李欣洁
- 作品数:2 被引量:7H指数:1
- 供职机构:郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大豆苷元激活过氧化物酶体增殖子激活受体γ通路抑制人骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移被引量:6
- 2015年
- 目的 观察植物雌激素大豆苷元(DAI)通过激活过氧化物酶体增殖子激活受体(PPAR)γ通路对人骨肉瘤MG63细胞侵袭迁移的影响.方法 将人骨肉瘤MG63细胞分为对照组和浓度20、40、80 μmol/L的DAI处理组,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,定量聚合酶链反应(qPCR)检测PPARγ mRNA表达,免疫细胞化学检测抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的蛋白表达水平.结果 Transwel实验结果显示,20、40、80 μmol/L的DAI处理组细胞侵袭个数分别为(34.15±3.71)、(21.28 ±0.94)和(16.73 ±1.10)个,显著低于对照组的(38.92 ±2.85)个(P<0.01);划痕实验结果显示,DAI各处理组细胞迁移能力较对照组均有所下降,且随DAI浓度增大其作用增强,80 μmol/L组作用最明显;qPCR结果显示,各浓度DAI处理组细胞PPARγ mRNA表达较对照组均升高(P<0.01),且随干预浓度增加而增强;免疫细胞化学检测显示,不同浓度DAI处理组细胞,PTEN表达均升高,MMP-9表达均下降(P<0.01).结论 DAI激活PPARγ,上调PTEN的表达,下调MMP-9表达,抑制人骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移.
- 关红亚张海风宋石李洁李欣洁李月白王义生
- 关键词:大豆苷元骨肉瘤迁移
- 大豆苷元抑制人骨肉瘤MG63细胞增殖并诱导其凋亡与分化被引量:1
- 2016年
- 目的 观察不同浓度大豆苷元(DAI)抑制人骨肉瘤MG63细胞增殖和诱导其凋亡与分化的作用.方法 培养人骨肉瘤MG63细胞,分成对照组和不同浓度DAI干预细胞组.采用噻唑蓝(MTT)法测定1、10、20、40、80、160 μ mol/L DAI对细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对照组、20、80 μmol/L DAI作用24h和48 h的细胞凋亡率,原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测对照组、20、40、80 μmol/L DAI作用48 h的细胞凋亡率,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫细胞化学分别检测20、40、80 μmol/L DAI干预48 h细胞内过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA、生存素(Survivin)蛋白表达,磷酸苯二钠和酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测对照组、10、20、40 μmol/L DAI干预6、9、12d细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性和1、12、24 d细胞中Ⅰ型胶原蛋白表达,茜素红染色观察10、20、40 μmol/L DAI组细胞内钙盐沉积.结果 实验结果显示:1、10、20、40、80、160μmol/L DAI组24 h和48 h的细胞增殖抑制率分别为(10.91 ±6.29)%、(12.53±4.28)%、(18.80±4.14)%、(25.25±5.43)%、(43.99±0.71)%、(50.33±4.17)%和(12.17±4.87)%、(27.49±0.10)%、(31.06±2.86)%、(41.95±3.07)%、(61.53±4.02)%、(62.81±1.48)%,各DAI组均抑制MG63细胞增殖活性,并具有时间和浓度依赖性(F浓度=71.44,P<0.01;F时间=25.69,P<0.01).20、80 μmol/L DAI组中细胞凋亡率高于对照组,80μ moL/L DAI组中细胞凋亡率最高(F主时间=2 690.97,P <0.01;F浓度=5 684.50,P<0.01),TUNEL法结果显示凋亡细胞数量随DAI浓度的升高而增多,两者呈正相关(F=17.29,P<0.01).PPARγ mRNA表达随DAI浓度增加而升高(F=266.93,P<0.01),Survivin蛋白表达阳性率均明显低于对照组(F=128.25,P<0.01).10、20、40 μmol/L DAI组细胞中ALP活性均高于对照组(F浓度=2668.96,P<0.05;F时间=1 015.33,P�
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- 关键词:大豆苷元骨肉瘤脱噬作用分化