刘晶
- 作品数:7 被引量:10H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院卫生学环境医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 雌二醇完全抗原及多克隆抗体的制备被引量:5
- 2012年
- 目的改造雌二醇半抗原,合成雌二醇完全抗原,并经免疫家兔得到抗雌二醇多克隆抗体,为建立雌二醇的酶联免疫吸附方法及其在动物性食品安全快速检测中的应用奠定基础。方法改造雌二醇-3-羧甲基醚(E2-3-CME),碳二亚胺(EDC)法合成免疫原(E2-BSA)和包被原(E2-OVA),采用SDS-PAGE电泳和质谱(MS)对其鉴定,免疫家兔2只,制备多克隆抗体;间接ELISA测定效价、灵敏度和特异性。结果成功合成雌二醇免疫原和包被原,6次免疫后E2-T1和E2-T2抗血清的效价分别达到1∶128 000和1∶32 000,E2-T1抗体和E2-T2抗体的半数抑制浓度(IC50)分别为44.00 ng/ml和45.59 ng/ml,与雌二醇类似物没有明显交叉反应。结论合成的雌二醇完全抗原具有较好的免疫原性,产生的抗雌二醇多克隆抗体具有较好的特异性。
- 陈翠翠刘建青吕志强周彩虹刘晶柳明宁保安高志贤
- 关键词:雌二醇
- 肺癌细胞系中肿瘤干细胞的分离鉴定与功能分析被引量:1
- 2010年
- 背景:肿瘤干细胞在体外扩增和培养过程中如何保持其干细胞的特性成为肿瘤干细胞研究的重要障碍,从可长期稳定保存的细胞系中分离获得肿瘤干细胞可能成为肿瘤干细胞研究的可靠途径。目的:探讨遗传背景相似、转移特性不同的肺癌细胞中肿瘤干细胞的存在与否及其功能。方法:观察PLA-801D和PLA-801C细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用,以考察两株细胞的转移潜能;观察PLA-801D和PLA-801C细胞形成单细胞克隆的种类及每种细胞克隆的亚克隆种类和性能,判断两株细胞中是否存在肿瘤干细胞;采用胶原收缩实验考察两株细胞的生物力学重塑能力,即对细胞外基质的重塑能力。结果与结论:PLA-801D细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用均明显强于PLA-801C细胞(P<0.01)。PLA-801D可产生4种单细胞克隆,其中1种在传单细胞亚克隆后仍可形成如上4种克隆,而PLA-801C细胞中未发现有完全分化能力的细胞克隆。PLA-801D细胞的生物力学重塑能力也明显高于PLA-801C细胞(P<0.05)。结果证实具有高转移潜能的PLA-801D细胞中含有一小群具有自我更新和分化能力的肿瘤干细胞,且该细胞株的生物力学重塑性较好,提示该细胞株对细胞外基质的重塑性能较强。
- 吴婕刘晶王秀冬朱凌云吴祖泽于爱平
- 关键词:肿瘤干细胞肿瘤细胞系
- 凝血酶促进肺癌Glc-82移植瘤的发展及其机制探讨被引量:1
- 2010年
- 目的探讨凝血酶在体内促进肺癌Glc-82移植瘤的发展及其作用机制。方法细胞黏附试验和细胞迁移试验观察凝血酶对Glc-82细胞黏附特性和转移特性的影响,裸鼠移植瘤实验观察凝血酶对Glc-82移植瘤荷瘤小鼠体质量、瘤质量、肺结节及生存期的影响,Western印迹法观察凝血酶对移植瘤组织细胞外信号调节激酶(ERK)、黏着斑激酶(FAK)和抑癌蛋白PTEN(10号染色体上检出的磷酸酶和张力蛋白同源蛋白)的影响。结果凝血酶在体外显著促进Glc-82细胞的黏附和迁移;在体内,凝血酶可降低荷瘤小鼠的体质量、增加瘤质量占体质量比、部分凝血酶组小鼠肺转移增多、荷瘤小鼠的生存时间缩短;Western印迹结果显示,凝血酶可促进肿瘤组织ERK的激活,促进FAK的表达,并且抑制抑癌基因PTEN的表达。结论凝血酶促进肺癌Glc-82移植瘤的恶性进展,可能与促进肿瘤细胞的黏附和迁移特性,促进肿瘤组织ERK、FAK的激活及表达有关,并可能通过抑制抑癌蛋白PTEN的表达而发挥作用。
- 吴婕刘晶朱凌云王秀冬张光满吴祖泽于爱平
- 关键词:凝血酶黏着斑激酶
- 己烯雌酚阳离子牛血清白蛋白免疫原的合成及鉴定被引量:2
- 2011年
- 目的合成阳离子牛血清白蛋白(cBSA),制备多克隆抗体,为动物性食品安全快速检测提供技术支持。方法合成免疫原(DES-HS-BSA和DES-HS-cBSA),采用SDS-PAGE电泳和质谱法对其鉴定,Bradford试剂盒对其定量,经动物免疫制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价和抗体灵敏度。结果成功合成己烯雌酚免疫原,4次免疫后,DES-HS-cBSA组小鼠血清中针对DES-HS的抗体效价(1∶12 000)明显高于DES-HS-BSA组小鼠(1∶4000)。结论 cBSA能增加与小分子结合时的偶联比,作为免疫原的载体蛋白能明显提高抗体效价。
- 刘晶宁保安柳明冯屹王彩红陈翠翠吕志强高志贤
- 关键词:己烯雌酚
- 毒死蜱半抗原、毒死蜱完全抗原及其制备方法
- 本发明公开了一种毒死蜱半抗原、毒死蜱完全抗原及其制备方法,属于生物化工技术领域,本发明首先合成毒死蜱的羧基化产物,经核磁氢谱、ESI鉴定并纯化后,利用EDC法与载体蛋白BSA进行偶联,经MOLDI-TOF鉴定成功合成了毒...
- 高志贤宁保安彭媛刘晶孙思明柳明白家磊张亦红
- 文献传递
- 己烯雌酚的同源与异源ELISA检测方法的建立
- “民以食为天,食以安为先”,食品安全是关系到人民健康和国计民生的重大问题。而其中的农兽药残留检测又是重中之重。本研究以己烯雌酚为靶标物,制备了己烯雌酚多克隆抗体并建立了针对己烯雌酚的同源异源ELISA检测方法。己烯雌酚是...
- 刘晶
- 关键词:己烯雌酚同源异源ELISA
- 文献传递
- 对硫磷完全抗原的合成鉴定及其免疫效果
- 2013年
- 目的合成免疫原性较强的人工抗原,为制备对硫磷单克隆抗体和建立免疫快速检测食品中农药残留方法奠定基础。方法选用2种方法合成羧基化对硫磷:一种以对硫磷为原料,改造硝基一端;另一种以三氯硫磷为原料,改造磷硫键一端。EDC法偶联牛血清白蛋白(BSA)制备免疫原(PA-1-BSA和PA-2-BSA),并分别免疫Balb/c小鼠。间接ELISA测定抗血清效价,竞争ELISA测定检测灵敏度,比较免疫效果。结果 SDS-PAGE电泳表明,2种完全抗原均合成成功;质谱法鉴定免疫原的偶联比分别为:N(PA-1/BSA)=7.2,N(PA-2/BSA)=15.4;小鼠抗血清经间接ELISA检测表明,PA-2-BSA组效价明显高于PA-1-BSA组;间接竞争ELISA检测表明,PA-2-BSA组半数抑制浓度(IC50)为1μg/ml,明显优于PA-1-BSA组(IC50为>100μg/ml)。结论成功合成2种对硫磷完全抗原,免疫Balb/c小鼠PA-2-BSA组免疫应答效果好于PA-1-BSA组。
- 吕志强陈翠翠宁保安柳明王莹肖超刘晶高志贤
- 关键词:对硫磷免疫效果