徐丽
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 供职机构：湖北医药学院基础医学院更多>>
- 发文基金：湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎克雷伯菌KbvR调控因子对细菌生物膜与荚膜形成能力的影响被引量：9
- 2016年
- 目的构建肺炎克雷伯菌LuxR家族KbvR基因缺失突变株与回补株,分析KbvR在肺炎克雷伯菌生长、生物膜形成及荚膜生成中的作用。方法通过自杀载体p KO3-Km质粒构建KbvR基因敲除株,然后扩增出包含KbvR基因编码区、启动子结合区及转录终止区的基因片段,克隆至p GEM-T-easy质粒上构建KbvR基因回补株。绘制不同菌株生长曲线,了解KbvR对细菌生长的影响。通过结晶紫定量实验检测KbvR基因对细菌生物膜形成的影响,拉丝实验、离心试验及RT-PCR检测KbvR基因对细菌荚膜形成的影响。结果成功获得KbvR基因缺失突变株及回补株,RT-PCR结果显示KbvR基因在缺失突变株中不表达,在回补株中重新表达。KbvR基因不影响细菌的生长速度,基因敲除株后细菌生物膜形成及荚膜生成能力下降。体外试管静止培养48 h,与野生株相比基因缺失突变株生物膜形成能力明显下降,而KbvR基因回补株在液体培养基表面能形成明显生物膜。结晶紫染色定量实验发现,基因缺失突变株生物膜形成能力显著低于野生株(P<0.01)。超粘性实验和RT-PCR结果均显示,KbvR基因缺失突变株荚膜形成能力明显下降,说明KbvR基因影响肺炎克雷伯菌生物膜和荚膜的形成。结论 KbvR基因作为密度感应系统LuxR孤儿调控转录因子,正调控肺炎克雷伯菌生物膜的形成。荚膜是细菌生物膜形成的重要因素,KbvR基因可通过影响荚膜形成而调控生物膜的形成。
- 徐丽林迪斯杨靖李健李蓓
- 关键词：肺炎克雷伯菌生物膜形成
- 肺炎克雷伯菌生物膜形成机制的研究进展被引量：11
- 2016年
- 肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)是一类可引起呼吸道、泌尿道、伤口等部位感染的条件致病菌。生物膜形成能力已被证实与肺炎克雷伯菌的致病性和耐药性相关。肺炎克雷伯菌生物膜形成受多种调控因子的调控。深入研究肺炎克雷伯菌生物膜形成因素和调控网络,对寻找有效的预防与治疗手段具有重要意义。本文就肺炎克雷伯菌生物膜形成相关因素及其调控机制的最新研究近展进行了综述。
- 徐丽李蓓
- 关键词：肺炎克雷伯菌生物膜
- 肺炎克雷伯菌CRP调控子对细菌毒力影响与机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的:了解肺炎克雷伯菌调控因子CRP对细菌毒力的影响及其对毒力相关因子磷酸转移酶系统的作用及其机制。方法:构建肺炎克雷伯菌CRP调控因子的基因缺失突变株与回补株,小鼠毒力试验检测CRP对细菌LD50的影响及小鼠生存率的影响,qRT-PCR与lac Z报告基因检测CRP对果糖磷酸转移酶系统EIIC蛋白frwC基因的影响并通过凝胶阻滞试验(EMSA试验)检测CRP调控frwC基因的机制。结果:CRP基因敲除菌株的小鼠毒力明显下降,野生株、CRP基因缺失株及回补株的LD50分别为<100,3.2×10~5和4.5×10~4CFUs。qRT-PCR与lac Z报告基因发现CRP基因敲除后,果糖磷酸转移酶系统EIIC蛋白frwC基因表达量明显下降,EMSA试验发现CRP蛋白能够结合在frwC启动子区。结论:肺炎克雷伯菌CRP调控子与细菌毒力密切相关,并且能够直接正调控frwC基因的表达。除影响细菌荚膜、菌毛、生物膜的形成而影响细菌毒力外,CRP调控子可能通过影响磷酸转移酶系统而影响细菌毒力。
- 范金明欧琴林迪斯徐丽李蓓
- 关键词：肺炎克雷伯菌毒力
