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P21作为宫颈癌标志物和P21单抗临床应用的研究被引量：1: 1991年; 以人宫颈癌为材料,同一份样品用四个实验指标来检测和分析癌蛋白P21的表达变化。结果发现:宫颈癌组织中存在有P21的表达;表达蛋白的分子量约为21KD;表达的主要部位在恶变细胞胞浆和胞膜中;表达水平高于慢性炎症约六倍。实验结果在临床应用中得到了验证。54例宫颈石蜡切片用ABC免疫酶标法进行了检测。宫颈癌组P21阳性率和阳性强度明显高于慢性炎症组,二者有显著性差异(P<0.05)。; 伍欣星赵文先杨平林宜先刘薇茜丁晓华邱小萍魏赛男戴天力谭云; 关键词：子宫肿瘤标志物单克隆抗体

人乳头瘤病毒在宫颈癌组织中存在状况的初探: 1989年; 采用Southern吸印杂交技术,对人乳头瘤病毒16型(HPV-16)在人宫颈癌活检组织中存在的状况进行了研究。结果提示:①存人宫颈癌组织中存在着HPV-16 DNA序列,并且HPV-16 DNA是整合在肿瘤细胞的基因组中(有的也带有游离的片段)整合的位点是随机的;②不同的人宫颈癌组织HPV-16DNA的含量不同,酶切片段的大小也不同;③HPV-16具有诱导NIH/3T3细胞发生转化的功能,病毒基因亦是整合在细胞染色体DNA中。; 伍欣星杨平赵文先汤纪路谭云刘薇茜; 关键词：乳头状瘤病毒子宫颈肿瘤细胞学

C-MYC癌基因与宫颈癌发生发展相关性的初步研究: 1990年; 应用细胞转化和核酸杂交技术研究 c-myc 癌基因与宫颈癌的关系,可见宫颈癌DNA 转染 NIH/3T3细胞,在 G_(418)-DMEM 选择性培养液中形成能持久增殖、呈重叠生长的转化灶,转化灶细胞基因组中 c-myc 癌基因有扩增现象;经斑点杂交检测正常宫颈、慢性宫颈炎和宫颈癌组织DNA 中 c-mye 癌基因,揭示宫颈癌组织中其拷贝数明显增加;宫颈腺癌 DNA 经 Hind Ⅲ单酶切进行Southern Blot 杂交出现两条阳性杂交带,而宫颈鳞癌 DNA 经 EcoRⅠ或 HindⅢ/EcoRⅠ或 EeoRⅠ酶切,均只出现一条阳性杂交带。; 魏赛男杨平赵文先伍欣星刘薇茜谭云; 关键词：宫颈癌癌基因核酸杂交细胞转化

宫颈癌ras癌基因产物P21免疫组织化学检测被引量：1: 1992年; 用P21高表达质PJCL-E_30制备的P21单克隆抗体,对存档收藏的宫颈癌、宫颈炎组织蜡块进行了ABC免疫组化检测。其结果,在91.6％的宫颈癌和56.2％的宫颈炎切片中,都有P21阳性细胞检出,但阳性强度宫颈癌明显高于宫颈炎(P<0.005);宫颈癌不同型之间P21阳性强度无显著性差异。提示:1)宫颈上皮从正常到恶性表型的转化,与Ha-ras癌基因产物P21高表达相关,2)P 21免疫组化检查可以反应ras基因的表达与分布,其方法敏感、快速,操作简便,可作为肿瘤诊断的一个指标以及作为鉴别良、恶性宫颈疾患的重要参考。; 伍欣星赵文先杨平林宜先刘薇茜丁晓华魏赛男邱小萍戴天力谭云; 关键词：免疫组化子宫颈肿瘤

利用G_(418)转染选择系统检测宫颈癌DNA的转化活性: 1989年; 从人宫颈癌组织中制得高分子DNA,选用NIH/3T3细胞作受体,以含抗新霉素基因的表达载体(PSV-neo)作为抗性选择标记和人宫颈癌DNA进行共转染。转染后的细胞采用G_(418)和低血清进行筛选。其结果获得了形态恶变的转化细胞灶,它能在0.3%软琼脂培养基中生长,在裸鼠体内成瘤,并证实为纤维肉瘤。而对照NIH/3T3细胞却没有这种能力和性能。转化灶DNA能与标记探针Blu-R8起杂交反应。提示人Alu重复序列片段也整合到转染体基因组中。; 刘薇茜杨平赵文先伍欣星谭云; 关键词：宫颈癌 DNA

PCR 扩增人型结核杆菌 DNA 及结核杆菌属 DNA 探针的制备被引量：1: 1993年; 用多聚酶链反应(PCR)方法扩增人型、牛型结核杆菌基因组 DNA,获得特异的158 bpDNA 片段,而从另外十三种分枝杆菌未见到特异的扩增产物.回收158 bpDNA 片段作探针,它除与人型、牛型结核杆菌有特异的杂交信号外,与金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及一些分枝杆菌皆没有杂交反应.结果表明,PCR 可用于检测结核杆菌基因组 DNA,扩增产物158 bp DNA 片段可作为探针用于检测人型、牛型结核杆菌并鉴别结核杆菌与其它分枝杆菌.; 丁晓华杨平刘薇茜谭云赵文先蔡建斌梅国华潘慧可; 关键词：结核杆菌聚合酶链反应 DNA探针

[α-^(35)S]dATP标记DNA探针在临床样品检验中的应用: 1989年; 用国产[α-^(35)S]dATP,经体外缺口翻译(nick translation)方法,制备 pBR322 DNA 探针,用于检测临床样品中 pBR322 DNA 的同源性物质。结果提示,^(35)SdATP 标记 DNA 探针,具有特异性强,敏感性高,方法简便,而且对人体辐射危害小,价格便宜等特点,可用于临床检验、诊断及基因分析。; 伍欣星赵文先杨平刘薇茜谭云; 关键词：腺嘌呤核苷酸 DNA探针

聚合酶链反应法检测痰液中结核杆菌DNA: 1992年; 用聚合酶链反应方法扩增标准人型结核杆菌株 HRv 37,获得一158bp 的 DNA 片段。该法可检测系列稀释的结核杆菌 DNA 至100fg。检测25倒结核痰标本(结核菌培养阳性6例)中,10例阳性,4例可疑阳性,说明检测方法比结核秆菌培养敏感,可进一步试用于临床结核病人的病原诊断。; 丁晓华杨平刘薇茜谭云赵文先蔡建斌梅国华戴天力; 关键词：结核杆菌脱氧核糖核酸

PCR技术应用于临床结核病的诊断研究: 1992年; 采用PCR(聚合酶链反应)技术,选择一对寡核苷酸引物,扩增的靶基因为克隆的PH_重组标准人型结核分枝杆菌2.4kb DNA。其基因片段是结核杆菌所特有,单一拷贝基因,与其他非典型分枝杆菌的基因无同源序列。研究结果表明:①扩增了人型和牛型结核杆菌标准株基因DNA 158bp 片段,而其他14种非典型分枝杆菌和金黄色葡萄球菌、脓杆菌 DNA 未扩增出相应产物.②10倍系列稀释人型结核菌 DNA,检测敏感性相当于10～50菌数/ml痰样。③60例临床肺结核病人痰样进行 PCR 技术检测和常规生物法测定比较,前者阳性率为58.3%,后者检测率11.70%。而20例非结核痰样用两种方法检测全为阴性。提示:PCR 技术诊断结核病快速、简易、特异、敏感、高效,是在基因水平上检测的一种新技术。; 杨平梅国华丁晓华蔡建斌赵文先伍欣星刘薇茜潘慧可谭云戴天力; 关键词：寡核苷酸类结核杆菌结核病

克隆化探针中载体与临床样品同源性的研究: 1989年; 当前,克隆化探针(由病毒核酸片段和细菌质粒一载体组成)在临床样品的实验诊断和研究中得到了应用。它具有简便、快速、灵敏等优点,并有助于检测那些难于或不能培养的病毒。但是克隆化探针中载体与临床样品的同源性问题应引起重视。我们用常见的克隆载体pBR322作探针,用核酸点杂交和Southern吸印方法,检测了来自173人的213例样品。结果表明,在常用的临床样品:人宫颈脱落细胞、宫颈活检组织、血液中都含有pBR322 DNA的同源序列,这就意味着如果用克隆化探针检测这些临床样品时,可能出现样品与载体发生非特异性反应,而不是与病毒基因片段的特异性反应。实验还表明,经一次电泳纯化的病毒基因片段与pBR322探针杂交,阳性信号明显减弱,但没有完全消失,说明仍有少量pBR322污染。因此,在运用克隆化探针检测临床各类样品时,各系统要按常规设载体探针对照,或者用多次纯化的分离病毒基因片段作探针,以排除载体与临床样品的同源性问题。; 伍欣星杨平赵文先刘薇茜谭云; 关键词：分子杂交

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谭云

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