芦现杰 作品数:10 被引量:44 H指数:4 供职机构: 聊城市人民医院 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 山东省中医药科技发展计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
一种用于制备人体多巴胺神经元的试剂盒及其应用 本发明公开了一种用于制备人体多巴胺神经元的试剂盒及其应用,属于生物制药领域,试剂盒包括:成纤维细胞高效分离培养液、化学修饰mRNA、诱导培养液、小分子化合物诱导组合1、促进成熟存活的诱导组合2,并提供了所述试剂盒在将帕金... 韩发彬 芦现杰 刘延明 王伟 宋娜 王学翔文献传递 补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗肾阳虚血瘀型卵巢早衰的临床研究 被引量:8 2019年 目的探讨补肾祛瘀方联合克龄蒙对肾阳虚血瘀型卵巢早衰(POF)患者中医证候、性激素及卵巢体积的影响。方法将60例肾阳虚血瘀型卵巢早衰患者按随机数字表法分为对照组(克龄蒙治疗)和观察组(补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗),比较两组临床疗效及安全性。结果观察组总有效率显著高于对照组(P <0. 05);观察组治疗后中医证候积分、促卵泡激素(FSH)及促黄体生成素(LH)水平明显低于对照组(P <0. 05);雌二醇(E2)水平、子宫内膜厚度明显高于对照组(P <0. 05);两组卵巢体积和不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论补肾祛瘀方联合克龄蒙治疗肾阳虚血瘀型卵巢早衰能够改善临床症状,调节性激素水平,增加子宫内膜厚度,促进月经来潮,具有临床推广价值。 焦存 芦现杰关键词:补肾药 活血祛瘀药 复方合剂 卵巢功能早衰 肾阳虚 人皮肤成纤维细胞和脐带间充质干细胞分泌蛋白差异比较研究 2020年 该文探讨人皮肤成纤维细胞(NCF)和脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)分泌蛋白的差异,从而初步阐明脐带间充质干细胞分泌蛋白对于治疗退行性疾病的可能分子机理。基于串联质谱(LC-MS/MS)的方法,收集用无血清培养基培养48 h的NCF和hUC-MSCs上清样品,进行TMT(tandem mass tags for relative and absolute quantitation)检测,从而对蛋白质酶解之后的肽段进行同位素标记,之后对分泌蛋白的表达差异进行精确的鉴定和定量。通过生物信息学分析,建立NCF和hUC-MSCs分泌蛋白谱图,并通过GO(gene ontology)对这些分泌蛋白进行功能分析,对于在蛋白分子互作图中处于中心位置的CCL2、COL4A1、TGFβ1、SERPINE1、SEMA7A我们进行了Real-time PCR定量分析。通过TMT以及生物信息学分析,该文鉴定出1000多种共有蛋白,其中有704种蛋白在hUC-MSCs中的表达量比NCF中高。通过Real-time PCR,我们证实了CCL2、COL4A1在hUC-MSCs中的分泌量的确高于其在NCF中的分泌量,且差异具有显著性。通过检索文献以及Uniprot的相应数据库数据,该文发现,这两种分子在炎症的消除方面起到十分重要的作用,而炎症反应在帕金森病等退行性疾病的发生与发展过程中起到重要作用。通过对NCF和hUC-MSCs培养基中分泌的蛋白进行检测分析,该研究为探讨脐带间充质干细胞分泌蛋白治疗神经退行性疾病的可能分子机制提供启示。 段婧 王琰 王伟 芦现杰 刘延明 王晓兵 庞保军 韩发彬关键词:人皮肤成纤维细胞 脐带间充质干细胞 分泌蛋白 左归丸靶向C-X-C趋化因子受体4对人脐带间充质干细胞体外迁移的影响 被引量:2 2023年 目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwell实验分析左归丸对hUC-MSCs体外迁移的影响,实时聚合酶链反应(PCR)、蛋白印迹法和流式细胞术分析hUC-MSCs中CXCR4表达变化。结果:流式细胞术结果显示,hUC-MSCs表面高表达CD73和CD90,极低表达CD34和CD45。CCK-8结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸均能明显促进hUC-MSCs增殖(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸能明显促进hUC-MSCs迁移,最佳浓度为0.2 mg/mL,CXCR4拮抗剂普乐沙福则能抑制其促迁移作用(P<0.05)。实时PCR、蛋白印迹法和流式细胞术结果显示,左归丸能上调hUC-MSCs中CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,并促进CXCR4蛋白在细胞膜表达(P<0.05)。结论:左归丸通过上调CXCR4表达促进hUC-MSCs的体外迁移。 焦存 杨丽晓 张艳 王哲 李亦晗 芦现杰关键词:左归丸 人脐带间充质干细胞 卵巢早衰 大蒜素抗妇科恶性肿瘤机制的研究进展 被引量:10 2019年 常见的妇科恶性肿瘤如宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌和乳腺癌,发病率呈现逐年上升的趋势,严重危害女性的健康。妇科恶性肿瘤属中医学“癥瘕”范畴,就辨证而论有明显的共同性,即正虚、邪实,是全身属虚、局部属实[1]。传统的手术、放疗和化疗虽然能够延长妇科恶性肿瘤患者的生存时间并提高患者的生存质量[2],但是极易损伤人体正气,导致气血不足、阴阳失调,而出现毒副反应或并发症。另外,肿瘤细胞耐药性也是妇科肿瘤复发和预后差的重要原因[3]。因此寻找疗效确切、毒副作用少的药物成为研究热点。大蒜素(allicin)是百合科葱属草本植物的地下鳞茎大蒜中的主要有效成分,化学名为二烯丙基三硫化物(diallyl trisulfide,DATS),其结构式为CH 2=CH-CH 2-S-S-S-CH 2-CH=CH 2。 焦存 芦现杰 谷万里关键词:大蒜素 妇科恶性肿瘤 细胞凋亡 基于转录组学分析左归丸治疗环磷酰胺诱导卵巢早衰大鼠的分子机制 被引量:1 2023年 目的 探讨左归丸对环磷酰胺诱导的卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)大鼠的治疗作用,通过转录组测序(RNA-seq)技术分析其分子机制。方法 腹腔注射环磷酰胺复制卵巢早衰大鼠模型。15只大鼠随机分为对照组、模型组和左归丸组。对照组及模型组给予生理盐水灌胃,左归丸组给予2 g·kg^(-1)·d^(-1)左归丸灌胃,连续灌胃4周。ELISA检测各组血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))和抗缪勒管激素(AMH)水平,比较各组卵巢湿质量。利用RNA-seq技术检测各组卵巢组织中基因表达谱,筛选目标差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),对DEGs进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)分析。结果 与对照组比较,模型组FSH水平升高(P<0.05),E_(2)和AMH水平下降(P<0.05),卵巢湿质量降低(P<0.05);与模型组比较,左归丸组FSH水平下降(P<0.05),AMH水平升高(P<0.05),E_(2)水平和卵巢湿质量的差异无统计学意义(P>0.05)。RNA-seq结果显示,模型组与对照组DEGs 562个,左归丸组与模型组DEGs 393个,左归丸组逆转模型组DEGs 64个。GO富集分析到370个条目,其中生物过程284条,细胞组分40条,分子功能46条。KEGG富集分析主要在卵巢类固醇合成、催乳素信号通路和PPAR信号通路。PPI分析显示,核心基因为EphA5、Acta1、Ros1、Aldh1a1、Cdh1和Cyp19a1。结论 左归丸能够有效改善环磷酰胺诱导卵巢早衰大鼠的血清性激素水平,其分子机制可能与调控类固醇激素合成相关通路及基因有关。 焦存 芦现杰 张梅红 谷万里关键词:左归丸 卵巢早衰 转录组测序 环磷酰胺 分子机制 差异表达基因 左归丸加减方联合激素治疗卵巢早衰的Meta分析 被引量:11 2019年 目的系统评价左归丸加减方联合激素治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法计算机检索中英文各数据库,检索时间为各数据库建库至2018年6月,纳入左归丸加减方联合激素治疗POF的随机对照研究(RCT),对纳入文献进行方法学质量评价,采用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析。结果共纳入11个RCT,包括1 004例POF患者。Meta分析结果显示:左归丸加减方联合激素治疗POF在总有效率(OR=4. 44,95%CI:3. 10~6. 36,P <0. 000 01),中医证候(头晕、耳鸣、潮热盗汗、五心烦热、腰膝酸软),血清卵泡刺激素(FSH)水平(SMD=0. 54,95%CI:0. 13~0. 95,P=0. 01),黄体生成素(LH)水平(SMD=0. 90,95%CI:0. 45~1. 36,P <0. 000 1),雌二醇(E_2)水平(SMD=1. 26,95%CI:0. 12~2. 40,P=0. 03),子宫内膜厚度(WMD=2. 03,95%CI:0. 07~3. 99,P=0. 04)改善和不良反应发生率(OR=0. 34,95%CI:0. 12~0. 95,P=0. 04)方面均优于单纯激素治疗。结论左归丸加减方联合激素治疗POF的疗效及安全性均优于单纯激素治疗。 焦存 芦现杰关键词:左归丸 激素替代疗法 META分析 脐带血单个核细胞对大鼠帕金森病的治疗效果观察 被引量:4 2017年 目的探讨人体脐带血单个核细胞(HUCB-MNC)对大鼠帕金森病(PD)的治疗效果和作用机制。方法 6-OHDA诱导产生大鼠PD模型,随机分为两组,一组移植从新生儿脐带血中分离HUCB-MNC细胞,另一组移植PBS作为对照,根据运动转圈数和转棒实验评估大鼠在细胞移植后不同时间的运动行为情况,移植16周后取出大脑进行冰冻切片,免疫荧光染色确定移植的细胞分化情况。动物行为采用Two-way ANOVA统计方法分析。结果转圈实验显示,PD大鼠移植HUCB-MNC细胞4、8、12、16周后,注射阿朴吗啡产生的转圈比率分别为0.529±0.121、0.457±0.096、0.369±0.089、0.264±0.091,而对照组4、8、12、16周转圈比率分别为0.843±0.158、0.812±0.156、0.736±0.103、0.714±0.160,与对照组相比,移植细胞组转圈数明显减少,差异有统计学意义(t=4.377,5.561,6.835,6.071,P均<0.01);转棒实验显示,移植细胞大鼠在4、8、12、16周棒上持续时间分别为(46.333±2.082)s、(63.667±4.041)s、(76.667±7.638)s、(126±12.166)s,而对照组相应周数棒上持续时间分别为(29.250±5.560)s、(26.750±8.655)s、(34.250±10.905)s、(47.500±6.856)s,与对照组相比,移植细胞组棒上持续时间明显延长,差异有统计学意义(t=4.966,6.189,5.707,10.990,P均<0.01)。通过用人特异性细胞核抗体HNuc,神经细胞标志物Tuj1,和多巴胺神经元抗体TH染色,发现移植物HNuc、Tuj1、TH染色阳性。结论 HUCB-MNC细胞可以分化为神经元和多巴胺神经元,减少PD大鼠阿朴吗啡诱导的转圈数,延长大鼠在转棒上的持续时间,改善PD大鼠模型的运动缺陷。 陈超 段婧 申爱芳 王伟 宋昊 芦现杰 王晓兵 韩忠朝 韩发彬关键词:脐血干细胞移植 单核细胞 帕金森病 细胞分化 干细胞移植治疗帕金森病远期效果的关键技术 韩发彬 王伟 芦现杰 陈超 张男 章阳 宋昊 段婧 吴士超 宋娜 陈保兴 该课题属于医学领域内科与预防医学。 帕金森病(PD)是严重影响中国老年人的身体健康和生活能力的疾病之一。虽然用多巴胺替代治疗能暂时缓解PD的早期症状,但不能阻止PD病程发展,这一病症仍无法根治。因此研究PD疾病的发病机制...关键词:关键词:帕金森病 干细胞移植治疗 神经系统疾病治疗 坤泰胶囊治疗卵巢早衰的Meta分析 被引量:8 2021年 目的:系统评价坤泰胶囊治疗卵巢早衰(POF)的有效性和安全性。方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、Medline、中国期刊全文数据库、万方医学数据库、中文科技期刊数据库和SinoMed数据库,检索时限为建库至2019年12月,纳入坤泰胶囊治疗POF的随机对照试验(RCTs),对纳入文献进行质量评价,并采用RevMan 5.3软件进行数据分析。结果:共纳入8项RCTs,包括659例患者。Meta分析结果显示,观察组(坤泰胶囊治疗)与对照组(激素治疗)比较,在总有效率,血清卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌激素(E_2)水平改善方面,差异无统计学意义(P>0.05);观察组不良反应发生率低于对照组(RR=0.25,95%Cl为0.15~0.42,P<0.000 01)。结论:坤泰胶囊治疗POF的临床疗效与激素治疗相当,安全性优于激素治疗。 焦存 芦现杰 尹俊艳 张梅红 谷万里关键词:卵巢早衰 坤泰胶囊 激素替代疗法 META分析 循证医学