李洪亮
- 作品数：9 被引量：5H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FOXC1基因在小鼠成骨细胞系MC3T3-E1体外骨向分化中的作用研究
- <正>目的:探讨FOXC1基因过表达对体外培养的小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞生物学行为及骨向分化能力的影响。方法:一、对成骨细胞系MC3T3-E1进行成骨诱导,于2、3、5、7天提取总RNA和总蛋白,采用实时荧光定...
- 李洪亮司家文沈国芳
- 关键词：成骨细胞细胞分化基因调控
- 文献传递
- MicroRNA-103-3p对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化早期的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨miR-103-3p对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化早期的影响。方法:以小鼠前成骨细胞MC3T3-E1为实验对象,对MC3T3-E1细胞进行成骨诱导,分别在0、3、5、7 d应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测细胞中Runx2、Osx、ALP、miR-103-3p表达水平,Western免疫印迹(Western blotting)检测Runx2、Osx蛋白表达并进行碱性磷酸酶(ALP)染色。通过脂质体lipofectamine2000瞬时转染miR-103-3p模拟物(miR-103-3p mimics)及模拟物阴性对照进入MC3T3-E1细胞内,Real-time PCR检测2组细胞miR-103-3p的表达水平,CCK-8试剂盒检测细胞增殖。分别对2组细胞进行成骨诱导,在成骨诱导后0、3、7 d,分别使用Real-time PCR和Western免疫印迹检测2组细胞Runx2、Osx等成骨相关基因m RNA和蛋白的表达变化,并对2组细胞进行ALP染色。实验数据采用SPSS19.0软件包进行统计学分析。结果:MC3T3-E1经成骨诱导0、3、5、7 d后,细胞内Runx2、Osx、ALP转录水平持续显著升高;Runx2、Osx蛋白表达升高。ALP染色逐渐加深。在成骨诱导3、5、7 d的MC3T3-E1细胞中,miR-103-3p水平较诱导前受到持续显著抑制(P<0.05)。瞬时转染miR-103-3p mimics后,MC3T3-E1细胞中的miR-103-3p表达水平较对照组显著上调(P<0.05),细胞增殖受到抑制,Runx2、ALP转录水平显著抑制(P<0.05),Runx2蛋白表达显著抑制。对转染后的细胞进行成骨诱导3、7 d后,miR-103-3p转染组细胞Runx2、Osx、ALP在转录水平的表达较对照组显著降低,Runx2、Osx在蛋白水平的表达较对照组显著降低,且miR-103-3p转染组细胞ALP活性较对照组显著降低。结论:miR-103-3p可能对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的成骨分化早期起抑制作用。
- 卢陈佩李洪亮欧阳宁鹃林雨恒司家文沈国芳
- 关键词：成骨分化
- 细胞松弛素D对MC3T3-E1骨向分化能力的影响
- <正>目的:探讨细胞松弛素D(cytochalasin D,Cyto D)对小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1骨向分化能力的影响。方法:采用不同浓度梯度细胞松弛素D(0.0001ug/ml、0.001ug/ml、0.0...
- 刘庆成李洪亮于洪波
- 文献传递
- Foxc2 稳定转染对C3H10T1/2细胞成骨性能的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 :探讨Foxc2基因过表达对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞系C3H10T1/2细胞生物学行为及分化能力的影响。方法:通过慢病毒转染构建Foxc2过表达C3H10T1/2细胞系,采用实时定量PCR和Western免疫印迹法检测转染后Foxc2蛋白的表达。应用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,实时定量PCR和Western免疫印迹法检测过表达Foxc2对成骨、成脂相关基因(Runx2、OPN、OCN、PPARγ)表达的影响,分别通过碱性磷酸酶(ALP)染色和油红染色检测细胞成骨和成脂分化能力。采用SPSS 17.0软件包对数据进行t检验。结果:成功构建Foxc2稳定过表达的C3H10T1/2细胞系,发现Foxc2过表达阻滞细胞于G1期,抑制细胞增殖。在成骨诱导过程中,过表达Foxc2可以显著上调Runx2、OPN、OCN等成骨相关基因的表达。ALP染色显示,Foxc2稳定过表达细胞较对照组细胞染色深。在成脂诱导过程中,过表达Foxc2显著下调PPARγ基因的表达;油红染色显示,成脂分化进程被部分抑制。结论:Foxc2过表达抑制细胞增殖,促进细胞分化。其机制是上调Runx2、OPN、OCN成骨相关基因的表达,下调PPARγ的表达,促进C3H10T1/2细胞的成骨分化,抑制其成脂分化。
- 王敏娇司家文李洪亮欧阳宁鹃沈国芳
- 关键词：成骨分化成脂分化C3H10T1/2细胞
- Fibulin-7在小鼠下颌骨髁突发育过程中的表达变化
- 2017年
- 目的 :观察Fibulin-7蛋白在下颌骨髁突发育过程中的时空表达特点。方法 :取胚胎第15.5 d、出生后第1 d、出生后第28 d的C57BL/6J小鼠下颌骨标本,应用免疫组织化学方法检测Fibulin-7在下颌骨髁突软骨不同发育时期的表达情况。结果:Fibulin-7蛋白在小鼠下颌骨髁突发育过程中表达,表达情况随髁突软骨发育成熟而逐渐向成熟软骨细胞层迁移,且表达部位也随之倾向于胞膜和软骨基质中。结论:Fibulin-7蛋白在下颌骨髁突软骨发育的不同阶段皆有表达,推测Fibulin-7参与了髁突软骨分化成熟的生物学过程。
- 欧阳宁鹃李洪亮林雨恒王敏娇沈国芳代杰文
- 关键词：小鼠髁突
- 虚拟技术在牙颌面畸形治疗中的应用被引量：1
- 2018年
- 目的探索虚拟技术在牙颌面畸形治疗中的应用。方法通过颅颌面CT扫描,进行颌面部骨的三维重建,将该模型与激光扫描牙列模型拟合,建立数字化颅颌面-牙列模型。基于此模型进行手术虚拟设计和模拟预测。确定手术方案后,进行牙合板及导板的3D打印。在手术牙合板及导板的指引下进行手术。通过拟合虚拟设计与手术后重建模型来检验手术精确性。结果通过CT重建图像与激光扫描牙列模型的拟合,获得了颅颌面-牙列模型。利用此模型可进行虚拟手术设计和手术模拟。通过不断调试和修正,可获得最佳个体手术方案。3D打印牙合板及导板可精确指导手术的实施。结论在牙颌面畸形的治疗中,虚拟手术设计和虚拟导板技术是一个理想的选择,值得临床推广应用。
- 刘庆成李洪亮王敏娇王旭东沈国芳张诗雷于洪波
- 关键词：虚拟现实手术设计牙颌面畸形正颌手术
- Fbln7在ATDC-5细胞体外软骨向分化过程中的调控作用
- 研究目的:Fbln7作为一种细胞外基质蛋白,在细胞粘附、颅颌面骨及牙齿发生、以及某些遗传性疾病的发生中发挥着重要作用,其mRNA在软骨中呈高表达。研究发现,在受精5d后的斑马鱼胚胎内敲除Fbln7,可引起先天性心脏病及鳃...
- 林雨恒欧阳宁鹃李洪亮赵闫代杰文沈国芳
- 文献传递
- Fibulin-7在小鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空表达
- 2017年
- 目的:观察Fibulin-7蛋白在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的时空表达特点。方法 :取胚胎15.5 d、出生后第1天、第7天的C57BL/6J小鼠下颌骨标本,应用免疫组织化学方法检测Fibulin-7在下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的表达情况。结果:Fibulin-7蛋白在小鼠下颌第一磨牙牙胚自钟状期末期至牙胚发育成熟过程中表达量逐渐增加。结论:Fibulin-7蛋白在牙胚发育的不同阶段均有表达,推测Fibulin-7参与了牙间充质细胞分化为成牙本质细胞、牙髓-牙本质复合体的形成过程。
- 欧阳宁鹃李洪亮林雨恒卢陈佩代杰文沈国芳
- 关键词：小鼠下颌第一磨牙
- 一种创伤性颞下颌关节强直的动物模型及其建立方法
- 本发明公开了一种创伤性颞下颌关节强直的动物模型及其建立方法，通过将低龄小鼠全身麻醉，小鼠耳前区部位皮肤酒精消毒，然后进行切除部分或全部颞下颌关节髁突软骨，另一侧不作任何处理作为对照；切除完毕后进行缝合，术后2周内小鼠进食...
- 代杰文欧阳宁鹃沈国芳朱小芳王旭东史俊李洪亮
- 文献传递
