李莉
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰组蛋白乙酰化引发间充质干细胞心肌定向分化特定蛋白的异常表达被引量：14
- 2008年
- 目的利用组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5 shRNA重组质粒转染经5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导后的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并检测心肌早期发育相关结构和功能蛋白表达情况,探讨组蛋白乙酰化修饰在MSCs定向分化过程中的调控作用。方法①以组蛋白乙酰化修饰关键因子Gcn5为靶点,用带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基凶的pGenSil-1作为载体,构建Gcn5shRNA质粒。②MSCs体外扩增,5-aza诱导后,不同的时间点用脂质体包载Gcn5 shRNA共转染大鼠MSCs,24h后相差显微镜下观察细胞生长状况,电镜下观察染色质的形态变化,采用Western blot法分别检测Gcn5、心肌结构重链蛋白(myosin heavy chain,MHC)和连接蛋白(Connexin 43,Cx43)的表达状况。结果电镜示经通用阴性质粒HK转染的MSCs细胞,形态与正常MSCs无明显差别,染色质仍以边集状态为主;经干扰质粒转染的MSCs细胞在形态上与正常MSCs细胞无明显差别,但其染色质出现明显的浓缩紧密现象。以β-artin为内参,比较干扰组和阴性对照组Gcn5、Cx43、MHC蛋白,计算出沉默效率分别为86%、58%和67%。结论转染Gcn5shRNA质粒可干扰组蛋白乙酰化平衡,进而影响MSCs体外分化中心肌发育特定蛋白的表达。
- 朱静冯川李莉邓兵田杰张晓萍
- 关键词：乙酰化修饰RNA干扰间充质干细胞分化
- 组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶在细胞周期中的调控作用被引量：1
- 2008年
- 随着组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶的克隆,人们开始重视组蛋白乙酰化平衡在细胞周期中的调控作用。细胞周期进程中的两个控制点容易受到众多因素的干扰,导致细胞增生、静止或死亡。现介绍组蛋白乙酰化酶和去乙酰化酶的研究进展及其在细胞周期进程中的调控作用,为临床上以肿瘤为代表的多种疾病的诊断和治疗提供一些指导作用。
- 李莉田杰
- 关键词：组蛋白脱乙酰基酶类细胞周期
- GCN5特异性质粒筛选及其对MSCs分化的影响
- 2008年
- 目的筛选有效质粒片段,探讨组蛋白乙酰化平衡对MSCs分化的影响。方法提取针对GCN5基因的3条shRNA(ZJ1、ZJ2、ZJ3)重组质粒及阴性对照质粒HK,分别转染入经5-aza诱导的MSCs,24h后荧光显微镜观察细胞、流式细胞仪检测转染效率、Western-blot分析GCN5蛋白表达,ELISA检测组蛋白乙酰化酶活性。结果质粒转染效率大于20%;ZJ3转染组组蛋白乙酰化酶活性及GCN5蛋白表达量均有明显降低,抑制效率分别为[(49.0±0.6)%,(35.7±0.1)%,P<0.05];组蛋白乙酰化水平与MSCs分化进程密切相关,质粒ZJ3可有效抑制不同分化阶段MSCs中乙酰化酶水平,抑制效率分别为[(27.0±0.1)%,(26.7±0.1)%,(25.4±0.1)%,P<0.05]。结论成功筛选出有效质粒片段ZJ3,初步确证GCN5抑制状态可导致组蛋白乙酰化失衡,从而调控MSCs的分化进程,为后期MSCs移植的临床应用奠定实验基础。
- 李莉朱静冯川田杰
- 关键词：RNA干扰质粒组蛋白乙酰化酶
- 超声和血栓溶解被引量：6
- 2005年
- 李莉高大中
- 关键词：超声血栓溶解溶栓术外治血管再通导管介入
- 抑制组蛋白乙酰化酶活性对心肌微环境中间充质干细胞向心肌细胞分化的影响被引量：4
- 2008年
- 目的通过检测移植经干扰乙酰化作用基因Gcn5表达重组质粒ZJ3转染间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）的Wistar大鼠心肌组织内乙酰化酶活性及乙酰化作用基因Gcn5、心肌发育基因GATA4的表达量，探讨体内心肌微环境下乙酰化修饰在干细胞特化心肌样细胞转录调控中的作用。方法提取干扰组蛋白乙酰化酶Gcn5表达重组质粒ZJ3，经脂质体包载转染MSCs24h后移植至Wistar大鼠心肌组织内，2w后检测移植区域心肌组织内乙酰化酶活性及乙酰化作用基因Gcn5、心肌发育基因GATA4的表达量。结果实验组心肌组织乙酰化酶活性较正常对照组、阴性对照组及试剂对照组均有显著性降低；实验组心肌组织内Gcn5及GATA4表达量较正常对照组、阴性对照组及试剂对照组均有明显减弱。结论相关特异性基因的检测结果显示封阻干细胞染色质组蛋白乙酰化修饰后，在体内心肌微环境诱导下亦可以抑制干细胞特化心肌细胞转录过程，这为进一步研究组蛋白末端乙酰化修饰与干细胞分化调节机制奠定了实验室基础。
- 李莉朱静田杰冯川
- 关键词：GATA4基因
