冯方方
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：自动化与计算机技术医药卫生生物学更多>>
- 一种多功能临床实训解剖台
- 本实用新型公开了一种多功能临床实训解剖台，下底座上方设有解剖基台，解剖基台上设有放置区域和安装区域，解剖基台的安装区域内滑动拆卸安装有台面板，台面板为碳纤维材质，台面板上开设有排水孔，位于安装区域内的解剖基台上设有倾斜面...
- 杨新东郑建武陈忠孝黄俊杰冯方方张娜娜
- 男性腹股沟区及盆腔正中矢状切模型
- 1.本外观设计产品的名称：男性腹股沟区及盆腔正中矢状切模型。;2.本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于教学、展示的模型。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状、图案与色彩的结合。;4.最能表明设计要点的图片或照片：...
- 杨新东张娜娜冯方方郑建武陈忠孝黄俊杰戴开宇
- 一种多功能临床实训解剖台
- 本发明公开了一种多功能临床实训解剖台，下底座上方设有解剖基台，解剖基台上设有放置区域和安装区域，解剖基台的安装区域内滑动拆卸安装有台面板，台面板为碳纤维材质，台面板上开设有排水孔，位于安装区域内的解剖基台上设有倾斜面板，...
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- 弓形虫复合抗原ROP2-SAG1优势表位与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1融合体的构建及其在真核细胞中的表达被引量：2
- 2018年
- 目的构建弓形虫复合抗原ROP2-SAG1免疫优势表位(RSepitope)与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1(HPV16L1)的融合体(RSepitope-HPV16L1),验证其在真核细胞中的表达。方法优化RSepitope基因序列,构建pc DNA3.1/RSepitope重组真核表达质粒。从T-HPV16L1质粒中扩增HPV16L1基因片段,构建pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1重组质粒。双酶切、PCR、测序鉴定正确后,将2个重组质粒分别转染至非洲绿猴肾细胞COS-7细胞,培养48 h后收集细胞,提取RNA,RT-PCR扩增相应的目的基因。Western blotting和间接免疫荧光实验检测重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV16L1在细胞中的表达。结果构建的重组质粒pc DNA3.1/RSepitope和pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1经PCR扩增和双酶切分别获得282 bp和1 500 bp片段,与预期结果一致,测序结果正确。RT-PCR结果显示,以2个重组质粒转染细胞的c DNA为模板,分别扩增到282 bp和1 500 bp的目的条带。Western blotting分析结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV16L1分别在相对分子质量(Mr)约为10 000和65 000处出现特异性条带;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组蛋白RSepitope-HPV16L1在Mr65 000处出现特异性条带。间接免疫荧光实验结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组质粒pc DNA3.1/RSepitope和pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1转染细胞内均观察到绿色荧光;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组质粒pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1转染细胞内观察到特异性绿色荧光。结论弓形虫优势表位RSepitope与HPV16L1融合体构建成功,且可在真核细胞中表达。
- 谢自新姜洁汪文寰吕金辉冯方方张丽芳李文姝
- 关键词：弓形虫优势表位
- 人颗粒酶B融合蛋白的原核表达及其免疫血清的制备
- 2017年
- 目的在原核体系中表达人颗粒酶B(granzyme B,Gzm B)融合蛋白,并制备Gzm B免疫血清多克隆抗体。方法构建Gzm B原核表达重组质粒p ET32a-Gzm B,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组Gzm B(r Gzm B)蛋白,镍离子螯合亲和层析柱纯化表达产物。以纯化的r Gzm B蛋白为免疫原,皮下多点注射BALB/c小鼠,共免疫3次,分别于免疫后2、4、6周经小鼠尾静脉采血,分离血清,间接ELISA法检测免疫血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平,并确定其抗体最大稀释度,免疫斑点试验检测免疫血清多克隆抗体对Gzm B的特异免疫结合特性。结果质粒p ET32aGzm B经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的r Gzm B蛋白相对分子质量为48 000;纯化的r Gzm B蛋白免疫小鼠血清中Gzm B特异性Ig G抗体水平随免疫时间延长至第4周达到高峰,随后维持一定水平;抗体最大稀释度为1∶1 600;r Gzm B免疫血清能够特异地结合Gzm B,显示了其免疫结合特性。结论制备了r Gzm B蛋白和Gzm B小鼠免疫血清多克隆抗体,为后续开展Gzm B的靶向杀伤、靶向检测等应用研究奠定了基础。
- 汪文寰冯方方蔡一奇张婵琼岑丹维宋易玲郭刚强张丽芳李文姝
- 关键词：颗粒酶B原核表达多克隆抗体
