高小莉
- 作品数:18 被引量:57H指数:4
- 供职机构:甘肃农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪miR-204组织表达与重要靶基因筛选被引量:6
- 2020年
- 基于Illumina Hiseq 4000高通量测序技术筛选得到仔猪感染C型产气荚膜梭菌耐受和易感组中显著上调表达的miR-204。为研究miR-204在各组织中的表达,进一步筛选miR-204参与调控仔猪C型产气荚膜梭菌感染的关键靶基因,采用实时荧光定量PCR方法检测了miR-204在7日龄仔猪各组织中的表达,利用MEGA7.0软件对其成熟体序列保守性进行分析,运用TargetScan、miRDB、PicTar软件进行靶基因预测,并用DAVID软件对靶基因进行Gene Ontology和KEGG Pathway通路富集分析,进一步采用qRT-PCR方法对筛选得到的关键靶基因在猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中进行靶向关系验证。结果表明,miR-204在7日龄仔猪肾脏、肝脏、胸腺、淋巴、十二指肠和回肠组织中均高度表达,其成熟体序列在脊椎动物间高度保守。3种软件预测到的共同靶基因有114个,这些靶基因显著(P<0.05)富集在15个GO功能和13个信号通路。结合前期得到的抗性基因,筛选到4个关键靶基因NR3C1、SIRT1、BCL2L2和DLG5,转染miR-204 mimics后,靶基因SIRT1、BCL2L2和DLG5极显著(P<0.01)下调表达。miR-204是参与调控仔猪抵抗C型产气荚膜梭菌感染的重要因子,SIRT1、BCL2L2和DLG5可能是miR-204的关键靶基因,其功能还需进一步验证。
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- 关键词:靶基因产气荚膜梭菌
- 新生仔猪C性产气荚膜梭菌性腹泻的研究进展被引量:4
- 2018年
- C型产气荚膜梭菌是引起仔猪腹泻的主要细菌性病原菌之一,主要感染7日龄以内的新生仔猪,该菌通过接触感染,引起坏死性肠炎、仔猪腹泻等疾病,影响发病仔猪的生长发育,甚至导致仔猪死亡.近几年C型产气荚膜梭菌的危害日益严重,每年因产气荚膜梭菌感染导致许多动物患病和死亡,给我国乃至世界养猪业带来严重的经济损失.本文主要从C型产气荚膜梭菌的毒素类型、致病机制、防治措施及调控机制等方面就仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻的研究进展进行了综述,以期为将来深入开展相关研究提供参考.
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- 关键词:仔猪C型产气荚膜梭菌致病机制
- 细胞自噬及其在动物繁殖领域的研究进展
- 2024年
- 细胞自噬是真核生物为保护机体免受外界环境刺激以降解自身亚细胞器及受损蛋白质为机体供能的过程,在精子生成、生殖激素(例如睾酮、孕酮等)合成、卵泡发育等方面起重要调控作用,受国内外研究者的关注。目前,研究人员利用形态学染色、分子标记等方法研究细胞自噬。文章对细胞自噬的发展、检测方法、作用及在动物繁殖领域的研究进展进行综述,旨在为深入研究动物繁殖领域中细胞自噬的调控机制提供参考。
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- 关键词:细胞自噬代谢繁殖睾酮卵母细胞
- 猪KCNJ13基因编码蛋白生物信息学分析
- 2020年
- 目的:本研究旨在对猪KCNJ13基因序列及其编码的蛋白结构和功能进行预测分析。方法:通过用生物信息学软件对猪KCNJ13基因序列特征、氨基酸同源性、亚细胞定位、二级结构、蛋白保守结构域、跨膜结构域进行预测分析。结果表明:猪KCNJ13基因序列中存在1 083 bp的开放阅读框,编码360个氨基酸,与人、犬、海豚、黑猩猩、马的亲缘关系较近;该基因编码的蛋白为跨膜蛋白,结构较稳定,分子量为40 455.60,理论等电点为5.76;二级结构以无规卷曲为主,主要定位于线粒体和内质网。结论:上述结果推断该蛋白具有重要生物学意义,该研究可为进一步揭示猪KCNJ13基因生物学功能奠定基础。
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- 关键词:生物信息学
- 低温对合作猪脂肪组织形态、脂代谢相关基因表达和酶活性及AMPK/PGC-1α通路的影响
- 2024年
- 旨在探究低温对合作猪脂肪组织形态、脂代谢相关基因表达和酶活性及AMPK/PGC-1α通路的影响。本研究选择75日龄体重相近、健康状况良好的合作猪10头,常温饲养7 d后随机分为对照组((23±2)℃)和低温组((-15±2)℃),每组5头,试验期15 d。试验结束后采集合作猪腋下和腹股沟脂肪组织,采用HE染色观察脂肪组织形态;ELISA法检测脂代谢相关酶活性;荧光定量PCR法检测脂肪棕色化产热基因和脂代谢相关基因的表达;Western blot检测AMPK/PGC-1α通路蛋白的表达。结果发现:与对照组相比,低温处理后合作猪腋下脂肪和腹股沟脂肪呈现褐色化改变,脂肪细胞数量变多且横截面积减小;腋下和腹股沟脂肪中LPL活性,IL-6 mRNA表达量及AMPK、P-AMPK和PGC-1α蛋白表达量极显著增加(P<0.01),LEP mRNA表达量及FAS活性极显著降低(P<0.01);腋下脂肪中UCP3、HSP 70 mRNA表达量显著增加(P<0.05),PPARγmRNA表达量显著降低(P<0.05),AMPK及TNF-αmRNA表达量极显著增加(P<0.01);腹股沟脂肪中AMPK及TNF-αmRNA表达量显著增加(P<0.05),UCP 3及HSP 70 mRNA表达量极显著增加(P<0.01),PPARγmRNA表达量极显著降低(P<0.01);低温处理后合作猪腹股沟脂肪中PGC-1α、ADPN、FAT mRNA表达量和HSL活性极显著增加(P<0.01),但在腋下脂肪中变化不显著(P>0.05)。综上,低温下合作猪腋下脂肪和腹股沟脂肪发生褐色化改变,且脂肪细胞数量增多,面积减小,机体产热增加,脂代谢关键基因LEP、ADPN、PPARγ、FAT及AMPK/PGC-1α通路可能参与机体脂质代谢。
- 李瑶贾蕊李杰滚双宝杨巧丽王龙龙张鹏霞高小莉高小莉
- 关键词:脂肪组织脂代谢
- C型产气荚膜梭菌性腹泻仔猪脾脏转录组分析
- 2023年
- 旨在获得C型产气荚膜梭菌性腹泻仔猪血清炎症因子含量、脾脏病理变化及转录组表达谱特征,为其防治提供参考。选择健康状况良好、体质量相近的7日龄二元仔猪6头,随机分为2组,即对照组(CS)和处理组(TS)。TS组每头仔猪每天灌服1 mL菌液(1×109 cfu/mL),连续5 d,CS组仔猪灌服不含菌液的培养液,感染后0,1,3,5 d采集血液分离血清,用ELISA方法检测IL-8、IFN-α和IFN-γ含量。试验结束后屠宰仔猪采集脾脏,进行HE染色和RNA-Seq测序,对测序获得的差异表达基因进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,并采用RT-qPCR检测仔猪感染C型产气荚膜梭菌过程中关键差异表达基因的表达量。结果表明:TS组仔猪脾脏出现明显炎症,中性粒细胞浸润,伴有变性及坏死的实质细胞;第3,5天CS组血清中IL-8、IFN-α和IFN-γ含量极显著低于(P<0.01)TS组;TS组与CS组间有1079个差异表达基因,上调583个,下调496个;差异表达基因富集的GO功能主要有细胞对β干扰素的反应、细胞对DNA损伤刺激的反应、炎症反应的负调控等,富集的KEGG信号通路主要有肺结核、乙型肝炎、B细胞受体等;抵抗C型产气荚膜梭菌感染的候选基因(如JAK3、TLR3、ILF2、CXXC1等)RNA-Seq结果与RT-qPCR结果一致。以上结果表明,JAK3、TLR3等基因通过关键信号通路可能在仔猪脾脏抵抗C型产气荚膜梭菌感染过程中发挥了重要功能。
- 闫尊强王鹏飞杨巧丽黄晓宇高小莉滚双宝
- 关键词:仔猪腹泻脾脏C型产气荚膜梭菌转录组
- 青贮杂交构树对杜湖杂交肉羊生长性能、血清生化指标和肉品质的影响被引量:28
- 2021年
- 本研究旨在探讨青贮杂交构树对肉羊生长性能、血清生化指标、免疫指标、肉品质及肌肉氨基酸和脂肪酸组成的影响。选用健康、体重(24.2±0.65)kg相近的杜泊×湖羊F1代公羔36只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复3只。对照组(CG)饲喂基础饲粮,试验组(LG、MG、HG)在基础饲粮中分别添加6%、12%和18%的青贮杂交构树。试验期为90 d,其中预试期10 d,正试期80 d。结果表明:1)饲粮中添加不同比例的青贮杂交构树后,试验羊末重、平均日增重差异均不显著(P>0.05)。2)MG和HG组血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量显著高于CG组(P<0.05);LG、MG和HG组血清中尿素氮含量显著低于CG组(P<0.05)。3)MG和HG组背最长肌粗蛋白质和熟肉率显著高于CG组(P<0.05),粗脂肪、胆固醇、剪切力、失水率显著低于CG组(P<0.05);各组间pH、滴水损失、肉色、大理石纹、脂肪色差异不显著(P>0.05)。4)MG组背最长肌中必需氨基酸、鲜味氨基酸、总氨基酸含量和必需氨基酸/总氨基酸显著高于CG、LG和HG组(P<0.05),鲜味氨基酸/总氨基酸显著高于CG组(P<0.05);MG组背最长肌必需氨基酸中缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和精氨酸含量显著高于CG、LG和HG组(P<0.05)。5)LG、MG和HG组肌肉中饱和脂肪酸含量均显著低于CG组(P<0.05),而多不饱和脂肪酸含量均显著高于CG组(P<0.05);MG组亚油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的含量显著高于CG组(P<0.05)。综上,饲粮中添加青贮杂交构树对肉羊生长性能无显著影响,但能提高肉羊免疫力,同时改善肌肉营养成分、肉品质、氨基酸和脂肪酸的组成,且以添加12%效果最佳。
- 张生伟王小平张展海马友记滚双宝杨巧丽高小莉张保军
- 关键词:血清生化指标免疫指标肉品质脂肪酸
- FABP2基因在不同比例花椒籽饲喂育肥猪的组织差异表达、克隆及生物信息学分析被引量:1
- 2022年
- 旨在分析不同比例花椒籽替代部分玉米饲喂三元杂交育肥猪不同组织FABP2的差异表达,寻找肌内脂肪沉积的关键基因;同时克隆三元杂交育肥猪FABP2编码区序列,并用生物信息学方法对其进行分析。选取288头90日龄杜×长×大三元杂交育肥猪(33 kg),随机分为4组,每组4个重复,每个重复18头猪;对照组饲喂基础日粮,试验组分别用花椒籽代替饲粮中2.5%(试验Ⅰ组),5.0%(试验Ⅱ组),7.5%(试验Ⅲ组)的玉米,预试验7 d,正试期100 d。采用qRT-PCR检测试验组不同组织中FABP2的相对表达量,同时克隆三元杂交育肥猪FABP2编码区,利用生物信息学分析软件,预测FABP2蛋白理化性质、结构域和磷酸化激酶位点等。结果表明:FABP2在各组织中均有不同程度表达,其中空肠和肝脏中FABP2显著高表达。与对照组相比,各试验组心脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠和盲肠组织中FABP2显著下调表达;试验Ⅱ组和试验Ⅲ组脾脏和回肠组织中FABP2显著上调表达;试验Ⅰ组肝脏、结肠、直肠和背肌组织中FABP2显著上调表达,说明饲粮中添加花椒籽对三元杂交育肥猪FABP2基因的表达谱具有显著影响。成功克隆并鉴定出三元杂交育肥猪FABP2编码区全长(399 bp),编码132个氨基酸,存在2处错义突变;FABP2蛋白是一种酸性稳定的非分泌蛋白,二级结构主要由延伸链和无规则卷曲构成,含有一个Lipocalin-FABP2超家族保守结构域和3个无序化区域。
- 李杰黄晓宇尚学峰杨姣姣张娟丽谢开会张亚丽闫尊强王鹏飞高小莉杨巧丽马艳萍滚双宝
- 关键词:花椒籽克隆生物信息学分析
- 不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冷冻保存的影响被引量:3
- 2018年
- 【目的】研究对不同抗冻剂及初冻和解冻温度在鸡精液冷冻保存中的效果.【方法】以‘海兰褐’种公鸡为试验材料,利用液氮制作颗粒冷冻精液,研究不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冻后活率、复苏率及存活时间的影响,并筛选出最佳的抗冻剂种类、浓度和初冻、解冻温度组合.【结果】3种抗冻剂组合的冷冻效果优于单一及两种抗冻剂组合,且GL 8%+DMA 6%+EG 6%组合的冻后活率、精子复苏率最高,分别为0.46和57.50%,为最佳抗冻剂组合;在此基础上,筛选出最佳初冻和解冻温度组合为-140℃和50℃,其冻后活率和复苏率最高,分别达到0.57和71.40%,并在15~25℃条件下精子存活时间为160min;在鸡精液冷冻保存中快速冷冻要对应快速解冻,慢速冷冻要对应慢速解冻,且前者精液冷冻保存效果较好.【结论】筛选出了最佳的抗冻剂组合及初冻和解冻温度,发现快速冷冻和解冻的鸡精液保存效果较好.
- 高小莉张兆旺杜秋晨李少斌
- 关键词:鸡精液抗冻剂解冻温度存活时间
- 牛羊乳房炎抗性育种研究进展
- 2022年
- 随着国内外分子生物学和育种新技术的快速发展,抗病育种领域中筛选乳房炎抗性候选基因成为科学研究的热点内容。本文主要从SNP技术、候选基因以及表观遗传学角度阐述了牛羊乳房炎的抗性育种研究进展,以期为牛羊乳房炎的抗性分子育种提供参考。
- 张生伟高小莉
- 关键词:乳房炎抗性育种