刘晓勤
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 一种新型人蛋白分泌相关因子
- 本发明提供了一种新型人蛋白分泌相关因子的cDNA序列及其所编码的氨基酸序列及其可能的功能。其cDNA序列全长为2768个碱基。其氨基酸序列全长为516个氨基酸。该基因定位于人染色体22q13.2~13.3,基因组序列全长...
- 贺福初张成岗鱼咏涛邢桂春魏汉东刘晓勤张绍文欧阳曙光罗凌刘孟珉吴祖泽
- 文献传递
- 人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响被引量:1
- 2001年
- ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) - ARFGAP1融合基因表达质粒 (p EGFP- C1 - ARFGAP1 ) ,经脂质体转染将其导入 COS- 7细胞瞬时表达 ,利用绿色荧光确定ARFGAP1的亚细胞定位 .结果显示 ,ARFGAP1位于细胞质部分 ,表达量高时 ,在核周高尔基体区聚集呈团块状或颗粒状 .构建真核表达质粒 pc DNA3.1 /myc- His- ARFGAP1 ,在 COS- 7细胞中表达 ,并用 ARFGAP1和分泌型碱性磷酸酶 (SEAP)真核表达质粒共同转染 COS- 7细胞 ,发现ARFGAP1在细胞中过表达能部分抑制 SEAP的分泌 .结果证明 ,ARFGAP1对细胞的物质转运和分泌功能有调节作用 .
- 刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初
- 关键词:细胞分泌功能
- 人胎肝转录组及新基因的规模发掘与功能研究
- 贺福初张成岗鱼咏涛瞿祥虎魏汉东马晓芸翟芸周钢桥邢桂春刘晓勤王茫桔吴松峰
- 该研究采用DNA序列自动分析技术、计算机技术并借助互联网和公共生物学数据库,在国际上首次系统地建立了胎肝转录组,并开展了与肝脏相关组织与细胞、造血组织与细胞基因表达谱的比较研究,其中已知基因的1660种,功能涉及15类,...
- 关键词:
- 细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性
- 2001年
- ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR ) ,从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列 ,并将其亚克隆到 pGEM T载体 ;采用RNA印迹法和斑点杂交法 ,检测其组织表达谱 ,发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录 ,并且只有一种约 2 7kb的转录本 .利用基因重组技术 ,构建表达质粒 pBAD/Thio ARFGAP3,在大肠杆菌中表达 ,采用亲和层析法纯化表达产物 ,利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列 .检测重组ARFGAP3的生化活性 ,证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性 ,促进ARF1结合的GTP水解为GDP ,磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2 )增强其GAP活性 ,而磷脂酰胆碱 (PC)
- 刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初
- 关键词:生化活性