平韩佳琪赵景民苏何玲邹正升任晓强刘树红
- 文献传递
- 54例慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与血清HBsAg定量检测结果分析被引量:35
- 2011年
- 目的检测慢性乙型肝炎患者肝组织HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)和血清HBsAg,分析两种定量指标之间及其与血清HBVDNA载量的相关性。方法应用PSAD消化+滚环扩增+跨缺口实时荧光PCR方法,定量检测54例慢性乙型肝炎患者甲醛固定石蜡包埋肝组织HBVcccDNA水平;用化学发光试剂定量检测患者血清HBsAg。用Pearson检验及直线回归分析方法对数据进行分析。结果患者肝组织HBVcccDNA与血清HBsAg定量水平之间呈正相关(r=0.459,P〈0.01),但与血清HBVDNA载量相关性无统计学意义;血清HBsAg定量水平与血清HBVDNA载量呈正相关(r=0.328,P〈0.05),与病毒复制效率呈负相关(r=-0.373,P〈0.05)。结论慢性乙型肝炎患者肝组织HBVcccDNA载量与血清HBsAg定量水平相关,结合血清HBVDNA定量检测,可以更全面的反映HBV的复制水平,评价抗病毒疗效。
- 李韦杰李伯安赵景民韩佳琪刘妍江玲毛远丽鲁凤民徐东平
- 关键词:肝炎病毒共价闭合环状DNA肝炎抗原乙型
- 检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒cccDNA的试剂盒
- 石蜡包埋肝组织的乙型肝炎病毒cccDNA定量检测试剂盒,特征是对肝组织进行石蜡包埋,然后将从中提取的总DNA分别加入HBV滚环引物和跨缺口引物,进行滚环加跨缺口荧光定量扩增。本试剂盒不需要新鲜肝组织作为检测样本,检测特异...
- 钟彦伟徐东平韩佳琪任晓强
- 滚环扩增加跨缺口荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒cccDNA试剂盒
- 本发明涉及一种乙型肝炎病毒cccDNA定量检测的方法,采用滚环扩增加跨缺口实时荧光PCR技术检测cccDNA的方法定量检测乙型肝炎病毒cccDNA,并以此方法开发了一种新型的检测试剂盒。本发明可同时提高检测反应特异性和灵...
- 钟彦伟徐东平韩佳琪苏何玲任晓强