郜敏
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市市级医院新兴前沿技术联合攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 糖尿病创面中性粒细胞胞外诱捕网生成增加对巨噬细胞黑色素瘤缺乏因子2炎症体的影响被引量：6
- 2019年
- 目的探讨糖尿病创面中增高的中性粒细胞胞外诱捕网(NET)对巨噬细胞黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎症体表达和活化的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素诱导SD大鼠I型糖尿病模型,制作背部全层皮肤缺损创面。将糖尿病大鼠随机分为糖尿病组和DNase组,以正常大鼠作为正常组。正常组和糖尿病组大鼠每日创面给予0. 9%氯化钠溶液(30 u L); DNase组创面给予DNase I30μL(10 mg/m L),连续给药8 d。伤后第1、5、9、14天,麻醉大鼠,拍摄创面照片。伤后第2、5、9、14天取创面组织,检测创面NET及AIM2炎症体相关蛋白表达。提取大鼠腹腔中性粒细胞和巨噬细胞。佛波酯(0. 1 g/m L)刺激中性粒细胞诱导其形成NET,NET可被DNase I降解。巨噬细胞设为对照、NET和DNase 3组,分别与未经刺激的中性粒细胞、NET以及DNase I降解的NET共培养12 h。蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测巨噬细胞AIM2炎症体相关蛋白AIM2、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-1β前体蛋白(pro-IL-1β)、caspase-1 p20表达和p65磷酸化水平。数据采用独立样本t检验。结果蛋白质印迹检测糖尿病组第2、5天Cit-H3、AIM2和IL-1β蛋白表达量(0. 136±0. 080,1. 119±0. 186,0. 918±0. 163; 1. 022±0. 270,1. 047±0. 123,1. 442±0. 177)均高于正常组(0. 043±0. 010,0. 600±0. 060,0. 172±0. 176; 0. 215±0. 420,0. 747±0. 052,0. 556±0. 179),差异有统计学意义(t=-21. 153、-4. 562、-5. 367、-. 232、-3. 898、-6. 012,P值均小于0. 05)。佛波酯可诱导中性粒细胞生成NET,NET组巨噬细胞AIM2、pro-IL-1β、IL-1β、caspase-1 p20表达和p65磷酸化水平(1. 113±0. 132,1. 098±0. 170,1. 129±0. 114,1. 083±0. 162)较对照组(0. 251±0. 067,0. 068±0. 237,0. 105±0. 155,0. 314±0. 161)明显升高,差异有统计学意义(t=-10. 050、-10. 388、-15. 455、-5. 828,P值均小于0. 05)。DNase组(0. 729±0. 092,0. 549±0. 115,0. 701±0. 172,0. 496±0. 031)则明显下调以上蛋白水平,差异有统计学意义(t=4
- 刘丹郜敏余天漪杨沛琅张萌张杰刘琰章雄施燕
- 关键词：糖尿病伤口愈合
- NLRP3炎症复合体与糖尿病慢性难愈性创面关系的研究进展被引量：5
- 2015年
- 炎症复合体是近年来发现的一种胞内多蛋白复合体,由NOD样受体(NLR)家族成员或黑素瘤缺乏因子2(AIM2)与凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1组成。NLRP3炎症复合体作为固有免疫系统的重要组分,在多种炎症性疾病的发生发展过程中起重要作用。糖尿病慢性创面的持续感染和高促炎状态可活化创面巨噬细胞的NLRP3炎症复合体,激活胱天蛋白酶caspase-1,促进白细胞介素1β、白细胞介素-18、白细胞介素-33等促炎因子的成熟和释放,形成持续扩大的炎症反应,是导致糖尿病创面愈合延迟甚至不愈的主要原因之一。
- 郜敏刘琰章雄
- 关键词：糖尿病伤口愈合白细胞介素1Β
- 更新烧伤休克期循环系统评估的必要性与方法
- 2023年
- 为应对烧伤休克期循环复苏工作中面临的休克期复苏公式优化及休克期麻醉及镇静-镇痛治疗时循环决策依据两大急需解决的问题,我们提出,采用将尿量与循环-氧合量化指标结合的循环评估方法,开展实时与动态循环不同维度相结合进行循环评估。本文介绍该工作的背景及理论与实践基础;推动开展更多烧伤休克期循环评估方法的临床研究,为未来烧伤休克期液体复苏公式更新作必要准备。
- 张勤窦懿郜敏
- 关键词：烧伤麻醉镇静药物
- 胰岛素对高糖环境中巨噬细胞表型转换的影响被引量：3
- 2017年
- 目的·研究胰岛素对高糖培养的人单核细胞株THP-1细胞及糖尿病创面巨噬细胞表型转换的影响。方法·分别用正常糖(5.6 mmol/L)和高糖(25 mmol/L)培养THP-1细胞,PMA刺激贴壁后,LPS诱导分化为M1型巨噬细胞,胰岛素处理细胞6 h。使用RT-PCR、Western blotting检测M1型标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)以及M2型标记物精氨酸酶1(Arg1)、IL-10表达的变化。高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)多次腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型;血糖稳定5周后,在糖尿病大鼠背部制作2个直径1 cm的全层皮肤缺损创面,应用随机数字表法将创面随机分为胰岛素处理创面和生理盐水处理创面,分别滴加0.2 U胰岛素/20μL生理盐水或20μL生理盐水。于伤后第3、7、25日,观察创面巨噬细胞表型特征;以正常大鼠(n=3)作为正常对照。结果·经高糖培养后,由THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞M1型标记物iNOS、TNF-αmRNA表达上调,而M2型标记物Arg1、IL-10 mRNA表达下调;胰岛素作用6 h后,iNOS、TNF-αmRNA表达下调,iNOS、IL-1β蛋白表达也下调,而Arg1、IL-10 mRNA及蛋白表达均上调。此外,高糖培养的巨噬细胞磷酸化NF-κB-p65水平明显升高,而胰岛素干预后磷酸化NF-κB-p65水平显著降低。与正常对照大鼠皮肤创面相比,糖尿病大鼠创面巨噬细胞iNOS表达明显升高;伤后第3、7日,生理盐水处理创面巨噬细胞iNOS高表达;伤后第25日,Arg1表达较低。伤后第7日起,胰岛素处理创面巨噬细胞iNOS表达开始下调;伤后第25日,Arg1的表达显著高于生理盐水处理创面。结论·胰岛素可诱导高糖环境中的巨噬细胞由M1表型向M2表型转换,其机制可能与NF-κB-p65的磷酸化有关。
- 郜敏杨沛瑯余天漪刘琰章雄
- 关键词：胰岛素糖尿病创面
- 低氧预处理大鼠脂肪源性间充质干细胞条件培养基对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响被引量：6
- 2020年
- 目的探讨低氧预处理大鼠脂肪源性间充质干细胞(ADSC)条件培养基对全层皮肤缺损大鼠创面愈合的影响。方法(1)取6周龄雄性SD大鼠1只,颈椎脱臼处死,分离双侧腹股沟脂肪组织,胶原酶消化法提取第3代ADSC,观察细胞形态后用于后续实验。取细胞,采用随机数字表法(分组方法下同)分为成脂诱导组和成骨诱导组,每组各6孔。成脂诱导组培养14 d观察成脂情况,成骨诱导组培养28 d观察成骨情况。(2)取第3代ADSC,分为常氧组和低氧组,常氧组细胞置于氧气体积分数20%的常氧培养箱中培养,低氧组细胞置于氧气体积分数2%的低氧培养箱中培养。常氧组培养3 h,低氧组培养3、6、12、24、48 h,分别取3个样本,进行后续指标检测。实时荧光定量反转录PCR检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的mRNA表达量。收集2组细胞培养上清液,离心过滤后获得常氧条件培养基(normo-CM)和低氧条件培养基(hypo-CM),酶联免疫吸附测定法检测条件培养基中VEGF、转化生长因子β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF)含量。(3)取27只6~8周龄雄性SD大鼠,分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、normo-CM组和hypo-CM组,每组9只,在其背部制作直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面并分别滴加50μL PBS、normo-CM及hypo-CM。伤后0、3、5、7、9、11 d,观察创面大体情况,测量创面面积并计算创面未愈合率。取创面组织,苏木精-伊红染色观察伤后3、9、11 d创面炎症反应及伤后9 d创面再上皮化水平;Masson染色观察伤后11 d创面胶原沉积情况,并分析胶原容积分数(CVF)。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、t检验、Bonferroni校正。结果(1)细胞融合度低时呈长梭形、贴壁生长、排列紧密。培养14 d,成脂诱导组细胞经油红O染色后被染成红色的脂滴
- 郜敏张杰王际壮刘琰章雄施燕
- 关键词：伤口愈合脂肪源性间充质干细胞条件培养基
- 胰岛素激活糖尿病创面巨噬细胞自噬下调NLRP3炎症体活性
- 郜敏章雄刘琰
