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假病毒包装系统及其用途: 本发明涉及基因工程和分子生物学领域，具体涉及假病毒包装载体及包装系统，所述假病毒包装载体及包装系统用于制备假病毒的用途，以及假病毒的制备方法。本发明的假病毒包装系统能够高效、便利地制备假病毒，为病毒的研究和疫苗的制备等提...; 王佑春马建聂建辉刘强黄维金; 文献传递

SPF家兔尿液中戊型肝炎病毒传染性的研究: 2018年; 目的研究家兔尿液中戊型肝炎病毒（HEV）的存在情况，评价尿液中排出的HEV是否具有传染性。方法使用兔型HEV毒株攻击SPF家兔，建立家兔HEV感染模型，采用实时荧光RT-PCR试剂和ELISA抗原、抗体检测试剂检测血清、粪便和尿液样品中的各病毒标志物和血清中的生化指标。到期解剖感染家兔，取肝脏和肾脏组织，进行组织病理和免疫组化检查。使用家兔阳性尿液攻击家兔，评价尿液的传染性。结果HEV抗原和核酸能够从感染家兔R1#的尿液、血清和粪便中持续检出，转氨酶也检测到异常，家兔呈现典型的急性感染的特点。尿液中HEV抗原与核酸的比值显著高于血清和粪便，尿液中虽然未检测到有异常的生化指标，但肾脏组织病理改变比较典型。将阳性尿液感染2只家兔，其中1只血清和粪便中能检出病毒核酸，并且分离该粪便中的病毒能再次感染家兔。结论家兔HEV感染能够导致肾脏损伤，并且感染后的尿液有传染性。尿液中的HEV抗原可以作为诊断HEV感染有意义的指标。; 赵晨燕马建吴佳静黄维金; 关键词：戊型肝炎病毒尿液

新生牛血清血红蛋白含量测定能力的验证被引量：1: 2018年; 目的验证各实验室检测新生牛血清血红蛋白含量的能力。方法采用纤维蛋白原析出法制备验证样品,并采用单因素方差考察样品的均匀性,t检验考察稳定性。组织24家实验室采用《中国药典》三部(2015版)规定的方法对验证样品进行检测,以各实验室结果的中位值作为样品血红蛋白的指定值,标准化四分位距(normalised interquartile range,NIQR)作为变动性度量值(目标标准偏差),计算Z比分数(Z值)。结果验证样品具有良好的均匀性及稳定性。24家实验室中,2家退出,20家检测结果为"满意"(|z|≤2),2家为"不满意"(|z|≥3)。结论参加验证的实验室满意率总体达89.5%,未取得满意结果的实验室可通过分析问题,找出原因并采取相应的整改措施。; 赵晨燕马建黄维金; 关键词：血红蛋白含量

SARS和MERS中和抗体假病毒检测方法的建立被引量：21: 2019年; 严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)均属冠状病毒科(Coronaviridae),能够引起人类严重疾病,特别是SARS-CoV可以导致严重急性呼吸综合征,而且容易造成暴发式流行,引起社会恐慌。本研究利用含有SARS-CoV和MERS-CoV棘突蛋白(Spike protein,S)基因的表达质粒pcD-NA3.1-SS、pcDNA3.1-MS,成功构建了高滴度假病毒,在此基础上通过对病毒接种量进行优化,建立了稳定可靠的假病毒中和抗体检测方法,并通过检测SARS恢复期病人血清以及免疫后小鼠血清对方法的特异性、稳定性以及重复性进行分析,充分证明了该方法是有效的血清中和抗体的检测手段。本研究成功构建了不依赖于BSL-3级生物安全条件的SARS和MERS假病毒,不仅可应用于血清中和抗体检测,还为后续单克隆抗体及抗病毒药物筛选和评价、疫苗研发及病毒感染机制研究等奠定了基础。; 马建马建贺鹏飞赵晨燕刘强刘强王佑春黄维金; 关键词：假病毒中和抗体

一种高效假病毒包装体系的构建及其在狂犬病假病毒构建中的应用: 本研究的目的是优化假病毒包装体系、建立体内外检测狂犬病毒中和抗体检测方法，用于狂犬病疫苗抗体和抗狂犬病免疫球蛋白抗体效价的检测。利用分子克隆技术构建了三株假病毒包装骨架质粒以及三株不同启动子调控的真核表达质粒。; 马建吴晓红聂建辉刘强黄维金刘晶晶李玉华王佑春

假病毒包装系统及其用途: 本发明涉及基因工程和分子生物学领域，具体涉及假病毒包装载体及包装系统，所述假病毒包装载体及包装系统用于制备假病毒的用途，以及假病毒的制备方法。本发明的假病毒包装系统能够高效、便利地制备假病毒，为病毒的研究和疫苗的制备等提...; 王佑春马建聂建辉刘强黄维金; 文献传递

基于假病毒的高通量人类免疫缺陷病毒表型耐药性检测方法的建立和优化被引量：2: 2014年; 目的：建立一种高通量人类免疫缺陷病毒表型耐药性检测方法。方法通过酶切连接方式失活荧光素酶基因，用LacZ基因替代原有的蛋白酶和逆转录酶基因。通过PCR方法从含耐药基因的pSG3△env质粒中扩增pol基因，用infusion定向克隆技术连接入酶切后的pNL4-3.Lac，对该表型耐药性检测方法的主要影响因素进行优化。结果构建了用于高通量耐药性检测的pNL4-3.Lac，确定了检测方法中细胞加入量为10000细胞/孔（96孔板），病毒加入量为200 TCID 50/孔，DEAE-dextran的最佳工作浓度为15μg/ml。用12种抗病毒药物检测两种假病毒8次，确定方法具有良好的重复性（CV值在4.32％～28.46％之间）。构建了6种不同的假病毒与基于pSG3△env的耐药性检测方法进行比较，两者之间具有良好的一致性。结论基于pNL4-3.Lac的表型耐药性检测方法结合了pSG3△env和pNL4-3检测系统的优点，能高通量评价HIV病毒对药物的耐受性，可用于感染者耐药性分析和抗病毒药物的筛选。; 聂建辉许四宏宋爱京赵娟陈晴晴马建黄维金王佑春; 关键词：人类免疫缺陷病毒耐药性表型检测

我国丁型肝炎病毒全基因克隆及序列分析: 2015年; 为构建我国丁型肝炎病毒(HDV)全基因克隆,分别从3份HDV阳性血清中提取病毒RNA,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分段扩增,获得4个相互重叠的DNA片段,将PCR产物测序,利用DNAStar软件拼接,获得HDV全基因组序列;设计引物,用重叠PCR扩增全长HDV片段并连接至克隆载体,构建全基因克隆。结果成功克隆出3株1 675bp的HDV全长基因组。经与GenBank标准序列比对,3株HDV均为基因Ⅰb型,核酸序列同源性达98%以上,与我国Ⅰ型X77627的同源性均达98%以上,与其他基因Ⅰ型的同源性均高于84%。与基因Ⅱ型和Ⅲ型的同源性分别低于77%和66%。本研究构建了3株具有我国代表性的HDV全长基因cDNA克隆,为进一步开展HDV分子生物学研究提供了基础。; 马建辜文洁贾雪荣黄维金梁争论王佑春; 关键词：丁型肝炎病毒聚合酶链反应全基因组

三株中国丁型肝炎病毒全基因克隆及序列分析: 为了构建中国丁型肝炎病毒全基因克隆,分别从三份HDV 血清学阳性血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法分段扩增,获得4 个相互重叠的DNA 片段,将PCR 产物送测序,利用DNAStar 软件拼接,得到HDV全基因组...; 马建辜文洁贾雪荣黄维金梁争论王佑春; 关键词：丁型肝炎病毒 PCR 全基因组

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马建