刘聪
- 作品数：23 被引量：43H指数：3
- 供职机构：四川大学华西第二医院更多>>
- 发文基金：四川省杰出青年学科带头人基金四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- HBV干扰DNA损伤应答ATR通路机制的初步研究
- 目的探索HBV对ATR信号通路沉默效应中的分子机制,寻找HBV与DNA损伤应答信号通路之间的关键相互作用,从而为抗HBV相关性肝癌的治疗提供新的靶点。方法研究采用Western blot和免疫荧光(IF)技术,BrdU染...
- 李明远左斌王欢任来峰李莎郭连娣刘聪
- 关键词：乙肝病毒HBX细胞周期
- 脱氧核糖鸟苷酸对染色质松弛程度的调控作用
- 2024年
- 真核生物的染色质结构在基因转录、DNA修复等生物学过程中发生动态变化,其松弛程度和组蛋白修饰受到多种机制的严密调控.在研究DNA修复机制的过程中,发现敲除S期抑制基因(Spd1)可以逆转多种DNA损伤应答(DDR)突变体的表型缺陷,该遗传相互作用涉及到DDR的多个信号转导通路.Spd1的主要功能是抑制脱氧核糖核苷酸(dNTP)的生物合成,这说明敲除Spd1可以通过改变dNTP库的水平或组分来影响DNA损伤应答.进一步分析发现,Spd1缺陷促进染色质松弛,导致突变菌株的染色质对微球菌核酸酶的敏感,由此说明dNTP水平的增高可以促进染色质的紧密程度.最后,通过利用可以转运外源dNTP的FY2317菌株,制备原生质体,利用半离体的体系证明过量的dNTP,特别是脱氧核糖鸟苷酸(dGTP)可以模拟Spd1缺失菌株的表型,显著提高染色质的松弛程度.综上所述,研究发现了一种新的调控染色质松弛程度的遗传机制,可以影响DNA损伤修复的应答.
- 李英杰王小军刘聪曾鸣郭莲娣
- 关键词：DNA复制
- 表达丙型肝炎病毒非结构蛋白3的重组腺病毒免疫小鼠的研究
- 2007年
- 目的构建表达HCV非结构蛋白3(NS3)的重组腺病毒RAd/NS3,探讨其免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增编码NS3蛋白(329～935位氨基酸)的基冈片段,定向克隆至重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化BJ5183菌,利用细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒,转染293细胞,以包装、扩增重组腺病毒。将重组腺病毒以1×10~8 pfu剂量经皮下注射免疫BALB/c小鼠,并以100μg重组质粒pRC/ NS3经肌内注射途径免疫小鼠为对照。ELISA法检测免疫小鼠血清抗体水平,^(51)Cr释放法检测免疫小鼠细胞毒性T淋巴细胞体外杀伤功能。结果重组腺病毒经皮下免疫小鼠后可刺激机体产生较强的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,且免疫效果强于重组质粒pRC/NS3组,初次免疫后2周,前者20只小鼠抗-HCV全部阳转,而后者10只小鼠仅3只阳转.未观察到明显的不良反应。结论表达HCV NS3抗原的重组腺病毒载体疫苗能够诱导机体产生有效的体液和细胞免疫应答。
- 李卫华赵连三周陶友何芳刘丽刘聪
- 关键词：腺病毒科肝炎病毒
- 一种含有抑制核酸内切酶功能的药物及其抗肿瘤的用途
- 本发明公开了一种ENDOD1核酸内切酶的抑制性药物和SSA增强剂，以及ENDOD1核酸内切酶抑制性药物和SSA增强剂在制造治疗或预防人类肿瘤及乙型肝炎病毒感染疾病的药物中的用途。所述核酸内切酶为ENDOD1基因编码的核酸...
- 刘聪唐子执曾鸣王小军母得志孔道春
- 文献传递
- CRL4泛素化酶在卵巢癌中的功能和突变研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究泛素化酶CRL4蛋白复合体家族成员CRL4-WD40重复序列结构域蛋白70(WDR70)在卵巢癌细胞中的DNA修复功能,以及卵巢癌组织中该泛素化酶基因的突变规律。方法利用免疫荧光方法,检测CRL4骨架蛋白DDB1及WDR70基因特异性沉默的卵巢癌细胞与其对应的对照组细胞在化疗药物或放射线照射诱导产生DNA双链断裂后,组蛋白H2AX(γH2AX)及单链DNA结合蛋白32(RPA32)磷酸化灶点显示的差异;BrdU标记和染色实验检测WDR70基因对DNA复制是否存在影响,同时利用免疫组化染色检测卵巢癌组织临床病理标本及正常卵巢组织标本中的WDR70和组蛋白H2B单泛素化(uH2B)染色差异,以阐明CRL4的DNA损伤应答特征,RT-PCR测定卵巢癌组织中WDR70的基因表达水平,并采用DNA测序确定WDR70突变位点。结果免疫荧光染色结果显示,CRL4-WDR70的不同蛋白亚基(DDB1、WDR70)在细胞周期检验点激活和uH2B介导的DNA末端回切过程中起着不同的作用:DDB1参与以上两个机制的调控,而WDR70只促进末端回切、RPA32在DNA断裂点的招募和同源重组修复。BrdU标记和染色结果显示WDR70基因对DNA复制并不存在影响。免疫组化结果显示,卵巢癌组织临床病理标本及正常卵巢组织标本中的WDR70和uH2B表达存在差异。RT-PCR结果显示WDR70基因的全长、5′和3′转录本水平在50%的卵巢癌组织中水平减低,出现多处外显子突变位点。结论 CRL4在DNA修复过程中具有促进H2B单泛素化、促进DNA末端回切和激活细胞周期检验点等多种重要功能,是维持基因组稳定性、遏阻卵巢癌发生的重要抗癌机制。
- 唐子执王海斌曾鸣刘聪李德华
- 关键词：卵巢癌
- 上皮性卵巢癌细胞原代培养及放化疗相关的DNA损伤应答机制的研究被引量：6
- 2014年
- 目的通过上皮性卵巢癌组织细胞原代培养,检测DNA损伤应答过程中相关蛋白细胞定位的动态变化。方法选取临床新鲜卵巢上皮性肿瘤标本28例(交界性浆液囊腺瘤6例,高分化浆液腺癌5例,中分化浆液腺癌6例,低分化浆液腺癌11例),组织块经胶原酶A消化后培养,比较不同培养基(MCDB/M199培养基、原代细胞专用培养基、DMEM培养基)对原代肿瘤细胞正常形态维持、增殖潜力及纤维化的影响。离子射线(X光)、喜树碱(CPT)处理诱导细胞DNA损伤,间接免疫荧光法检测ATM蛋白激酶依赖性信号转导通路中DNA损伤(双链断裂)应答相关蛋白〔p53结合蛋白1(53BP1),磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)〕的应答特征。结果 MCDB/M199培养基有利于卵巢上皮性肿瘤细胞维持正常形态并减缓纤维化。未经处理前各级别卵巢肿瘤原代细胞中均存在不同程度的内源性损伤(53BP1、γ-H2AX灶点),且随着肿瘤细胞恶性程度的增加,53BP1、γ-H2AX灶点逐渐增多(P<0.05)。X光、CPT可以在卵巢癌原代细胞中诱导大量DNA损伤,提示原代培养的细胞有经典的DNA损伤应答反应。结论成功建立了卵巢上皮性肿瘤直接分离培养方法,在卵巢上皮性肿瘤发展过程中,ATM转导通路检验点信号可被内源性损伤激活,CPT、X线处理会造成上皮性卵巢癌原代细胞中ATM通路的进一步激活来抑制肿瘤增殖,阻止肿瘤进展。
- 王思郭莲娣贾月改杨娟王鑫刘聪楼江燕
- 关键词：卵巢肿瘤原代细胞培养DNA损伤
- 乙型肝炎病毒抑制肝细胞免疫检查点PD-1配体基因表达的研究被引量：1
- 2017年
- 目的在细胞水平上分析乙型肝炎病毒(HBV)复制及其编码的X基因(HBx)表达对细胞基因表达谱的影响,特别是免疫相关基因表达水平的变化。方法通过慢病毒和pcDNA瞬时转染过表达HBx基因,利用RNA-Seq和RT-qPCR等方法检测免疫相关基因的表达水平,并在HBV复制细胞系中进行验证。结果 HBV复制和HBx表达可以剂量依赖性抑制免疫检查点程序性死亡分子1(PD-1)配体基因(PD-L1/CD274)的表达,而HBx基因的H-box突变体的表达失去该抑制效应。结论HBV/HBx具有抑制PD-L1/CD274基因表达的能力,在病毒感染的急性期解除抗原特异性T细胞激活的检查点,活化细胞毒性T细胞,这可能导致T细胞对高度复制的细胞进行攻击和清除,帮助病毒进入较低复制状态,达到病毒-宿主的平衡状态并奠定HBV慢性感染的基础。
- 郭莲娣王丹唐子执曾鸣王小军刘聪李友伟
- 关键词：HBX
- 一种含有抑制核酸内切酶功能的药物及其抗肿瘤的用途
- 本发明公开了一种ENDOD1核酸内切酶的抑制性药物和SSA增强剂，以及ENDOD1核酸内切酶抑制性药物和SSA增强剂在制造治疗或预防人类肿瘤及乙型肝炎病毒感染疾病的药物中的用途。所述核酸内切酶为ENDOD1基因编码的核酸...
- 刘聪唐子执曾鸣王小军母得志孔道春
- DNA双链断裂修复的选择性调控机制
- 2014年
- 在各种DNA损伤中,DNA双链断裂(double-strand break,DSB)是最为严重的一种,快速准确地修复DSB对维持基因组稳定性起着至关重要的作用。真核生物细胞通过一系列复杂的信号转导途径激活对DSB的修复,其中最为重要的是同源重组和非同源末端连接机制。最近的研究表明,这两种方式在DSB修复的早期是相互竞争的关系,其选择在很大程度上受到53BP1及同源蛋白质的调控。将讨论53BP1作为DSB修复途径的核心因子,在染色质水平整合BRCA1、Ct IP等修复因子和多种组蛋白修饰构成的信号途径,介导同源重组和非同源末端连接通路选择的分子机制。
- 唐子执刘聪曾鸣
- 关键词：DNA双链断裂同源重组
- 银行网点分布式远程集中监控系统设计与实现
- 刘聪
