杨可
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:漯河市中心医院更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 小鼠11β-HSD1基因真核表达载体的构建及应用被引量:1
- 2017年
- 目的构建小鼠11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD1)基因的慢病毒真核表达载体PLJM1-11β-HSD1-GFP,建立小鼠前体脂肪细胞(3T3-L1)高表达11β-HSD1基因的稳定感染细胞株,为11β-HSD1基因的功能研究奠定基础。方法利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从小鼠肝脏c DNA中扩增11β-HSD1开放阅读框ORF,构建针对11β-HSD1基因的真核表达载体,转化感受态DH5α菌株,抽提质粒并进行测序鉴定。用测序成功的质粒和慢病毒包装质粒共同转染293T细胞,产生慢病毒并转染3T3-L1细胞。根据绿色荧光效率挑取单克隆细胞团筛选出稳定细胞株,通过Western blot鉴定PLJM1-11β-HSD1-GFP转染成功。结果经酶切、PCR及测序验证,PLJM1-11β-HSD1-GFP真核表达载体构建成功,并包装慢病毒,绿色荧光效率90%以上,并利用其慢病毒悬液成功感染3T3-L1细胞,筛选出的稳定感染细胞株的3T3-L1细胞成功高表达11β-HSD1蛋白。结论成功构建了11β-HSD1基因的真核表达载体,并建立高表达11β-HSD1的稳定感染细胞株PLJM1-11β-HSD1-GFP-3T3-L1,为进一步研究11β-HSD1基因的功能,特别是在肥胖中的研究奠定了基础。
- 辛婧叶磊杨可沈亚非邓飞
- 关键词:真核表达载体前体脂肪细胞肥胖
- 内分泌科低血糖急诊入院患者37例诊治分析被引量:4
- 2016年
- 目的:探讨内分泌科低血糖急诊入院患者的发病原因、临床表现、治疗方法。方法对内分泌科收治的低血糖急诊入院患者37例的临床资料进行回顾性分析。结果37例患者因低血糖急诊收入漯河市中心医院,其中34例为糖尿病低血糖,3例为非糖尿病低血糖;35例治疗后痊愈出院,1例成为植物人,1例死亡。结论对低血糖急诊入院患者应加强血糖监测,及时对低血糖进行诊断与救治。同时,对糖尿病患者应进行健康教育,合理应用各种降糖药物及胰岛素,避免低血糖发生。
- 辛婧杨可沈亚非邓飞
- 关键词:低血糖症