张军民 作品数:49 被引量:147 H指数:5 供职机构: 中山大学孙逸仙纪念医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 NSFC-广东联合基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
宿主细胞凋亡与马尔尼菲青霉致病性相关性研究 被引量:2 2011年 目的研究宿主细胞感染马尔尼菲青霉后细胞凋亡、凋亡途径与该菌胞内寄生的相关性。方法马尔尼菲青霉接种于小鼠腹腔内,采用流式细胞术检测4 h、36h的小鼠腹腔细胞凋亡率,用RT-PCR法测定Capase-3、Mcl-1的mRNA水平。结果小鼠腹腔内的炎症细胞凋亡率实验组4h是10.22±3.12,36h是8.22±2.64;空白组4h是23.91±4.10,36h是27.72±8.70;凋亡因子Caspase-3的mRNA的表达量实验组4h是0.65±0.04,36h是0.53±0.02,Mcl-1的mRNA的表达量实验组4h是0.81±0.06,36h是0.92±0.06,与空白组比较其4h、36h均有显著差异性(P<0.05);各组内4h与36h间无明显差异(P>0.05)。结论马尔尼菲青霉可能通过下调Caspase-3 mRNA表达及增加Mcl-1的mRNA表达,从而导致宿主细胞凋亡减少,这可能是马尔尼菲青霉得以存活并随宿主细胞游走播散的致病机制之一。 张军民 林佳吟 谢治 阙冬梅 席丽艳关键词:凋亡 MCL-1 气相色谱-质谱选择离子法评价系统性念珠菌感染与尿液中D/L阿拉伯糖醇比值的关系 2006年 真菌代谢产物的检测在深部真菌感染诊断上的重要意义正成为近年关注的热点。阿拉伯糖醇是真菌代谢产物之一,与系统性念珠菌感染关系密切。它包括两种同分异构体:D-阿拉伯糖醇(D—arabinit01)和L-阿拉伯糖醇(L—arabinit01)。两者均可存在于正常人血液和尿液中,其中D-阿拉伯糖醇是大多数念珠菌的主要代谢产物。在系统性念珠菌感染时,血、尿中D-阿拉伯糖醇浓度会增高,L-阿拉伯糖醇并无明显增高,所以D/L-阿拉伯糖醇比值相应增高,可作为预测系统性念珠菌感染的一个指标。本研究采用气相色谱-质谱选择离子法检测系统性念珠菌感染和疑似感染者尿液中的D/L-阿拉伯糖醇比值.探讨临床系统性念珠菌感染与尿液中D/L-阿拉伯糖醇比值的关系。 李军 李希清 席丽艳 张选红 鲁长明 张军民关键词:系统性念珠菌感染 尿液 深部真菌 代谢产物 同分异构体 盐酸特比萘芬乳膏1周与咪康唑乳膏1周、4周治疗趾间型足癣的多中心随机双盲研究 被引量:3 2011年 目的探讨1%特比萘芬乳膏1周、2%硝酸咪康唑乳膏1周、4周治疗趾间型足癣的疗效、安全性及复发情况。方法采用多中心、随机、双盲、平行对照法,入选患者分层随机分为3组,包括特比萘芬1周组(特比萘芬外用每日2次连续1周后再使用3周安慰剂)、咪康唑1周组(咪康唑每日2次连用1周+3周安慰剂)和咪康唑4周组(咪康唑每日2次连用4周),用药后第1、3、4、6、9、12周随访进行临床、真菌学评估。结果152例真菌培养阳性的患者进入疗效分析。4周随访时,特比萘芬1周组,咪康唑4周组和咪康唑1周组的真菌治愈率分别为94.7%、87.8%和82.6%;3组综合疗效有效率分别89.5%、81.6%和63.0%;第12周随访时,3组真菌复发率分别为12.96%、13.95%和21.05%;不良反应发生率3组分别为2.38%、2.38%和3.57%。结论外用1%特比萘芬乳膏1周治疗趾间型足癣与外用咪康唑乳膏4周疗效和复发率相近。 李岷 张建中 王家俊 章强强 温海 顾军 曾凡钦 赖维 姚晨 张文娟 顾菊林 徐红 陈江汉 毕新岭 张军民 黄怀球 朱敏 张超英 李莉 吕桂霞 沈永年 刘维达关键词:抗真菌药 临床研究性 BCG-MSG培养基鉴定几种常见的丝状真菌 被引量:1 2004年 目的 寻找一种鉴定丝状真菌的新培养基。方法 选择常见的 6种皮肤癣菌和申克孢子丝菌 ,采用自行配制的溴甲酚绿奶粉葡萄糖琼脂培养基 (BCG MSG)培养 ,并与马玲薯葡萄糖琼脂和沙堡弱琼脂两种培养基的菌落形态进行比较 ,在 5天、7天、14天记录色素的形成情况 ,总观察时间为 14天。结果 红色毛癣菌在BCG MSG上产色快 ,其他皮肤癣菌色素变化不大 ,只是色素比较鲜艳。结论 BCG MSG培养基具有产色效果好而快 ,直观感好和配制简单等特点 ,值得推广应用。 鲁长明 席丽艳 谢穗生 张军民关键词:丝状真菌 皮肤癣菌 Fonsecaea monophora多聚酮合酶基因的扩增及敲除载体的构建 被引量:1 2016年 目的扩增Fonsecaea monophora中控制黑素合成的多聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)基因并测序,构建PKS基因敲除载体。方法扩增PKS基因,根据测序结果设计引物,从Fonsecaea monophora基因组DNA扩增PKS基因5’-同源臂和3’-同源臂,从质粒pBHt1中扩增潮霉素B抗性标记基因(hyg),最后将各片段插入载体PDHt/sk中。结果测序得到5 389bp大小的PKS基因序列,构建了PKS基因的敲除载体,用酶切及测序等方法鉴定载体构建成功。结论成功构建Fonsecaea monophora PKS基因敲除载体,为研究PKS基因及黑素的生物学功能奠定了良好的基础。 肖星 张军民 冯姣 陈志文 陈春梅 何娅 贺丹 孙九峰 席丽艳关键词:根癌农杆菌 地塞米松对巨噬细胞信号转导接头蛋白MyD88的抑制作用 2009年 目的研究地塞米松对马尔尼菲青霉固有免疫反应中巨噬细胞信号转导接头蛋白MyD88的作用。方法马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,应用地塞米松作用后采用ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR及Western blot法检测MyD88的蛋白及基因表达。结果地塞米松抑制被马尔尼菲青霉激活的巨噬细胞产生TNF-α,并抑制巨噬细胞接头蛋白MyD88的蛋白及mRNA的表达。结论地塞米松对马尔尼菲青霉固有免疫反应抑制作用与其对MyD88的抑制相关。 赵文杰 席丽艳 马黎 张军民 李希清 鲁长明 李飞关键词:地塞米松 马尔尼菲青霉 巨噬细胞 肿瘤坏死因子Α 补体受体3在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用 被引量:2 2013年 目的探讨补体受体3(CR3)在小鼠巨噬细胞识别马尔尼菲青霉中的作用。方法以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为靶细胞,分别与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞在37oC,5%CO2培养箱中共同培养1h后,逆转录PCR检测CR3mRNA的表达,Western印迹检测CR3蛋白的表达,流式细胞仪检测吞噬率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清中细胞因子水平。siRNA靶向下调巨噬细胞CR3的表达后与马尔尼菲青霉灭活分生孢子共培养,按照前述方法检测吞噬率及各细胞因子水平。采用SPSS16.0统计软件进行单因素方差分析(ANOVA)检测各组间指标差异。结果RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉灭活分生孢子、灭活酵母细胞、活分生孢子、活酵母细胞共培养后,四组之间比较,CR3mRNA、蛋白表达差异均无统计学意义(P〉0.05),吞噬率分别为95.14%、89.56%、91.03%、90.78%,各组之间差异无统计学意义(P〉0.05);共培养后,白介素(IL)2、干扰素(IFN)γ等Th1型,IL-4、IL-10等Th2型细胞因子均呈不同程度升高,但四个共培养组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。siRNA靶向下调CR3表达后,RAW264.7细胞与马尔尼菲青霉共培养,其对马尔尼菲青霉的吞噬率下降为10.89%,与未干扰组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);同时,巨噬细胞分泌细胞因子的水平与未干扰组比较下降。结论CR3为巨噬细胞识别、介导吞噬马尔尼菲青霉的模式识别受体之一;IL-2、IFN-γ Th1型,IL-4、IL-10Th2型细胞因子可能均参与巨噬细胞抗马尔尼菲青霉感染免疫。 胡永轩 张军民 鲁莎 李希清 梁宇恒 鲁长明 席丽艳关键词:巨噬细胞 马尔尼菲青霉 受体 补体 疾病模型 动物 马内菲青霉致病性系列研究 <正>马内菲青霉是青霉属中唯一的温度依赖性双相真菌,25℃表现为菌丝相的表型,37℃表现为酵母相的表型,以往的研究表明致病性与双相性密切相关。由该菌引起的马内菲青霉病主要流行地域为东南亚地区。在我国南方地区近年来发病率迅... 席丽艳 刘红芳 徐晓容 黄庚史 张军民 李希清 谢婷文献传递 马尔尼菲青霉菌丝相和酵母相的异柠檬酸裂解酶表达差异的研究 被引量:1 2007年 目的比较不同培养条件下马尔尼菲青霉(Pm)菌丝相及酵母相的异柠檬酸裂解酶(ICL)基因转录水平,初步探讨乙醛酸循环在Pm致病中的意义。方法将Pm分为高糖培养的菌丝相(MH)、低糖培养的菌丝相(ML)及高糖培养的酵母相(YH)、低糖培养的酵母相(YL)4组,采用实时定量RT-PCR法比较各组ICL基因转录水平。结果MH、ML、YH、YL组ICL相对表达量分别为1.000、3.000、3.654、69.530,组间差异有统计学意义(P<0.05);温度增高和葡萄糖浓度降低两因素之间具有协同效应。结论Pm酵母相的ICL转录水平较菌丝相增高,而且低糖培养时增高更为显著,提示乙醛酸循环可能在Pm致病过程中起着重要的作用。 李军 席丽艳 刘红芳 张军民 李希清 徐晓容关键词:马尔尼菲青霉 RT-PCR Mac-1在小鼠巨噬细胞识别白念珠菌中的作用 被引量:2 2013年 目的探讨Mac-1在小鼠巨噬细胞识别白念珠菌中的作用。方法以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为靶细胞,与白念珠菌灭活酵母、活酵母细胞共培养,RT-PCR检测Mac-1mRNA表达,western blot检测Mac-1蛋白表达,FITC包被白念珠菌后流式细胞技术检测巨噬细胞对其吞噬率,ELISA检测共培养上清细胞因子水平;siRNA靶向下调巨噬细胞Mac-1表达,检测共培养后吞噬率及细胞因子水平。结果 RAW264.7细胞与活酵母细胞、灭活酵母细胞共培养后,Mac-1mRNA、蛋白表达无差异(P>0.05),巨噬细胞的吞噬率分别为85.28%和84.90%,无明显差异性(P>0.05);共培养后,IL-2、IFN-γ等Th1型,IL-4、IL-10等Th2型均呈不同程度升高,但二组之间也无明显差异(P>0.05)。siRNA靶向下调RAW264.7细胞的Mac-1后,与白念珠菌共培养,巨噬细胞对白念珠菌的吞噬率下降为28.60%(P<0.05);同时,巨噬细胞分泌细胞因子的水平下降。结论在先天性免疫早期阶段,Mac-1为巨噬细胞识别、介导吞噬白念珠菌的模式识别受体之一;IL-2、IFN-γ等Th1型,IL-4、IL-10等Th2型细胞因子均参与巨噬细胞抗白念珠菌感染免疫。 胡永轩 张军民 李希清 周真 梁宇恒 席丽艳关键词:巨噬细胞 小鼠 MAC-1 白念珠菌