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肺炎嗜衣原体AlphaLISA检测方法研究: 本研究旨在前期肺炎肺炎嗜衣原体流行病学研究的基础上，进一步深入分析肺炎嗜衣原体外膜主蛋白的抗原表位分布，通过基因工程方法表达、纯化特异性重组抗原，免疫动物，制备多克隆抗体和单克隆抗体，建立特异性强、灵敏度高的肺炎嗜衣原体...; 张存亮; 关键词：衣原体单克隆抗体肺炎; 文献传递

肺炎嗜衣原体MOMP基因的克隆与原核表达: 2014年; 克隆了肺炎嗜衣原体外膜主蛋白(major out membrane protein,MOMP)基因,并进行了原核表达。根据GenBank公布的肺炎嗜衣原体MOMP基因序列,设计克隆引物后用普通PCR方法扩增出肺炎嗜衣原体MOMP基因的完整片段,将其克隆到pMD-19T后进行测序,经序列比对正确后将此片段亚克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达,再采用SDS-PAGE和Western-Blot检测重组蛋白的表达情况。结果表明:本研究克隆了肺炎嗜衣原体MOMP基因并在原核系统中成功表达了MOMP重组蛋白,且WesternBlot显示该重组蛋白具有免疫学活性。; 张存亮聂福平王昱杨俊李应国蔡家利; 关键词：肺炎嗜衣原体克隆原核表达

均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展被引量：3: 2014年; 均相光激化学发光免疫分析技术是一种基于纳米微珠的化学发光的新型技术,其具有更高的敏感度、均一性、背景低,且不用洗涤及样本需求量少等特点。该技术可用于生物标志物、激酶及抗原抗体的检测,蛋白:蛋白相互作用的检测,高通量分析的研究及疾病诊断等方面。优化和发展均相光激化学发光免疫分析技术将会在更多研究领域中得到应用。; 张存亮聂福平王昱杨俊李应国蔡家利

重组猪IFNα的构建及原核可溶性表达研究被引量：2: 2013年; 使用原核表达系统可溶性表达猪α-干扰素,并进行纯化和鉴定。根据Gene Bank中报道的猪α-干扰素成熟肽基因序列设计引物,以猪肝脏细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增猪α-干扰素成熟肽基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET32a+中,转化大肠杆菌DH5a。阳性克隆经PCR鉴定、双酶切鉴定以及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE分析、镍柱亲和层析纯化、Western-blot鉴定。结果表明:成功构建了猪α-干扰素原核表达载体pET32a+-poIFN-α;表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约3.8×104的位置出现了目的蛋白条带,与预期相符;Western-blot鉴定显示有特异性条带出现。实现了重组猪α-干扰素的可溶性表达,获得了纯度较高的重组猪α-干扰素,为进一步研究其药物作用奠定了基础。; 蔡家利户国达孙加燕尹忠宝张存亮陈文毫; 关键词：基因工程药物生物药物兽药

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张存亮