周春平
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- CD133+造血祖细胞对大肠癌细胞生物学特性的影响与探讨
- 研究背景和目的:
大肠癌(Colorectal cancer,CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来,由于生活饮食习惯改变的原因,我国大肠癌的发病率和死亡率不断呈逐渐上升趋势,而侵袭和转移是导致患者死亡的主要...
- 周春平
- 关键词:结直肠癌造血祖细胞生物学特性肿瘤转移灶
- 肿瘤干细胞表面标记CD133高亲和结合肽的筛选与初步鉴定
- 肿瘤干细胞具有无限增殖和分化潜能,与肿瘤生长、侵袭、转移密切相关。CD133是最为公认的肿瘤干细胞标记之一,但到目前为止还没有发现CD133的天然配体,且尚未见CD133的特异性结合肽的报道。因此筛选CD133的特异性结...
- 李学农孙晋敏张超田平阁周春平
- 关键词:肿瘤干细胞CD133
- 文献传递
- 降落和重叠延伸PCR构建靶向肿瘤干细胞腺病毒载体及感染实验被引量:1
- 2011年
- 目的应用降落和重叠延伸PCR法构建对肿瘤干细胞有特异靶向性的高效载体-复制缺陷型腺病毒载体,观察其对CD133+人大肠癌细胞株SW480的感染效率。方法利用重叠延伸PCR技术扩增5型腺病毒纤毛球端HI环两端的基因序列,定向插入真核表达质粒pEGFP-N1中,构建重组质粒pEGFP-N1.KNOB△HI,同时在缺失HI环部位引入EcoRV限制性酶切位点。在此基础上,用降落PCR克隆纤毛基因全长编码区序列,构建出腺病毒穿梭质粒pNEB-F5。利用凝胶图像分析和基因测序验证所构建质粒的正确性。再与pAdEasy-1,pShuttle-GFP在E.coli BJ5183中同源重组,得腺病毒载体Ad5FHI-GFP和Ad5-GFP。用Ad5FHI-GFP和Ad5-GFP分别感染CD133+人大肠癌细胞株SW480,通过荧光显微镜观察感染效率。结果降落PCR和重叠延伸PCR都扩增出特异性条带,测序结果与预期相符。与Ad5-GFP相比,Ad5FHI-GFP对CD133+人大肠癌细胞株SW480有显著提高。结论利用降落和重叠延伸PCR成功构建新型靶向肿瘤干细胞的腺病毒载体,利用降落和重叠延伸PCR成功构建新型靶向肿瘤干细胞的腺病毒载体,其对CD133+人大肠癌细胞株SW480实验显示Ad5FHI-GFP组感染效率明显强于Ad5-GFP组。
- 张超刘国炳田平阁周春平李学农
- 关键词:降落PCR重叠延伸PCR复制缺陷型腺病毒穿梭质粒