刘华松
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：十堰市太和医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及机制研究被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨miRNA-7过表达对食管癌细胞TE-1顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法:选择食管癌细胞株TE-1,采用Lipofectmin 2000瞬时转染TE-1细胞,转染对照组瞬时转染miRNA-7-Negative Control,转染组瞬时转染miRNA-7-mimic,未转染的食管癌细胞株TE-1为空白对照组。采用实时荧光PCR方法检测3组表皮生长因子受体(EGRF)mRNA、miRNA-7水平;分别采用Western blot法和CCK-8法检测转染组和转染对照组EGRF蛋白水平及对顺铂敏感性的变化。使用免疫荧光标记法,在聚焦显微镜下观察转染对照组及转染组EGFR分布情况。结果:转染对照组与空白对照组EGFR mRNA、及miRNA-7水平差异均无统计学意义(P>0.05);转染组miRNA-7基因表达水平高于转染对照组与空白对照组(P<0.05),转染组EGFR mRNA基因表达水平显著低于转染对照组与空白对照组(P<0.05);在顺铂浓度为16.66、33.33、66.66μmol/L时,转染对照组的细胞抑制率均高于转染组(P<0.05);转染后48 h,转染对照组浆蛋白及核蛋白中EGFR的表达水平高于转染组(P<0.05);转染对照组EGFR荧光定位主要分布在胞浆及胞膜中,细胞阳性率为100.0%;转染组主要表现为EGFR高表达,但是在胞浆及胞膜中表达水平降低,细胞核呈现出约95.0%的阳性。经Spearman秩相关分析结果提示,miRNA-7与EGFR表达之间呈负相关(r=-1.462,P<0.05)。结论:miRNA-7过表达会降低食管癌细胞TE-1对顺铂的敏感性,其机制可能与EGFR核转位增多有关。
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- 关键词：食管癌细胞顺铂表皮生长因子受体
- 过表达KLF4抑制非小细胞肺癌增殖及上皮间质转化的作用机制被引量：3
- 2017年
- 目的探究KLF4调控非小细胞肺癌(NSCLC)增殖及上皮间质转化(EMT)发生的作用机制,为NSCLC的临床研究提供理论依据。方法收集临床病理资料进行统计学分析,免疫组织化学检测KLF4在癌旁及癌组织中的表达,细胞水平检测KLF4在癌细胞和正常细胞中的表达差异,过表达KLF4检测对肺癌细胞的增殖、侵袭、迁移及EMT相关标志物的影响。结果 KLF4在癌组织中的表达低于癌旁组织中的表达,并且与患者的临床分期及远处转移密切相关,细胞水平检测也得到了相同的结果,上调KLF4的表达抑制了细胞的增殖、侵袭及迁移,同时抑制EMT相关的间充质标志物的表达,促进上皮标志物的表达。结论过表达KLF4能够抑制NSCLC增殖及EMT的发生。
- 刘华松徐兰兰张军郭家龙林称意原野曾敏程栋梁
- 关键词：KLF4非小细胞肺癌增殖上皮间质转化
- miRNA-32通过下调PTEN表达促进食管癌细胞的增殖被引量：6
- 2016年
- 目的通过检测miR-32在食管癌组织和食管癌细胞系中的表达,探讨miR-32对食管癌增殖和凋亡的影响及分子机制。方法使用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测47例食管癌组织和7种食管癌细胞系中miR-32表达水平;生物信息学预测miR-32下游靶基因磷酸酶-张力蛋白基因(phosphatase and tensin homologue,PTEN),并通过荧光素酶报告基因法验证其结合状态;通过miR-32 mimics来研究其对PTEN的mRNA和蛋白表达的影响及其对食管癌细胞系KYSE-410增殖和凋亡的影响;通过PTEN回补实验进一步验证miR-32对其的作用。结果 89%(42/47)的食管癌肿瘤组织中miR-32表达明显上调,在低分化的食管癌细胞系KYSE-410中表达程度最高(P<0.05);生物信息学预测miR-32可靶向作用于PTEN,高表达miR-32可明显抑制PTEN 3’UTR荧光素酶活性(P<0.05);高表达miR-32可明显促进KYSE-410增殖,并抑制其凋亡,抑制率28%(P<0.05);高表达miR-32对PTEN mRNA表达无明显影响(P>0.05),但可明显抑制其蛋白表达,抑制率48%(P<0.05);相较于miR-32单独处理组,PTEN补救实验可部分恢复PTEN蛋白的表达,同时也可逆转其对凋亡的抑制作用,此外,在96 h组可明显抑制食管癌细胞增殖(P<0.05),在其他时间点与miR-32组无明显差异(P>0.05)。结论 miR-32可通过下调PETN的表达促进食管癌细胞的增殖。
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- 关键词：食管癌增殖
- 氨磷汀提高人食管癌细胞对顺铂的敏感性被引量：3
- 2019年
- 目的 探讨氨磷汀对人食管癌细胞的顺铂敏感性的影响及机制。方法 按处理药物不同将人食管癌ECA109细胞分为对照组(未给药处理)、顺铂组、氨磷汀组和联合组(氨磷汀+顺铂)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性、流式细胞术检测细胞周期与凋亡率、Western印迹法检测耐药相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果 与对照组比较,联合组细胞增殖活性明显降低、细胞凋亡率明显增加(P<0.01),细胞周期停滞在G0/G1期,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2的表达和多药耐药关联蛋白(MRP)1表达明显降低(P<0.01)。结论 氨磷汀可以体外提高人食管癌细胞对顺铂的化疗敏感性。
- 刘华松徐兰兰
- 关键词：氨磷汀食管癌顺铂化疗敏感性B细胞淋巴瘤-2
- PTPN14对食管癌的抑制作用及其机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶14(PTPN14)对食管癌的抑癌作用及其机制。方法通过转染PTPN14质粒过表达食管癌细胞EC9706中PTPN14的表达,实时荧光定量聚合酶链反应及Western blot检测其过表达效果;四甲基偶氮唑盐比色法检测过表达PTPN14对EC9706细胞增殖的影响;流式细胞术检测过表达PTPN14对EC9706细胞周期的影响;Western blot检测过表达PTPN14对YAP蛋白表达的影响。结果转染PTPN14质粒可上调食管癌细胞系EC9706中PTPN14的表达;过表达EC9706细胞中PTPN14可以抑制食管癌细胞的增殖,使细胞周期阻滞在G1期;过表达EC9706中PTPN14可以下调细胞中YAP的表达水平。结论 PTPN14可通过下调YAP,阻滞食管癌细胞周期,抑制细胞增殖。
- 刘华松徐兰兰张军郭家龙林称意原野曾敏程栋梁
- 关键词：增殖食管癌
- 体外开窗重建分支血管治疗胸腹主动脉病变的临床疗效被引量：1
- 2020年
- 目的探讨开窗重建分支血管方法,研究台上体外开窗主动脉腔内修复(FEVAR)治疗胸腹主动脉病变的临床疗效。方法选取2013年2月至2018年3月十堰市太和医院(湖北医药学院附属太和医院)收治9例胸腹主动脉病变患者。分析术中台上体外开窗技术的应用及围手术期并发症情况,并观察中期治疗效果。结果9枚开窗主体支架成功释放,28个内脏动脉分支通过主体支架开窗或开槽重建,其中有19个分支开窗后置入分支支架。Ⅰ型内漏1例,Ⅱ型内漏1例,Ⅲ型内漏1例均保守治疗好转,肾功能不全1例行透析治疗好转。无30天内再手术,无动脉瘤破裂,动脉瘤体直径缩小,重建内脏分支血管两年通畅率89.29%。结论体外开窗技术可以为病变累及内脏重要分支动脉的患者提供腔内隔绝术治疗,是一种安全、有效的治疗胸腹主动脉病变的方法,中期随访结果满意。
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- 关键词：胸腹主动脉开窗血管重建
